本文關(guān)鍵詞：硒拮抗鎘對雞脾淋巴細(xì)胞免疫和炎癥因子的影響

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【摘要】：鎘是環(huán)境污染物并且對生物體有潛在的毒性,在工業(yè)上的大量使用,已變成污染人類和環(huán)境的主要重金屬,蓄電池、冶煉、煤礦等是主要污染物的來源。已經(jīng)知道硒和鎘有相互生物學(xué)作用,硒是微量礦物質(zhì),在動物和人類的健康上具有很重要的作用。本研究主要研究鎘/硒在禽類對免疫因子和炎癥因子的影響。首先培養(yǎng)雞脾淋巴細(xì)胞,用鎘(10-6 mol/L的氯化鎘),硒(10-7 mol/L的亞硒酸鈉),二者混合和對照組作用雞脾淋巴細(xì)胞分別為12h,,24h,,36h,,48h,60h。收集每個時間點(diǎn)的細(xì)胞分別提取RNA和蛋白和檢測IL-1β,IL-2,IL-4,IL-10,IL-17,IFN-γ,NF-κB,INOS,COX-2,TNF-α和PGE2的m RNA表達(dá)水平和NF-κB,COX-2的蛋白表達(dá)水平。和對照組和加硒組比較,加鎘組IL-2,IL-4,IL-10,IL-17,IFN-γ的mRNA表達(dá)水平顯著降低。相反,IL-1β,NF-κB,INOS,COX-2,TNF-α和PGE2的mRNA表達(dá)水平顯著增加。在硒加鎘組,IL-2,IL-4,IL-10,IL-17,IFN-γ的m RNA表達(dá)水平比相應(yīng)加鎘組的高,但是沒有達(dá)到加硒組和對照組的水平。硒加鎘組IL-1β,NF-κB,INOS,COX-2,TNF-α和PGE2的mRNA表達(dá)水平比相應(yīng)加鎘組的低。NF-κB和COX-2的蛋白表達(dá)水平和m RNA表達(dá)水平的結(jié)果一致。硒部分拮抗鎘誘導(dǎo)的毒性。
【關(guān)鍵詞】：硒 鎘 免疫因子 炎癥因子 雞脾淋巴細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-10
• 1 前言10-20
• 1.1 鎘的毒性及其研究進(jìn)展10-13
• 1.1.1 鎘理化性質(zhì)及其在自然界的分布10
• 1.1.2 鎘污染的來源10-11
• 1.1.3 機(jī)體內(nèi)鎘的代謝11
• 1.1.4 鎘污染的現(xiàn)狀11
• 1.1.5 鎘的毒性11-13
• 1.1.5.1 鎘的器官毒性12
• 1.1.5.2 鎘的生殖毒性12-13
• 1.1.5.3 鎘對免疫的影響13
• 1.2 硒的作用及其研究進(jìn)展13-16
• 1.2.1 硒的理化性質(zhì)和分布14
• 1.2.2 硒的吸收與排泄14-15
• 1.2.3 硒的生物學(xué)效應(yīng)15-16
• 1.2.3.1 硒對免疫系統(tǒng)的影響15-16
• 1.2.3.2 硒拮抗鎘16
• 1.3 免疫和炎癥因子16-19
• 1.4 試驗(yàn)的目的和意義19-20
• 2 材料與方法20-28
• 2.1 主要儀器20
• 2.2 主要試劑20-21
• 2.3 主要試劑的配制方法21-22
• 2.4 試驗(yàn)方法22-28
• 2.4.1 雞脾淋巴細(xì)胞懸浮和處理的準(zhǔn)備22
• 2.4.2 免疫和炎癥基因的mRNA表達(dá)檢測22-25
• 2.4.2.1 RNA的提取22-23
• 2.4.2.2 RNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA23
• 2.4.2.3 實(shí)時定量PCR引物的設(shè)計與合成23-24
• 2.4.2.4 實(shí)時定量PCR24-25
• 2.4.2.5 Pfaffl法分析基因表達(dá)的相對差異25
• 2.4.3 免疫和炎癥因子的蛋白表達(dá)檢測25-26
• 2.4.3.1 蛋白的提取25
• 2.4.3.2 蛋白的定量25-26
• 2.4.3.3 Western檢測蛋白表達(dá)26
• 2.4.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析26-28
• 3 結(jié)果與分析28-34
• 3.1 RT-PCR檢測結(jié)果28-33
• 3.1.1 雞脾淋巴細(xì)胞IL-1β mRNA的表達(dá)28
• 3.1.2 雞脾淋巴細(xì)胞IL-2 mRNA的表達(dá)28-29
• 3.1.3 雞脾淋巴細(xì)胞IL-4 mRNA的表達(dá)29
• 3.1.4 雞脾淋巴細(xì)胞IL-10 mRNA的表達(dá)29
• 3.1.5 雞脾淋巴細(xì)胞IL-17 mRNA的表達(dá)29-30
• 3.1.6 雞脾淋巴細(xì)胞IFN-γ mRNA的表達(dá)30
• 3.1.7 雞脾淋巴細(xì)胞COX-2 mRNA的表達(dá)30-31
• 3.1.8 雞脾淋巴細(xì)胞INOS mRNA的表達(dá)31
• 3.1.9 雞脾淋巴細(xì)胞NF-κB mRNA的表達(dá)31-32
• 3.1.10 雞脾淋巴細(xì)胞PGE_2 mRNA的表達(dá)32
• 3.1.11 雞脾淋巴細(xì)胞TNF-α mRNA的表達(dá)32-33
• 3.2 Western Blot檢測結(jié)果33-34
• 4 討論34-38
• 5 結(jié)論38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-45
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王光勝;耿德勤;王元偉;陳孝東;楊同慧;常春紅;;亞硒酸鈉對大鼠腦缺血再灌注損傷的海馬神經(jīng)元的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2010年10期

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本文編號：779249