本文關(guān)鍵詞：城市道路周邊大氣超細(xì)顆粒物對(duì)體外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的毒性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的我國(guó)城市空氣污染問(wèn)題日益嚴(yán)重,大氣顆粒物中包含大量超細(xì)顆粒物(ultrafine particles, UFPs),以往流行病學(xué)研究提示,超細(xì)顆粒物與神經(jīng)系統(tǒng)疾病存在關(guān)聯(lián),長(zhǎng)期生活在顆粒物污染地區(qū)會(huì)導(dǎo)致認(rèn)知功能的下降。城市道路附近空氣中的UFPs濃度較高,與城市道路相關(guān)的職業(yè)人群比其他人群接觸UFPs的時(shí)間更長(zhǎng)、濃度更高,這類人群的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)更易受到UFPs的危害。本研究采集城市道路周邊空氣中的UFPs,對(duì)體外培養(yǎng)的人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤(U251)細(xì)胞進(jìn)行染毒,觀察不同濃度下UFPs對(duì)U251的細(xì)胞毒性,并從細(xì)胞氧化應(yīng)激水平、線粒體功能、細(xì)胞凋亡水平這幾方面初步探討UFPs對(duì)CNS的毒作用機(jī)制,為城市道路空氣污染對(duì)相關(guān)職業(yè)人群及其他密切接觸人群CNS影響的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)及理論參考。方法1.UFPs采集在某市機(jī)動(dòng)車流量較大的交通干道旁設(shè)置采樣點(diǎn),使用DLPI-30撞擊式多級(jí)顆粒物采樣器采集UFPs。2.UFPs懸浮液的制備稱取適量UFPs放于玻璃瓶中,高壓蒸汽滅菌(121℃,30min),烘干后加入適量培養(yǎng)基,配制成終濃度為640μg/ml的母液,臨用前超聲30min使UFPs充分混懸,用培養(yǎng)基逐級(jí)稀釋至染毒所需濃度。3.CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞存活率U251細(xì)胞經(jīng)UFPs染毒48h后,加入CCK-8試劑,充分混勻。37℃孵育60min后于酶標(biāo)儀450nm處測(cè)定吸光度,實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。4.氧化應(yīng)激指標(biāo)的測(cè)定U251細(xì)胞經(jīng)UFPs染毒48h后,利用專用檢測(cè)試劑盒分別測(cè)定細(xì)胞T-SOD活力、GSH含量、總抗氧化能力(T-AOC)和MDA含量。5.線粒體膜電位(MMP)測(cè)定采用JC-1法測(cè)定U251細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位,分別使用熒光顯微鏡、酶標(biāo)儀觀察檢測(cè)染毒前后熒光強(qiáng)度的變化,根據(jù)各劑量組紅綠熒光強(qiáng)度比值,測(cè)定其線粒體內(nèi)膜去極化程度。6.ATP含量的測(cè)定U251細(xì)胞經(jīng)UFP s染毒48h后,利用專用檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ATP含量。7.細(xì)胞凋亡的檢測(cè)用流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測(cè)不同濃度UFPs作用48h后對(duì)U251細(xì)胞凋亡水平的影響。結(jié)果1. UFPs對(duì)U251細(xì)胞存活率的影響隨著UFPs濃度的增加,細(xì)胞存活率逐漸降低。與0μg/m1劑量組比較,各劑量組細(xì)胞存活率均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2. UFPs對(duì)U251細(xì)胞氧化應(yīng)激水平的影響UFPs作用于U251細(xì)胞48h后,各劑量組氧化應(yīng)激指標(biāo)均有改變。與0μg/ml劑量組相比,20μg/ml、40μg/m1劑量組T－AOC含量降低；10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml劑量組T-SOD含量降低,MDA含量升高；差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與0μg/ml劑量組相比,各劑量組GSH含量有下降趨勢(shì),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3. UFPs對(duì)U251細(xì)胞線粒體膜電位的影響UFPs作用于U251細(xì)胞48h后,熒光顯微鏡下觀察到線粒體膜電位發(fā)生改變。隨著UFPs濃度的增加,線粒體膜電位逐漸降低,與0μg/ml劑量組相比,10μg/ml劑量組線粒體膜電位無(wú)明顯變化；20μg/ml、40μg/m1劑量組線粒體膜電位顯著降低(P0.05)。4. UFPs對(duì)U251細(xì)胞ATP含量的影響隨著UFPs濃度的升高,細(xì)胞內(nèi)ATP含量逐漸降低。與0μg/ml劑U量組比較,僅40μg/m1劑量組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5. UFPs對(duì)U251細(xì)胞凋亡的影響UFPs作用于U251細(xì)胞48h后,各劑量組隨著UFPs濃度的增加,細(xì)胞凋亡率逐漸提高；20μg/ml、40μg/m1劑量組細(xì)胞凋亡率與0μg/ml劑量組比較分別增加了1.6%和6.85%,且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各劑量組早期細(xì)胞凋亡率普遍高于晚期細(xì)胞凋亡率,二者均隨UFPs濃度的升高而升高；與0μg/m1劑量組比較,20μg/ml、40μg/m1劑量組的早期細(xì)胞凋亡率顯著升高(P0.05)；而晚期細(xì)胞凋亡率只有40μg/m1劑量組顯著升高(P0.05)。結(jié)論1. UFPs可降低U251細(xì)胞的存活率,引起細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平的升高,線粒體膜電位降低,ATP含量降低,且誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率升高。2. UFPs對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用的機(jī)制可能與氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)、線粒體損傷以及細(xì)胞凋亡水平升高有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：超細(xì)顆粒物 中樞神經(jīng)系統(tǒng) 氧化應(yīng)激 線粒體膜電位 三磷酸腺苷 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R122
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 符號(hào)說(shuō)明13-15
• 前言15-23
• 材料與方法23-34
• 結(jié)果34-41
• 討論41-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-57
• 致謝57-58
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文58-59
• 附表59

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 屈成銳;趙長(zhǎng)遂;段倫博;李英杰;;燃煤超細(xì)顆粒物形成機(jī)理及其控制的研究進(jìn)展[J];熱能動(dòng)力工程;2008年05期

2 ;含超細(xì)顆粒物廢水的處理[J];重慶環(huán)境保護(hù);1987年04期

3 張浩;劉勝榮;曹曉強(qiáng);;燃燒源超細(xì)顆粒物及其排放控制研究進(jìn)展[J];江蘇環(huán)境科技;2007年05期

4 陳厚濤;趙兵;徐進(jìn);沈湘林;;燃煤飛灰超細(xì)顆粒物聲波團(tuán)聚清除的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)電機(jī)工程學(xué)報(bào);2007年35期

5 韓洪森;劉勝榮;;燃燒源超細(xì)顆粒物的研究現(xiàn)狀及展望[J];山西建筑;2008年02期

6 王芬娟;方棟;李紅;Costabile Francesca;;大氣超細(xì)顆粒物觀測(cè)和擴(kuò)散模擬研究進(jìn)展[J];環(huán)境污染與防治;2010年02期

7 李林;董勇;崔琳;張立強(qiáng);馬春元;;荷電水霧脫除超細(xì)顆粒物的研究進(jìn)展[J];化工進(jìn)展;2010年06期

8 朱春;張旭;;車用柴油機(jī)排放細(xì)顆粒物和超細(xì)顆粒物特征與人體健康效應(yīng)[J];環(huán)境與健康雜志;2010年06期

9 倪洋;涂星瑩;朱一丹;郭新彪;鄧芙蓉;;北京市某地區(qū)冬季大氣細(xì)顆粒物和超細(xì)顆粒物污染水平及影響因素分析[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年03期

10 徐杰英,劉晶,鄭楚光;燃燒源超細(xì)顆粒物的研究進(jìn)展[J];煤炭轉(zhuǎn)化;2003年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 梁峰;李超;趙金鐲;蔣蓉芳;林俊;劉衛(wèi);金嬋;宋偉民;張桂林;李燕;;~(59)Fe標(biāo)記的納米顆粒物從大鼠肺部的滲透過(guò)程[A];第九屆全國(guó)氣溶膠會(huì)議暨第三屆海峽兩岸氣溶膠技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

2 劉曉宇;王瑋;高志芳;徐丹丹;馬歡;解淑艷;廖云飛;;大同第二熱電廠鍋爐排放超細(xì)顆粒物濃度及其分布特征研究[A];第九屆全國(guó)氣溶膠會(huì)議暨第三屆海峽兩岸氣溶膠技術(shù)研討會(huì)論文集[C];2007年

3 高健;王韜;王文興;;中國(guó)城市大氣超細(xì)顆粒物濃度及粒徑分布研究[A];中國(guó)氣象學(xué)會(huì)2006年年會(huì)“大氣成分與氣候、環(huán)境變化”分會(huì)場(chǎng)論文集[C];2006年

4 劉忠;劉含笑;李懷亮;馮新新;邢振中;胡滿銀;高香林;;超細(xì)顆粒物湍流聚并理論與數(shù)值模擬[A];第十四屆中國(guó)電除塵學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 記者 王海蘊(yùn);燃煤污染排放控制技術(shù)實(shí)現(xiàn)新突破[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2009年

2 亦菲;燃煤污染排放控制技術(shù)實(shí)現(xiàn)新突破[N];中國(guó)知識(shí)產(chǎn)權(quán)報(bào);2009年

3 記者 趙衛(wèi)祥;“超細(xì)顆粒物PM2.5聚并器裝置研發(fā)”在我市通過(guò)鑒定[N];長(zhǎng)治日?qǐng)?bào);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張克婷;城市道路周邊大氣超細(xì)顆粒物對(duì)體外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的毒性研究[D];山東大學(xué);2016年

2 張運(yùn)焦;超細(xì)顆粒物渦聚并碰撞的機(jī)理研究[D];華北電力大學(xué)(北京);2016年

3 徐斌;室內(nèi)超細(xì)顆粒物的運(yùn)動(dòng)分布模型的研究[D];天津大學(xué);2007年

4 屠曉棟;發(fā)動(dòng)機(jī)排放與城市道路超細(xì)顆粒物特性研究[D];上海交通大學(xué);2007年

5 李懷亮;燃煤超細(xì)顆粒物聚并數(shù)值模擬研究[D];華北電力大學(xué);2013年

6 張凱;超細(xì)顆粒物微觀團(tuán)聚機(jī)理數(shù)植模擬研究[D];華中科技大學(xué);2009年

7 張凱;超細(xì)顆粒物微觀團(tuán)聚機(jī)理數(shù)值模擬研究[D];華中科技大學(xué);2009年

8 劉加勛;燃煤飛灰化學(xué)團(tuán)聚實(shí)驗(yàn)研究及機(jī)理分析[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2008年

9 陳俊;燃煤超細(xì)顆粒物團(tuán)聚的實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2005年

10 陳富華;燃煤超細(xì)顆粒物化學(xué)團(tuán)聚理論及系統(tǒng)設(shè)計(jì)研究[D];華中科技大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：城市道路周邊大氣超細(xì)顆粒物對(duì)體外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞的毒性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：440177