SD-PMA-ddPCR檢測食品中單核細胞增生李斯特氏菌
發(fā)布時間:2017-09-13 09:43
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【摘要】:【目的】檢測食品中單核細胞增生李斯特氏菌活菌!痉椒ā坷妹撗跄懰徕c(SD)對受損細胞預處理,然后使疊氮溴化丙錠(PMA)進入受損細胞與DNA發(fā)生共價交聯(lián),提取細菌基因組DNA進行微滴式數(shù)字PCR(dd PCR)檢測!窘Y(jié)果】0.1%SD和5.0 mg/L PMA協(xié)同作用,可以有效抑制108 CFU/m L的單核細胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR擴增。經(jīng)過SD和PMA對樣品預處理,dd PCR可以在死菌存在條件下,定量檢測雞肉中單核細胞增生李斯特氏菌活菌,消除了"假陽性"結(jié)果的出現(xiàn)。活菌靈敏度檢測結(jié)果顯示:SD-PMA-dd PCR的靈敏度為2.0 copies/20μL。SD-PMA-dd PCR方法精密度和穩(wěn)定性良好。【結(jié)論】SD-PMA-dd PCR在檢測食源性致病菌方面有巨大的發(fā)展空間。
【作者單位】: 威海出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心;山東出入境檢驗檢疫局;
【關(guān)鍵詞】: 疊氮溴化丙錠 脫氧膽酸鈉 微滴式數(shù)字PCR 單核細胞增生李斯特氏菌
【基金】:國家質(zhì)檢總局科技計劃項目(No.2014IK114)~~
【分類號】:R155.5
【正文快照】: 隨著社會的發(fā)展和人們對健康的關(guān)注,食品安全已經(jīng)成為影響廣泛而深遠的社會性問題。單核細胞增生李斯特氏菌是一種常見的食源性致病菌,生命力很強,人感染后可導致腦膜炎、胃腸炎、敗血癥等[1-3],嚴重危害人們身體健康。因此,定量檢測單核細胞增生李斯特氏菌引起各國的高度關(guān)注,
本文編號:842941
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