本文關(guān)鍵詞：七種雙酚類化合物雌激素活性評(píng)價(jià)及其在食品中檢測(cè)方法的建立和應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 雙酚類化合物 雌激素活性 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜 谷物 總膳食研究

【摘要】：雙酚S（Bisphenol S，BPS）、雙酚F（Bisphenol F，BPF）、雙酚A（Bisphenol A，BPA）、雙酚B（Bisphenol B，BPB）、雙酚AF（Bisphenol AF，BPAF）、四氯雙酚A（Tetrachlorobisphenol A，TCBPA）和四溴雙酚A（Tetrabromobisphenol A，TBBPA）是7種常見(jiàn)的雙酚類化合物，廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中。同時(shí)這7種化合物也是備受關(guān)注的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物和污染物。 本研究針對(duì)這7種化合物開(kāi)展了一系列的工作，其中主要內(nèi)容有：1.比較研究了7中雙酚類化合物的雌激素效應(yīng)，包括利用WST-8新型四唑鹽細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，考察了這7種化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞T47D和MCF-7的增殖效應(yīng)，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)了這7種化合物對(duì)雌激素受體α下游基因組織蛋白酶D（CTSD）、乳腺癌雌激素調(diào)控蛋白1（GREB1）和三葉因子1（TFF1）表達(dá)的調(diào)控作用，考察了BPAF對(duì)ERK的激活作用。2.利用固相萃取結(jié)合LC-MS/MS技術(shù)建立了谷物類食品中BPS、BPF、BPA、BPB和BPAF的檢測(cè)方法。3.利用固相萃取結(jié)合LC-MS/MS技術(shù)建立了酒水飲料中這7種雙酚類化合物的檢測(cè)方法。4.利用所建立的檢測(cè)方法對(duì)我國(guó)部分省市總膳食樣品中谷物類、豆類、薯類和酒水飲料類中雙酚類化合物進(jìn)行暴露評(píng)估。主要結(jié)果如下： 1.在所選濃度范圍內(nèi)，除了TBBPA，其他6種雙酚類化合物均能顯著刺激T47D和MCF-7細(xì)胞的增殖，并且呈現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)。通過(guò)S曲線擬合，計(jì)算得出這6種化合物的半數(shù)效應(yīng)濃度，并得出其雌激素活性大小為：BPAFBPBBPABPFBPSTCBPATBBPA；在所選濃度范圍內(nèi)，7種雙酚類化合物均能顯著誘導(dǎo)雌激素受體α下游基因的表達(dá)；BPAF在100nmol/L濃度下即能快速激活MAPKs信號(hào)通路中ERK的磷酸化水平，通過(guò)非基因組途徑發(fā)揮其內(nèi)分泌干擾效應(yīng)。 2.建立了谷物類食品中五種雙酚類化合物的檢測(cè)方法：樣品經(jīng)乙腈超聲提取兩次后，大米、面粉經(jīng)HLB柱富集凈化，玉米面經(jīng)HLB串聯(lián)Sep-Pak NH2柱富集凈化，最后用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）檢測(cè)目標(biāo)化合物。5種目標(biāo)化合物在3種基質(zhì)中高中低加標(biāo)水平回收率分別為62.2%-117.4%、61.2%-121.6%和60.8%-112.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于20%，定量限在0.01-0.25μg/kg之間。應(yīng)用所建方法，對(duì)北京市售的12份谷物類食品進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)BPS、BPA和BPAF檢出率較高，其中BPS和BPA達(dá)到100%。 3.建立了酒水飲料中7種雙酚類化合物的檢測(cè)方法：樣品上樣前用甲酸將PH調(diào)至3-5，果汁、可樂(lè)直接經(jīng)Plexa柱富集凈化、白酒用超純水稀釋一倍后經(jīng)Plexa柱富集凈化，最后用LC-MS/MS方法檢測(cè)目標(biāo)化合物。7種目標(biāo)化合物在果汁、可樂(lè)和白酒中3個(gè)加標(biāo)水平回收率分別為81.1%-111.1%、59.4%-101.1%、79.2%-102.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于11%，定量限在0.0015-0.1μg/L之間。將該方法應(yīng)用于北京市采集的樣品，，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)BPA檢出率高達(dá)88%，而其他幾種物質(zhì)的檢出率則相對(duì)較低。 4.利用上述所建方法，對(duì)采集自我國(guó)河北、上海、福建和廣西的101份膳食樣品（谷物類、豆類、薯類、水及飲料、酒類）進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)BPA和BPS檢出率較高，而B(niǎo)PB、TCBPA和TBBPA均未檢出。
【關(guān)鍵詞】：雙酚類化合物 雌激素活性 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜 谷物 總膳食研究
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R155.5
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 中英文縮寫(xiě)對(duì)照表7-12
• 第1章 引言12-20
• 1.1 前言12-13
• 1.3 雙酚類化合物的毒理學(xué)效應(yīng)13-14
• 1.4 雙酚類化合物在環(huán)境基質(zhì)中的暴露水平14-16
• 1.4.1 雙酚類化合物在室內(nèi)灰塵中的暴露水平15
• 1.4.2 雙酚類化合物在土壤和沉積物中的暴露水平15
• 1.4.3 雙酚類化合物在水中的暴露水平15-16
• 1.5 雙酚類化合物在食品中的暴露水平16
• 1.6 食品基質(zhì)中雙酚類化合物的分析方法16-17
• 1.7 立題背景與研究?jī)?nèi)容17-20
• 1.7.1 選題依據(jù)17-18
• 1.7.2 研究?jī)?nèi)容18-20
• 第2章 7 種雙酚類化合物雌激素活性的評(píng)價(jià)20-37
• 2.1 主要儀器、試劑及材料20-21
• 2.2 細(xì)胞培養(yǎng)21
• 2.3 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)21-22
• 2.4 細(xì)胞相關(guān)基因的表達(dá)22-25
• 2.4.1 細(xì)胞總 mRNA 的提取22-23
• 2.4.2 cDNA 模版的制備23
• 2.4.3 熒光定量 PCR23-25
• 2.5 Western blot 實(shí)驗(yàn)25
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理25-26
• 2.7 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-34
• 2.7.1 BPs 對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖影響26-28
• 2.7.2 7 種雙酚類化合物和雌二醇半數(shù)效應(yīng)濃度28-29
• 2.7.3 BPs 對(duì)雌激素受體α下游基因表達(dá)水平的影響29-33
• 2.7.4 Western blot 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-34
• 2.8 討論34-36
• 2.9 本章小結(jié)36-37
• 第3章 谷物類食品中 5 種雙酚類物質(zhì)檢測(cè)方法的建立37-47
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法37-40
• 3.1.1 儀器與試劑37-38
• 3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制38
• 3.1.3 樣品前處理38
• 3.1.4 色譜質(zhì)譜條件38-39
• 3.1.5 質(zhì)量控制39-40
• 3.1.6 方法學(xué)40
• 3.2 結(jié)果與討論40-45
• 3.2.1 前處理?xiàng)l件的優(yōu)化40-43
• 3.2.2 方法學(xué)確證43-45
• 3.3 實(shí)際樣品的測(cè)定及分析45
• 3.4 本章小結(jié)45-47
• 第4章 酒水及飲料中 7 種雙酚類物質(zhì)檢測(cè)方法的建立47-55
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法47-49
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器47
• 4.1.2 樣品前處理47-48
• 4.1.3 色譜質(zhì)譜條件48
• 4.1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制48
• 4.1.5 質(zhì)量控制48
• 4.1.6 方法學(xué)確證48-49
• 4.2 結(jié)果與討論49-53
• 4.2.1 前處理?xiàng)l件的優(yōu)化49-52
• 4.2.2 方法學(xué)確證52-53
• 4.3 實(shí)際樣品的測(cè)定及分析53-54
• 4.4 本章小結(jié)54-55
• 第5章 雙酚類化合物檢測(cè)方法在中國(guó)部分省市膳食暴露評(píng)估中的應(yīng)用55-64
• 5.1 實(shí)驗(yàn)方法55-58
• 5.1.1 調(diào)查地區(qū)選擇55-56
• 5.1.2 總膳食聚類56
• 5.1.3 樣品采集及處理56
• 5.1.4 樣品分析56-57
• 5.1.5 質(zhì)量控制57-58
• 5.1.6 攝入量評(píng)估方法58
• 5.1.7 數(shù)據(jù)處理58
• 5.2 結(jié)果與討論58-62
• 5.2.1 膳食樣品中 BPs 檢測(cè)狀況58-60
• 5.2.2 BPs 在膳食樣品中的分布60-61
• 5.2.3 我國(guó)居民雙酚類化合物攝入量水平61-62
• 5.3 本章小結(jié)62-64
• 第6章 結(jié)論與展望64-66
• 6.1 結(jié)論64
• 6.2 展望64-66
• 致謝66-68
• 參考文獻(xiàn)68-73
• 碩士期間研究成果73

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 楊蘊(yùn)嘉;牛宇敏;楊奕;張晶;邵兵;;在線固相萃取-液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定飲用水中的雙酚A和壬基酚[J];衛(wèi)生研究;2013年01期

本文編號(hào)：882857