本文關(guān)鍵詞：臘肉源廣譜抑菌產(chǎn)生菌的分離及抑菌物質(zhì)研究

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【摘要】：發(fā)酵肉制品作為土家族、苗族等少數(shù)民族地區(qū)的特色肉制品因其風(fēng)味獨(dú)特而深受人們喜愛。發(fā)酵肉制品傳統(tǒng)上為自然發(fā)酵,大量有害菌在發(fā)酵過程中被其內(nèi)在的有益菌抑制,因此,它是篩選適用于肉制品生物貯存的良好資源。 本文以湖南湘西發(fā)酵肉制品為菌源,從中分離出1株對大腸桿菌(G-)、沙門氏菌(G-)、枯草芽孢桿菌(G+、蠟樣芽胞桿菌(G+)和地衣芽孢桿菌(G+)有廣譜抑菌作用的細(xì)菌,對其采用生理生化與分子生物學(xué)方法進(jìn)行鑒定。并采用響應(yīng)面法對該菌株產(chǎn)抑菌物質(zhì)的能力進(jìn)行優(yōu)化,并對其抑菌成分做了一些相關(guān)性研究,得到以下一些結(jié)論。 (1)菌種的分離與鑒定以MRS選擇培養(yǎng)基,通過初篩和復(fù)篩分離出一株對大腸桿菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌有顯著抑菌作用的菌株LJ-3,該菌的形態(tài)學(xué)特征是幼齡菌為乳白色、老齡菌為淡黃色或帶深黃色,不透明、圓形、邊緣圓滑、凸起,革蘭氏染色為陽性。經(jīng)過16S rDNA序列分析,該菌株的16S rDNA基因序列與植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)的同源性為99%,同時經(jīng)過生理生化試驗后分析表明,該菌株的主要特征也與植物乳桿菌相似,故可確定該菌為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。 (2)抑菌能力優(yōu)化以枯草芽孢桿菌為被試菌,抑菌圈直徑大小為標(biāo)準(zhǔn),通過單因素試驗以及響應(yīng)面試驗,探索出提高LJ-3產(chǎn)抑菌物質(zhì)的最優(yōu)發(fā)酵條件和最適培養(yǎng)基。試驗結(jié)果得出最優(yōu)培養(yǎng)基成份為檸檬酸三銨0.32g、酵母膏2.2g、葡萄糖1.9g,最優(yōu)發(fā)酵條件為pH6.00、發(fā)酵溫度30℃、接種量5.5%。LJ-3產(chǎn)抑菌物質(zhì)對枯草芽孢桿菌的抑制能力,在經(jīng)過優(yōu)化后的發(fā)酵條件下培養(yǎng)抑菌圈直徑大小平均達(dá)到31.54mm。 (3)抑菌物質(zhì)分析通過熱處理、pH處理、蛋白酶、H202酶處理以及透析膜的試驗對植物乳桿菌LJ-3抑菌物質(zhì)進(jìn)行分析,證明該菌株代謝產(chǎn)物在酸性條件下有較強(qiáng)的抑菌能力,通過HPLC分離后的抑菌試驗說明抑菌產(chǎn)物主要是熱穩(wěn)定性較強(qiáng)的6000Da的小分子物質(zhì),同時也存在一些大分子物質(zhì),蛋白酶降解試驗表明該菌的抑菌物質(zhì)中有蛋白類成分。
【關(guān)鍵詞】：乳酸菌 植物乳桿菌 廣譜抑菌 發(fā)酵肉制品
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R155.5
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第一章 緒論9-18
• 1.1 發(fā)酵肉制品中微生物種類及其作用9-11
• 1.1.1 乳酸菌9-10
• 1.1.2 微球菌與葡萄球菌10
• 1.1.3 霉菌和酵母10-11
• 1.2 生物防腐劑的國內(nèi)外研究進(jìn)展11-16
• 1.2.1 植物功能中抑菌物質(zhì)的研究11-13
• 1.2.2 微生物代謝過程中抑菌物質(zhì)的研究13-16
• 1.3 常見抑菌物質(zhì)的弊端16
• 1.4 本課題研究意義16-17
• 1.5 本研究的主要內(nèi)容17-18
• 1.5.1 湘西發(fā)酵肉制品中抑制芽孢細(xì)菌產(chǎn)生菌的分離與鑒定17
• 1.5.2 植物乳桿菌LJ-3產(chǎn)抑菌物質(zhì)的響應(yīng)面優(yōu)化17
• 1.5.3 植物乳桿菌LJ-3代謝產(chǎn)物的抑菌成分的分析17-18
• 第二章 湘西發(fā)酵肉制品中廣譜抑菌微生物的分離與鑒定18-28
• 2.1 材料與方法18-22
• 2.1.1 試驗材料與儀器18-19
• 2.1.2 試驗方法19-22
• 2.2 結(jié)果與分析22-26
• 2.2.1 發(fā)酵肉制品中具有抑菌作用的微生物的分離22-23
• 2.2.2 具有抑菌作用的菌種的鑒定23-24
• 2.2.3 生理生化性質(zhì)分析24-25
• 2.2.4 16S rDNA基因序列比對及同源性分析鑒定結(jié)果25-26
• 2.3 結(jié)論與討論26-28
• 第三章 植物乳桿菌LJ-3產(chǎn)抑菌物質(zhì)的響應(yīng)面優(yōu)化28-46
• 3.1 材料與方法28-31
• 3.1.1 試驗材料與儀器28-29
• 3.1.2 試驗方法29-31
• 3.2 結(jié)果與分析31-45
• 3.2.1 培養(yǎng)基單因素優(yōu)化31-34
• 3.2.2 發(fā)酵條件單因素優(yōu)化34-37
• 3.2.3 LJ-3產(chǎn)抑菌物質(zhì)的最適發(fā)酵條件37-44
• 3.2.4 驗證試驗結(jié)果44-45
• 3.3 結(jié)論與討論45-46
• 第四章 植物乳桿菌LJ-3代謝產(chǎn)物的抑菌成分的分析46-55
• 4.1 試驗材料與方法46-49
• 4.1.1 試驗材料與設(shè)備46-47
• 4.1.2 試驗方法47-49
• 4.2 結(jié)果與分析49-53
• 4.2.1 熱處理對抑菌效果的影響49
• 4.2.2 pH對抑菌效果的影響49-50
• 4.2.3 蛋白酶與H_2O_2酶對抑菌效果的影響50-51
• 4.2.4 透析膜試驗51-52
• 4.2.5 高效液相色譜HPLC測定52-53
• 4.3 結(jié)論與討論53-55
• 第五章 結(jié)論與展望55-57
• 5.1 全文總結(jié)55
• 5.2 本研究的主要創(chuàng)新之處55-56
• 5.3 論文的不足與展望56-57
• 參考文獻(xiàn)57-61
• 致謝61-62
• 個人簡歷62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：791904