本文關(guān)鍵詞：鈣對鉛致大鼠腦組織損傷的營養(yǎng)干預(yù)機(jī)制研究

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【摘要】：[目的]通過觀察不同劑量鈣對染鉛大鼠腦組織中二價(jià)礦物元素和海馬與皮質(zhì)組織形態(tài)的影響,并從分子水平研究鈣對染鉛大鼠海馬與皮質(zhì)的影響,進(jìn)而探究鈣對鉛致腦組織損傷的營養(yǎng)干預(yù)機(jī)制,為進(jìn)一步補(bǔ)鈣預(yù)防鉛的危害提供理論依據(jù)。[方法]選用21日齡的清潔級雄性SD大鼠60只,共分五組,每組12只。分別為對照組(基礎(chǔ)飼料,蒸餾水)、染鉛組(基礎(chǔ)飼料,0.2%醋酸鉛水)、試驗(yàn)Ⅰ組(基礎(chǔ)飼料添加0.5%碳酸鈣,0.2%醋酸鉛水)、試驗(yàn)Ⅱ組(基礎(chǔ)飼料添加1%碳酸鈣,0.2%醋酸鉛水)和試驗(yàn)Ⅲ組(基礎(chǔ)飼料添加2%碳酸鈣,0.2%醋酸鉛水)。連續(xù)飼養(yǎng)60天后,取大鼠腦、海馬及皮質(zhì),測定腦指數(shù),及鈣、鉛、鐵、鋅、銅、錳、鎂等二價(jià)礦物元素的含量;通過HE染色切片,觀察海馬和皮質(zhì)的組織形態(tài)；用熒光定量RT-PCR法測定海馬與皮質(zhì)中Grm5. Camk2a、Grinl、Homerl、Prkca 和 ERK2 的 mRNA表達(dá)量;用Westernb1ot測定大鼠海馬中CaMKII的蛋白表達(dá)量。[結(jié)果](1)與對照組相比,各組大鼠腦指數(shù)都明顯降低；與染鉛組相比,試驗(yàn)組差異均極顯著升高(P0.01),且試驗(yàn)Ⅱ組腦指數(shù)達(dá)到最大。(2)與對照組相比,染鉛組大鼠腦組織中鈣、鋅、鐵、鎂的含量都極顯著降低(P0.01),鉛的含量明顯升高(P0.01),銅、錳的含量則無明顯變化。與染鉛組相比,試驗(yàn)組大鼠腦組織中鈣、鐵、鎂含量均極顯著升高(P0.01),且試驗(yàn)Ⅲ組含量最高；鋅的含量極顯著升高(P0.01),且試驗(yàn)Ⅱ組含量最高;鉛的含量明顯降低,試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ組差異達(dá)極顯著(P0.01),且試驗(yàn)Ⅱ組含量最低；銅、錳的含量均無明顯變化。(3)與對照組相比,染鉛組海馬與皮質(zhì)細(xì)胞數(shù)量較少,細(xì)胞層變薄,細(xì)胞間隙增大,核仁不清晰。與染鉛組相比,試驗(yàn)Ⅱ組海馬與皮質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增加,細(xì)胞間隙縮小,核仁較為清晰,大部分細(xì)胞結(jié)構(gòu)完好；試驗(yàn)Ⅲ組海馬細(xì)胞核較清晰,但細(xì)胞數(shù)目較少;皮質(zhì)細(xì)胞體形小,核仁不清晰。(4)與對照組相比,染鉛組海馬和皮質(zhì)中Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca、 ERK2的mRNA表達(dá)量均極顯著降低(P0.01)。與染鉛組相比,試驗(yàn)Ⅰ組海馬中Grm5、Camk2a、Prkca、ERK2和皮質(zhì)中Homerl、Camk2a、Grinl mRNA的表達(dá)量均顯著升高(P0.05、P0.01);試驗(yàn)Ⅱ組和Ⅲ組的海馬和皮質(zhì)中目的基因mRNA表達(dá)量均顯著升高(P0.05、P0.01)。(5)與對照組比較,染鉛組大鼠海馬中CaMKIⅠ的蛋白表達(dá)量極顯著下降(P0.01)。與染鉛組相比,試驗(yàn)Ⅱ組CaMKII的蛋白表達(dá)量極顯著上升(P0.01),試驗(yàn)Ⅲ組顯著升高(P0.05)。[結(jié)論]補(bǔ)充適當(dāng)劑量的鈣能調(diào)控大鼠腦組織中因鉛而引起的鈣、鐵、鋅、鎂等二價(jià)礦物元素的失調(diào),緩解鉛對大鼠海馬及皮質(zhì)的損傷,并可通過調(diào)控海馬及皮質(zhì)中NMDAR和mGluR5信號通路介導(dǎo)的相關(guān)基因及海馬中CaMKII的蛋白表達(dá)等干預(yù)鉛對腦組織的損害。
【關(guān)鍵詞】：鈣 鉛 海馬 腦 皮質(zhì) 基因及蛋白表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R151
【目錄】：

• 摘要7-9
• 第一章 文獻(xiàn)綜述9-16
• 1 鉛致神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究進(jìn)展9-12
• 1.1 鉛的吸收與代謝9
• 1.2 鉛對腦組織的影響9-10
• 1.3 鉛致腦組織損傷的機(jī)制10-12
• 2 鈣對鉛致神經(jīng)系統(tǒng)損傷干預(yù)機(jī)制的研究進(jìn)展12-14
• 2.1 鈣的吸收及生理功能12
• 2.2 鈣對鉛的拮抗作用12-13
• 2.3 鈣對鉛致NMDAR通道的調(diào)控機(jī)制13
• 2.4 鈣對鉛致mGluR5通道的調(diào)控機(jī)制13-14
• 3 研究目的與意義14-15
• 4 技術(shù)路線15-16
• 第二章 鈣對染鉛大鼠腦組織鉛、鈣、鐵、鋅、銅、鎂、錳的影響16-23
• 1 材料和方法16-17
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料16
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法16-17
• 1.3 統(tǒng)計(jì)分析17
• 2 結(jié)果與分析17-22
• 2.1 鈣對染鉛大鼠腦指數(shù)的影響17
• 2.2 鈣對染鉛大鼠腦組織鈣、鉛、鋅、鐵、銅、鎂、錳含量的影響17-22
• 3 討論22
• 4 小結(jié)22-23
• 第三章 鈣對染鉛大鼠腦組織形態(tài)的影響23-31
• 1 材料和方法23-26
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料23
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法23-26
• 2 結(jié)果與分析26-29
• 2.1 鈣對染鉛大鼠腦海馬形態(tài)的影響26-27
• 2.2 鈣對染鉛大鼠腦皮質(zhì)形態(tài)的影響27-29
• 3 討論29-30
• 4 小結(jié)30-31
• 第四章 鈣對染鉛大鼠海馬與皮質(zhì)NMDAR和mGluR5通路相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響31-54
• 1 材料與方法31-34
• 1.1 試驗(yàn)動物及樣品的采集31
• 1.2 材料31-32
• 1.3 實(shí)驗(yàn)方法32-34
• 2 結(jié)果與分析34-52
• 2.1 RNA純度及質(zhì)量檢測35
• 2.2 海馬與皮質(zhì)內(nèi)參與目的基因mRNA標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立及回歸方程的設(shè)定35-38
• 2.3 海馬內(nèi)參與目的基因mRNA的擴(kuò)增動力學(xué)曲線和熔解曲線38-41
• 2.4 皮質(zhì)內(nèi)參與目的基因mRNA的擴(kuò)增動力學(xué)曲線和熔解曲線41-45
• 2.5 海馬和皮質(zhì)β-actin、Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca和ERK2 cDNA擴(kuò)增電泳圖45
• 2.6 鈣對染鉛大鼠海馬Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca和ERK2 mRNA表達(dá)量的影響45-48
• 2.7 鈣對染鉛大鼠皮質(zhì)Grm5、Camk2a、Grin1、Homer1、Prkca和ERK2 mRNA表達(dá)量的影響48-52
• 3 討論52-53
• 4 小結(jié)53-54
• 第五章 鈣對染鉛大鼠海馬中CaMKII蛋白表達(dá)的影響54-58
• 1 材料與方法54-56
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料54-55
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法55-56
• 2 結(jié)果與分析56-57
• 3 討論57
• 4 小結(jié)57-58
• 全文結(jié)論58-59
• 參考文獻(xiàn)59-63
• Abstract63-65
• 致謝65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：610363