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β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后雙酚A暴露的子鼠雄性生殖細胞中的表達

發(fā)布時間:2017-09-25 00:06

  本文關鍵詞:β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后雙酚A暴露的子鼠雄性生殖細胞中的表達


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【摘要】:背景:雙酚A(bisphenol A,BPA)是人們生活中經(jīng)常接觸到的一類酚類環(huán)境雌激素,通過干擾機體自身激素的合成和分泌等,產(chǎn)生相應的生物學毒性作用。以往研究表明BPA對睪丸有毒性,是潛在的內(nèi)分泌干擾物。BPA影響機體機制具有多樣性,而Wnt/β-catenin信號通路是調(diào)節(jié)機體生長和發(fā)育的一個關鍵性的信號通路。Wnt/β-catenin信號通路在腫瘤細胞的侵襲和轉移、造血干細胞、神經(jīng)前體細胞和細胞增殖分化等領域研究較多,而在BPA生殖毒性領域的研究還比較少。目的:本研究初步探討β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后雙酚A(BPA)暴露對子鼠雄性生殖表達及意義。方法:將受孕后的重量相當?shù)腎CR雌鼠隨機均分為4組,每組9只,即溶劑對照組、雙酚A低組(10nmol/L)、雙酚A中組(50 nmol/L)、雙酚A高組(300 nmol/L)。自PGD0起開始孕鼠染毒,哺乳期間繼續(xù)染毒,斷乳后雄性仔鼠繼續(xù)染毒直至產(chǎn)后42d(PGD42)。仔鼠出生后統(tǒng)計每組小鼠的數(shù)量和雌雄比例,并于PGD42處死雄性ICR仔鼠,無菌取出雙側仔鼠睪丸稱重,部分4%多聚甲醛固定,用于H.E染色和免疫組化檢測蛋白β-catenin、DKK-1,剩余部分置液氮凍存?zhèn)錅y蛋白,用于Western bolt定量檢測β-catenin、DKK-1蛋白的表達。結果:實驗組每只母鼠所生的子鼠數(shù)量和雌雄比例與溶劑對照組相比無明顯差異(P0.05)。BPA組較溶劑對照組仔鼠睪丸臟器系數(shù)降低,且隨著染毒劑量的增加下降趨勢越明顯。H.E染色結果表明,在暴露BPA后,小鼠的睪丸組織發(fā)生了病理學變化,即睪丸生精小管中的生精細胞層數(shù)和細胞數(shù)量隨著染毒劑量的增加逐漸減少,細胞排列紊亂等。免疫組化顯示,β-catenin、DKK-1蛋白多位于睪丸的間質(zhì)細胞和精原細胞中,Western blot檢測結果顯示β-catenin、DKK-1蛋白表達也隨著染毒劑量的增加而明顯增加。結論:在小鼠出生前后暴露BPA可使其睪丸臟器系數(shù)下降,睪丸組織的形態(tài)學發(fā)生改變,β-catenin、DKK-1蛋白表達明顯增加,兩種蛋白異常的表達多位于睪丸間質(zhì)細胞和精原細胞中。說明BPA可以經(jīng)胎盤,母乳和直接接觸等方式影響雄性子鼠生殖系統(tǒng)的發(fā)育,其機制可能與Wnt/β-catenin信號通路主要蛋白(β-catenin、DKK-1)有關。
【關鍵詞】:雙酚A β-catenin DKK1 睪丸生殖細胞
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R114
【目錄】:
  • 英文縮略詞表5-7
  • 中文摘要7-9
  • abstract9-11
  • 1 引言11-13
  • 2 材料與方法13-22
  • 3 結果22-30
  • 4 討論30-35
  • 5 小結35
  • 參考文獻35-42
  • 附錄42-43
  • 致謝43-44
  • 綜述44-50
  • 參考文獻48-50

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 靳翠紅,趙劍,金一和,蔡原;雙酚A對雄性小鼠生殖系統(tǒng)的影響[J];中國醫(yī)科大學學報;2002年02期

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本文編號:914222

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