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硫酸鈹誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞凋亡機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2017-09-15 12:18

  本文關(guān)鍵詞:硫酸鈹誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞凋亡機(jī)制研究


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【摘要】:目的觀察硫酸鈹對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞(MRC-5細(xì)胞)凋亡的影響。方法取離體培養(yǎng)MRC-5細(xì)胞,隨機(jī)分為對(duì)照組,硫酸鈹?shù)、中、高劑量染毒組,拮抗劑組和激活劑組。前4組硫酸鈹染毒終濃度分別為0、1、10、100μmol/L;拮抗劑組先后分別予終濃度均為10μmol/L的硫酸鈹和2-氨基乙酯二苯基硼酸聯(lián)合處理;激活劑組先后分別予終濃度均為10μmol/L的硫酸鈹和肌醇三磷酸(IP3)聯(lián)合處理。各組染毒后分別于培養(yǎng)24和48 h時(shí)間點(diǎn)收獲細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,激光共聚焦法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子(Ca~(2+))濃度,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法檢測(cè)三磷酸肌醇受體Ⅲ型(IP_3RⅢ)和B細(xì)胞淋巴瘤-2(BCL-2)的mRNA相對(duì)表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定IP_3RⅢ和IP3蛋白表達(dá)水平。結(jié)果在24和48 h時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞凋亡率,硫酸鈹3個(gè)劑量組均低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.05),拮抗劑組分別低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組和硫酸鈹中劑量組(P0.05);激活劑組48 h時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞凋亡率低于同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)照組(P0.05),高于同時(shí)間點(diǎn)硫酸鈹中劑量組(P0.05)。24 h時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度,在硫酸鈹?shù)蛣┝拷M低于對(duì)照組(P0.05),硫酸鈹高劑量組高于對(duì)照組(P0.05);48 h時(shí)間點(diǎn)硫酸鈹中和高劑量組細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度均低于對(duì)照組(P0.05);分別與24、48 h時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組和硫酸鈹中劑量組比較,拮抗劑組細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度均下降(P0.05),激活劑組細(xì)胞Ca~(2+)濃度均升高(P0.05)。24和48 h時(shí)間點(diǎn)BCL-2 mRNA表達(dá)水平在硫酸鈹3個(gè)劑量組、拮抗劑和激活劑組均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組(P0.05)。細(xì)胞IP_3RⅢmRNA表達(dá)水平在硫酸鈹3個(gè)劑量組、拮抗劑和激活劑組均高于對(duì)照組(P0.05)。24 h時(shí)間點(diǎn)IP_3RⅢ蛋白表達(dá)水平在硫酸鈹中劑量組、拮抗劑組和激活劑組均低于對(duì)照組(P0.05);48 h時(shí)間點(diǎn)IP_3RⅢ蛋白表達(dá)水平,在硫酸鈹高劑量組低于對(duì)照組(P0.05),拮抗劑和激活劑組均高于硫酸鈹中劑量組(P0.05)。細(xì)胞IP3蛋白表達(dá)水平在硫酸鈹?shù)、中劑量組以及激活劑組均高于對(duì)照組(P0.05),激活劑組高于硫酸鈹中劑量組(P0.05)。結(jié)論硫酸鈹可能通過調(diào)節(jié)IP_3R/Ca~(2+)通路,改變細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度,抑制MRC-5細(xì)胞凋亡;IP3可以改善硫酸鈹引起的MRC-5細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)下降。
【作者單位】: 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)系;寧夏疾病預(yù)防控制中心;寧夏醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】硫酸鈹 人胚肺成纖維細(xì)胞 肌醇三磷酸 三磷酸肌醇受體Ⅲ型 -氨基乙酯二苯基硼酸 細(xì)胞凋亡 鈣離子
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81360415)
【分類號(hào)】:R114
【正文快照】: 750004;3.寧夏醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生學(xué)系,750004鈹是毒性最強(qiáng)的金屬元素之一,職業(yè)接觸可導(dǎo)致以肺部損傷為主的急、慢性鈹病[1]。異常細(xì)胞凋亡是多種疾病發(fā)生的主要原因[2],與肺部損傷亦有密切關(guān)系。細(xì)胞凋亡是由多種基因調(diào)控的程序性細(xì)胞死亡[3]。有研究發(fā)現(xiàn),金屬離子

【相似文獻(xiàn)】

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1 張朝暉;王淑娟;駱金俊;黃煉;李程;廖永紅;;硫酸鈹致小鼠肝線粒體功能障礙研究[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2012年05期

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5 張志遠(yuǎn);劉志宏;安曉丹;朱玲勤;劉賀榮;張勇;王光俊;;硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞氧化損傷及枸杞多糖的抗氧化效應(yīng)[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2012年02期

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3 黃煉;硫酸鈹致小鼠肺線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔高通透性開放及其后續(xù)效應(yīng)研究[D];南華大學(xué);2013年

4 張志遠(yuǎn);硫酸鈹誘發(fā)人胚肺細(xì)胞凋亡機(jī)制及枸杞多糖保護(hù)作用的初步研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2012年

5 嚴(yán)青;硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2014年

6 王淑娟;硫酸鈹對(duì)小鼠肝組織DNA甲基化及p53、c-Fos、c-Jun蛋白表達(dá)的影響[D];南華大學(xué);2013年

7 龔愛紅;IP_3RⅢDNA甲基化調(diào)控對(duì)硫酸鈹致人胚肺成纖維細(xì)胞損傷的分子機(jī)制研究[D];寧夏醫(yī)科大學(xué);2014年

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本文編號(hào):856503

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