本文關(guān)鍵詞：棉酚致小鼠睪丸生精細胞凋亡及Bax、Bcl-2表達相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為了研究探討棉酚對雄性小鼠睪丸生精細胞凋亡的影響。本試驗選用48只4-5周齡20.21±1.56g健康的雄性昆明小鼠為研究對象。在室溫條件下常規(guī)飼養(yǎng)1周,適應環(huán)境之后隨機分為4組,每組12只,對照組(1%羧甲基纖維素鈉0.4 m L),低劑量組(30 mg?kg-1?d-1)、中劑量組(60 mg?kg-1?d-1)、高劑量組(240 mg?kg-1?d-1),灌服由1%羧甲基纖維素鈉稀釋的棉酚0.4 m L,連續(xù)灌胃給藥20天。第21天處死,取睪丸組織保存,用于各項試驗檢測。通過光學顯微鏡觀察睪丸組織病理學變化;透射電鏡觀察棉酚對睪丸生精細胞超微結(jié)構(gòu)的影響;原位缺口末端標記法(TUNEL)法檢測睪丸組織生精細胞的凋亡情況;免疫組織化學法檢測Bax和Bcl-2蛋白的分布和表達;RT-PCR法檢測睪丸組織Bax m RNA和Bcl-2 m RNA的表達。研究結(jié)果表明:蘇木精-伊紅(HE)染色觀察到小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu),對照組無明顯的病理變化,低、中劑量組病變輕微;高劑量組正常結(jié)構(gòu)遭到嚴重的破壞,結(jié)構(gòu)松散,生精小管管壁變薄,各級生精細胞排列紊亂,生精細胞大量的成團脫落到管腔內(nèi),甚至沒有成熟的精子。透射電鏡觀察到對照組各級生精細胞超微結(jié)構(gòu)完整,細胞器結(jié)構(gòu)清晰;低劑量組變化較小;中劑量組和高劑量組生精細胞超微結(jié)構(gòu)損傷嚴重,可以觀察到自噬體,成熟精子頂體膜斷裂。TUNEL檢測發(fā)現(xiàn)對照組小鼠睪丸組織中僅有零星散在的凋亡細胞;凋亡指數(shù),與對照組相比,低劑量組升高但不顯著(P0.05),中劑量組與高劑量均都顯著升高(0.01P0.05,P0.01)。Bax蛋白的表達結(jié)果,低劑量組較對照組有所升高(P0.05);中劑量組表達明顯升高(0.01P0.05);高劑量組升高極顯著(P0.01);與低劑量組相比,中劑量組與高劑量組Bax蛋白顯著升高(0.01P0.05,P0.01)。低劑量組Bcl-2蛋白表達較對照組升高(P0.05),中劑量組和高劑量組Bcl-2蛋白顯著降低(0.01P0.05,P0.01)。與對照組相比,低劑量組Bcl-2m RNA表達量明顯升高(0.01P0.05),Bax m RNA表達量增加,但是無統(tǒng)計學意義;與對照組和低劑量組相比,中劑量組Bcl-2 mRNA表達量顯著降低(0.01P0.05),Bax mRNA表達量顯著升高(0.01P0.05);高劑量組較對照組和低劑量組Bcl-2 m RNA表達量都極顯著降低(P0.01),Bax m RNA表達量都升高極顯著(P0.01)。高劑量組Bcl-2 mRNA表達較中劑量組明顯降低(0.01P0.05),Bax m RNA表達量明顯升高(0.01P0.05)。綜上所述棉酚能夠破壞小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu),引起生精細胞凋亡,而且這種凋亡與Bax表達升高,Bcl-2表達降低有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：棉酚 睪丸生精細胞 細胞凋亡 Bax Bcl-2
【學位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-20
• 1.1 棉酚的物理和化學性質(zhì)11
• 1.2 棉酚的藥理作用11-12
• 1.2.1 棉酚的抗腫瘤作用11-12
• 1.2.2 棉酚的抗病毒作用12
• 1.2.3 棉酚的抗炎作用12
• 1.3 棉酚的毒性12-14
• 1.3.1 棉酚的雄性生殖毒性13-14
• 1.3.2 棉酚的雌性生殖毒性14
• 1.4 細胞凋亡14-17
• 1.4.1 細胞凋亡概述14-15
• 1.4.2 細胞凋亡的通路15-16
• 1.4.3 細胞凋亡相關(guān)蛋白16-17
• 1.5 棉酚與細胞凋亡17-18
• 1.5.1 棉酚與線粒體的作用17-18
• 1.5.2 棉酚與酶的作用18
• 1.6 生精細胞凋亡的基因調(diào)控18
• 1.7 試驗研究的目的與意義18-20
• 2 材料與方法20-25
• 2.1 試驗動物20
• 2.2 分組處理20
• 2.3 主要儀器與試劑20-21
• 2.3.1 主要儀器及設備20-21
• 2.3.2 主要試劑21
• 2.4 檢測內(nèi)容與方法21-24
• 2.4.1 光鏡下睪丸組織學的觀察21
• 2.4.2 睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的觀察21
• 2.4.3 檢測睪丸生精細胞凋亡21-22
• 2.4.4 檢測睪丸組織中Bcl-2、Bax蛋白的表達22-23
• 2.4.5 檢測睪丸組織Bcl-2 m RNA、Bax mRNA表達23-24
• 2.5 實驗數(shù)據(jù)的處理與分析24-25
• 3 結(jié)果25-36
• 3.1 光鏡下睪丸組織學觀察結(jié)果25-26
• 3.2 睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的觀察結(jié)果26-28
• 3.3 小鼠睪丸組織中生精細胞凋亡情況28-30
• 3.4 小鼠睪丸組織中Bcl-2、Bax蛋白表達情況30-33
• 3.5 小鼠睪丸組織中Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表達情況33-36
• 3.5.1 小鼠睪丸總RNA的提取結(jié)果33
• 3.5.2 小鼠睪丸Bax、Bcl-2、β-actin mRNA的鑒定結(jié)果33-34
• 3.5.3 小鼠睪丸Bax、Bcl-2 m RNA表達水平檢測結(jié)果34-36
• 4 討論36-40
• 4.1 棉酚對小鼠睪丸組織結(jié)構(gòu)的影響36
• 4.2 棉酚對小鼠生精細胞亞結(jié)構(gòu)的影響36-37
• 4.3 棉酚對生精細胞凋亡的影響37-38
• 4.4 棉酚對小鼠生精細胞Bcl-2 和Bax蛋白表達的影響38-39
• 4.5 棉酚對小鼠生精細胞Bcl-2,Bax基因表達的影響39-40
• 5 結(jié)論40-41
• 致謝41-42
• 參考文獻42-49
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文49

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5 孟e，

本文編號：420487