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三聚氰胺對(duì)雄性小鼠生殖毒性的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-10-04 15:15

  本文關(guān)鍵詞:三聚氰胺對(duì)雄性小鼠生殖毒性的實(shí)驗(yàn)研究


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【摘要】:目的初步探討三聚氰胺對(duì)雄性小鼠的生殖毒性及其毒性作用機(jī)制。方法健康雄性昆明種小鼠50只,隨機(jī)分為5組,每組10只,分別為生理鹽水陰性對(duì)照組;三聚氰胺低、中、高劑量組:400、800、1600mg/(kg.d);環(huán)磷酰胺陽性對(duì)照組。各實(shí)驗(yàn)組小鼠連續(xù)給藥5天,于首次給藥后的第35天處死。1.稱量小鼠睪丸、附睪,計(jì)算臟器系數(shù);2.顯微鏡下計(jì)數(shù)精子數(shù)量、精子活動(dòng)率、精子畸形率;3.ELISA法檢測小鼠睪丸組織山梨醇脫氫酶(Sorbitoldehydrogenase,SDH)、乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,LDH)活力;4.比色法測定并計(jì)算小鼠睪丸組織超氧化物歧化酶(Superoxide Dimutese,SOD)活力、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量;5.化學(xué)發(fā)光法測定小鼠睪酮(testosterone,T);6.睪丸病理切片HE染色,觀察小鼠睪丸組織的病理學(xué)改變;7.流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠睪丸細(xì)胞凋亡率。8.免疫組化法檢查凋亡相關(guān)蛋白B細(xì)胞淋巴瘤基因/白血病基因2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的表達(dá)。結(jié)果1.三聚氰胺各劑量染毒組睪丸臟器系數(shù)下降,其中,中、高劑量組與陰性對(duì)照組比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);附睪臟器系數(shù)也下降,高劑量組與陰性對(duì)照組比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.隨著染毒劑量的增加,精子數(shù)量及精子活動(dòng)率呈下降趨勢,精子畸形率呈上升趨勢,與陰性對(duì)照組比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05)。3.各實(shí)驗(yàn)組SDH活力呈下降趨勢,各劑量染毒組與陰性對(duì)照組比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01/P<0.05);LDH活力呈下降趨勢,,高劑量組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。4.隨著三聚氰胺染毒劑量的增加,SOD活力下降,各劑量組與陰性對(duì)照組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);MDA含量有上升,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5.各實(shí)驗(yàn)組T水平升高,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。6.睪丸組織病理學(xué)切片可見三聚氰胺各劑量組睪丸曲細(xì)精管排列紊亂、松散,各級(jí)生精細(xì)胞明顯減少。7.凋亡:三聚氰胺各實(shí)驗(yàn)組睪丸細(xì)胞凋亡率呈上升趨勢,其中高劑量組與陰性對(duì)照組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。8.三聚氰胺各劑量組Bcl-2表達(dá)呈下降趨勢,與陰性對(duì)照組比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);Bax、Caspase-3表達(dá)均呈上升趨勢,中、高劑量組與陰性對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論三聚氰胺對(duì)雄性昆明鼠有一定的生殖毒性作用。可能的作用機(jī)制:1.三聚氰胺使SOD活性下降,可能引起小鼠睪丸抗氧化能力降低;2.三聚氰胺使睪丸組織結(jié)構(gòu)發(fā)生病理改變,能量代謝酶LDH及SDH的活性降低,可能引起小鼠精子質(zhì)量和數(shù)量發(fā)生改變;3.三聚氰胺使凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)下調(diào),Bax、Caspase-3的表達(dá)上調(diào),可能引起睪丸細(xì)胞凋亡增加,從而進(jìn)一步影響精液的質(zhì)量和數(shù)量。
【關(guān)鍵詞】:三聚氰胺 雄性小鼠 生殖毒性
【學(xué)位授予單位】:貴陽醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R114
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • 前言7-9
  • 材料與方法9-17
  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-28
  • 討論28-34
  • 結(jié)論34-35
  • 參考文獻(xiàn)35-38
  • 英文摘要38-40
  • 致謝40-41
  • 縮略詞中英文對(duì)照41-43
  • 附:綜述43-52
  • 參考文獻(xiàn)50-52

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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2 Wyrobek AJ ,張維維;關(guān)于非人類哺乳動(dòng)物精子試驗(yàn)的評(píng)價(jià)[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);1984年05期

3 李鳳文 ,劉榮珍 ,趙鵬 ,楊俊峰;環(huán)磷酰胺對(duì)小白鼠精子畸形影響的探討[J];廣西醫(yī)學(xué);2003年03期

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6 王玉燕;柴瑋杰;高珉之;多凱;王瑞

本文編號(hào):971367


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