本文關鍵詞：萊菔硫烷對鎘暴露小鼠生精機能干預作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[背景]鎘(Cd)是一種嚴重的環(huán)境污染物,可以經消化道及皮膚吸收,具有多種器官毒性,鎘能誘導生物體產生大量活性氧自由基而形成氧脅迫,引起一系列脂質過氧化反應,從而使機體抗氧化體系失衡。萊菔硫烷(Sulforaphane, SFN)是一種有機硫化合物,是迄今最高效的抗氧化物之一,能有效減少氧化應激和組織細胞的損傷。[目的]本試驗主要研究萊菔硫烷通過Nrf2-ARE通路對染鎘雄性小鼠生殖機能的保護作用。[方法]購買健康的清潔級雄性昆明系小鼠60只,隨機分成4組,分別為：空白對照組(H2Oi.p.)、氯化鎘組(2.3 mg/kg CdCl2 i.p.)、萊菔硫烷組(10 mg/kg SFN i.p.).鎘+萊菔硫烷組(10 mg/kg SFN i.p.;2.3 mg/kg CdCl2 i.p.),連續(xù)給藥10 d,檢測小鼠睪丸組織結構功能變化、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的變化。運用相對熒光定量PCR及Western blot方法檢測睪丸組織核因子E2相關因子2(Nrf2)及其靶基因谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、血紅素加氧酶1 (HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)及醌氧化還原酶1(NQO1) mRNA和蛋白水平。[結果]1.鎘對小鼠睪丸組織結構有一定的破壞,影響其生理功能,萊菔硫烷對小鼠睪丸結構和功能沒有影響,萊菔硫烷對鎘攻毒小鼠的睪丸組織結構具有一定的保護作用。2.與對照組小鼠相比,鎘會顯著降低小鼠睪丸中GSH含量及T-SOD活性p0.01),顯著提高MDA的含量(p＜0.01)。相比空白組萊菔硫烷顯著提高GSH含量及T-SOD活性p0.05),MDA的含量無顯著差異(p＞0.05)。與鎘組相比鎘+萊菔硫烷組顯著升高了GSH含量及T-SOD活性(p＜0.01),顯著降低了MDA的表達量(p＜0.01)。3.相比正常組小鼠,鎘降低了小鼠睪丸中的Nrf2及其下游靶基因nRNA及蛋白水平(p＜0.01,p＜0.05),萊菔硫烷提高了Nrf2及其下游靶基因mRNA及蛋白水平(p＜0.01,p0.05),與鎘組相比鎘+萊菔硫烷組顯著提高了Nrf2及其下游靶基因mRNA及蛋白水平p0.01,p0.05)。[結論]鎘會降低睪丸生精機能,使睪丸組織抗氧化能力減弱,發(fā)生氧化損傷,而萊菔硫烷可拮抗鎘誘導的損傷作用。萊菔硫烷通過激活Nrf2上調其下游的抗氧化和解毒酶表達水平,揭示Nrf2-ARE通路參與鎘誘發(fā)的內源性應激防御機制。
【關鍵詞】：氯化鎘 萊菔硫烷 小鼠 睪丸 Nrf-ARE通路
【學位授予單位】：沈陽農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R114
【目錄】：

• 中文摘要10-11
• 英文摘要11-13
• 第一部分 引言13-20
• 1.1 研究背景13-14
• 1.2 鎘的防治14-15
• 1.2.1 螯合劑與鎘14
• 1.2.2 金屬硫蛋白與鎘14-15
• 1.2.3 鋅與鎘15
• 1.2.4 鈣與鎘15
• 1.2.5 維生素與鎘15
• 1.2.6 萊菔硫烷與鎘15
• 1.3 萊菔硫烷的化學作用15-18
• 1.3.1 萊菔硫烷與腫瘤16
• 1.3.2 萊菔硫烷與免疫調節(jié)16
• 1.3.3 萊菔硫烷與腦和神經的損傷16-17
• 1.3.4 萊菔硫烷與抗炎作用17
• 1.3.5 萊菔硫烷與抗氧化損傷17-18
• 1.4 Nrf2-Keap1/ARE信號通路18-19
• 1.4.1 轉錄因子核相關因子E2相關因子2(Nrf2)簡介18
• 1.4.2 Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關蛋白1(Keap1)簡介18-19
• 1.5 本試驗目的與意義19-20
• 第二部分 試驗部分20-58
• 試驗一 鎘對雄性小鼠生精機能、MDA及T-SOD影響的研究20-27
• 2.1 試驗材料20-21
• 2.1.1 試驗動物20
• 2.1.2 分組及給藥20
• 2.1.3 主要試劑的配制20
• 2.1.4 試驗藥品及試劑20-21
• 2.1.5 主要儀器21
• 2.2 試驗方法21-24
• 2.2.1 精液品質的檢測21-22
• 2.2.2 總蛋白定量檢測22
• 2.2.3 T-SOD活性的檢測22-23
• 2.2.4 MDA含量的檢測23-24
• 2.2.5 數據統計分析24
• 2.3 試驗結果24-25
• 2.3.1 小鼠的死亡結果24
• 2.3.2 小鼠精液品質的檢測結果24-25
• 2.3.3 小鼠睪丸T-SOD和MDA的檢測結果25
• 2.4 討論25-26
• 2.5 小結26-27
• 試驗二 萊菔硫烷對鎘中毒小鼠生精機能的干預作用的研究27-37
• 3.1 試驗材料27-28
• 3.1.1 試驗動物27
• 3.1.2 分組及給藥27
• 3.1.3 試驗藥品和試劑27
• 3.1.4 試驗儀器27-28
• 3.2 試驗方法28-30
• 3.2.1 小鼠精液品質的檢測28
• 3.2.2 HE染色28-29
• 3.2.3 血清睪酮含量的檢測29
• 3.2.4 T-SOD、GSH和MDA的檢測29-30
• 3.2.5 數據統計分析30
• 3.3 試驗結果30-35
• 3.3.1 小鼠睪丸及附睪臟器系數檢測結果30-31
• 3.3.2 小鼠精液品質檢測結果31-32
• 3.3.3 小鼠睪丸HE染色結果32-33
• 3.3.4 小鼠睪酮檢測結果33
• 3.3.5 小鼠睪丸組織內T-SOD、GSH以及MDA的檢測結果33-35
• 3.4 討論35-36
• 3.5 小結36-37
• 試驗三：SFN對鎘暴露小鼠睪丸中Nrf2及下游靶基因mRNA和蛋白水平的影響37-58
• 4.1 試驗材料37-39
• 4.1.1 試驗動物37
• 4.1.2 試驗動物的分組及給藥37
• 4.1.3 試驗主要試劑的配制37-38
• 4.1.4 試驗藥品與試劑38-39
• 4.1.5 試驗主要儀器39
• 4.2 試驗方法39-48
• 4.2.1 RNA的提取及反轉錄39-40
• 4.2.2 PCR反應40-42
• 4.2.3 qPCR反應42-43
• 4.2.4 試驗結果的計算43-44
• 4.2.5 蛋白的提取及定量44
• 4.2.6 Western blot檢測蛋白表達量44-48
• 4.2.7 數據的統計與分析48
• 4.3 試驗結果48-54
• 4.3.1 小鼠睪丸組織中各基因引物的特異性檢測結果48
• 4.3.2 各基因qPCR引物中的特異性及標準曲線的結果分析48-49
• 4.3.3 小鼠睪丸組織mRNA和蛋白水平檢測結果49-54
• 4.4 討論54-57
• 4.5 小結57-58
• 結論58-59
• 參考文獻59-65
• 附錄65-69
• 英文縮寫詞表69-70
• 致謝70-71
• 攻讀碩士研究生期間發(fā)表的文章71

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  本文關鍵詞：萊菔硫烷對鎘暴露小鼠生精機能干預作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：499941