本文關(guān)鍵詞：生命不同階段炎癥暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的持續(xù)損害

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【摘要】：目的:探討生命不同階段炎癥暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的持續(xù)損害作用,主要包括出生前LPS暴露對(duì)雄性小鼠睪丸發(fā)育、睪酮合成和精子發(fā)生過程的長(zhǎng)期損害效應(yīng),以及成年期LPS急性暴露對(duì)雄性小鼠睪酮合成和睪丸組織形態(tài)的損害效應(yīng)。方法:本研究由兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組成。實(shí)驗(yàn)1,為探討出生前LPS暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的長(zhǎng)期損害作用,孕鼠被隨機(jī)分為對(duì)照組和LPS組。LPS組孕鼠自妊娠第13天(GD 13)至GD 17每日經(jīng)腹腔注射給予LPS(50mg/kg),而對(duì)照組被給予等容積生理鹽水(NS)處理。GD18時(shí),每組12只孕鼠被處死并取出胎鼠,辨別性別后稱重;雄性胎鼠取血后收集血清,采用放射免疫法(RIA)檢測(cè)血清睪酮(T)水平;取胎鼠睪丸置于MDF液中固定,進(jìn)行睪丸病理組織學(xué)檢查;采用免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測(cè)睪丸3β-羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)的表達(dá)。其余孕鼠自然分娩,出生后第21天(PND 21)時(shí)將仔鼠斷乳并保持每籠留有5只小鼠,PND 26時(shí)分別測(cè)量雄性和雌性仔鼠的肛門生殖器距離(AGD);PND 35和63時(shí),每組分別隨機(jī)選擇6只雄鼠,取血后頸椎脫臼處死,取睪丸、前列腺和精囊等組織,并稱重;收集雄性仔鼠血清,用RIA法檢測(cè)雄鼠血清T含量,用ELISA法檢測(cè)血清黃體生成素(LH)含量;將左側(cè)睪丸置于MDF液中固定,進(jìn)行睪丸HE染色,用免疫組織化學(xué)法分析睪丸組織3β-HSD表達(dá);取PND 63仔鼠附睪尾部進(jìn)行精子計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)2,為探討成年期LPS急性暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的損害效應(yīng),30只健康成年雄性小鼠被隨機(jī)分入對(duì)照組和LPS組。LPS處理組小鼠經(jīng)腹腔注射給予LPS(1 mg/kg),對(duì)照組給予等容積NS。LPS處理后不同時(shí)點(diǎn)(3、6、12和24 h)將小鼠分批剖殺,雙側(cè)睪丸稱重并計(jì)算其臟器系數(shù);睪丸組織HE染色后觀察病理組織學(xué)改變;采用RIA法檢測(cè)小鼠血清睪酮含量;用免疫組化法標(biāo)記3β-HSD,以觀察睪丸間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量的變化;用定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)小鼠睪丸睪酮合成酶m RNA表達(dá)水平;用蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)睪丸睪酮合成酶相關(guān)蛋白質(zhì)水平。結(jié)果:孕晚期小鼠暴露LPS(50mg/kg)后,GD18雄性胎鼠體重明顯降低,胎鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)異常聚集;PND 26雄性仔鼠AGD明顯減小;PND 35雄性仔鼠睪丸、前列腺和精囊重量明顯下降,血清睪酮水平顯著降低;睪丸I-VI期生精小管的百分比明顯減少,而IX-XII期生精小管百分比卻明顯上升,且在部分小鼠睪丸生精小管內(nèi)觀察到生精細(xì)胞大量脫落現(xiàn)象;PND 63雄性仔鼠血清T含量明顯降低,附睪尾精子數(shù)量顯著減少。成年期雄鼠急性暴露LPS(1 mg/kg)后,12和24 h小鼠睪丸重量、睪丸系數(shù)均明顯增加,睪丸組織生精上皮結(jié)構(gòu)被破壞,管內(nèi)生精細(xì)胞數(shù)量減少;LPS處理后3、6和12 h小鼠血清睪酮水平明顯下降,但小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量無明顯變化;進(jìn)一步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),LPS處理明顯下調(diào)小鼠睪丸T合成酶(St AR、17β-HSD、CYP17A1和CYP11A1等)m RNA表達(dá),以及睪丸St AR蛋白表達(dá)。結(jié)論:生命不同階段炎癥暴露可持續(xù)損害雄性小鼠生殖與內(nèi)分泌功能,即出生前LPS暴露持續(xù)抑制雄性小鼠睪酮合成,損害小鼠睪丸發(fā)育,并導(dǎo)致成年后小鼠精子發(fā)生障礙;成年期急性LPS暴露引起睪丸組織病理學(xué)損害,并通過下調(diào)睪丸睪酮合成酶表達(dá)而降低小鼠血清睪酮含量。
【關(guān)鍵詞】：脂多糖 雄性生殖 內(nèi)分泌 睪丸 睪酮
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 研究一：出生前LPS暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的持續(xù)損害14-31
• 1. 材料和方法14-18
• 2. 結(jié)果18-29
• 3. 討論29-30
• 4. 小結(jié)30-31
• 研究二：成年期LPS急性暴露對(duì)雄性小鼠生殖內(nèi)分泌的損害作用31-43
• 1. 材料和方法31-35
• 2. 結(jié)果35-41
• 3. 討論41-42
• 4. 小結(jié)42-43
• 結(jié)論43
• 參考文獻(xiàn)43-50
• 附錄50-51
• 致謝51-53
• 綜述53-67
• 參考文獻(xiàn)60-67

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王小亮;傅更鋒;還錫萍;羊海濤;李雷;丁萍;劉曉燕;徐金水;邱濤;藺楠;丁建平;;江蘇省2006-2011年生殖道沙眼衣原體感染的流行病學(xué)特征分析[J];中華疾病控制雜志;2014年03期

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本文編號(hào)：973638