發(fā)布時(shí)間：2017-10-02 06:02

  本文關(guān)鍵詞：MS2噬菌體在貝類食源性病毒檢測(cè)中過(guò)程質(zhì)控應(yīng)用

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【摘要】：目的研究MS2噬菌體作為過(guò)程質(zhì)控品在貝類食源性病毒檢測(cè)中的應(yīng)用。方法采用雙層瓊脂培養(yǎng)法制備MS2噬菌體懸液,計(jì)算效價(jià);實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)檢驗(yàn)其穩(wěn)定性;比較3種RNA提取方法的提取效率,確定M S2噬菌體的最適添加量范圍;分析M S2噬菌體添加對(duì)貝類食源性病毒檢測(cè)的影響。結(jié)果穩(wěn)定性研究表明-20℃和-80℃28 d MS2噬菌體(懸液的效價(jià)濃度為7.13×1011pfu/m L)時(shí)RNA含量無(wú)明顯變化[t=0.464,P=0.653(-20℃);t=0.602,P=0.561(-80℃)]。MS2噬菌體最適添加量范圍為7.13×108~7.13×107pfu/m L。在最適添加范圍內(nèi),試劑盒方法和Trizol裂解結(jié)合磁珠純化方法回收率均1%。2種陽(yáng)性樣品均被檢出,其Ct值比較接近,M S2噬菌體對(duì)貝類食源性病毒檢測(cè)無(wú)影響(t=0.170,P=0.873)。結(jié)論M S2噬菌體可作為貝類食源性病毒qRT-PCR檢測(cè)的過(guò)程質(zhì)控品,是監(jiān)控假陰性結(jié)果的一種簡(jiǎn)便有效的方法。
【作者單位】： 北京出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;
【關(guān)鍵詞】： MS噬菌體 過(guò)程質(zhì)控品 食源性病毒 實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR) 貝類
【基金】：國(guó)家質(zhì)檢總局科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014IK109;2016IK017)
【分類號(hào)】：R155.5
【正文快照】： 徐蕾蕊,魏海燕,馬丹,汪琦,張西萌,李丹,付溥博,劉莉,魏詠新,曾靜食源性病毒是以食物為載體,導(dǎo)致人類患病的病毒。食源性病毒一直難以得到及時(shí)有效的監(jiān)控,不僅對(duì)食品衛(wèi)生和人民健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅,也對(duì)食品工業(yè)和國(guó)民經(jīng)濟(jì)造成很大的影響。目前,以分子生物學(xué)技術(shù)為基礎(chǔ)的PCR方法成，

本文編號(hào)：957914