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體外;撬嵋种铺墙徒庹{(diào)控M1型巨噬細(xì)胞極化

發(fā)布時(shí)間:2025-02-05 10:32
   目的研究;撬嵴{(diào)控M1型巨噬細(xì)胞極化的分子機(jī)制。方法人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系THP-1細(xì)胞經(jīng)100 nmol/L佛波酯處理24h后誘導(dǎo)分化為M0型巨噬細(xì)胞;M1型極化組—M0型巨噬細(xì)胞經(jīng)10 ng/ml脂多糖和20ng/ml干擾素γ刺激48h誘導(dǎo)極化為M1型巨噬細(xì)胞;;撬崽幚斫M—在M1型極化組的基礎(chǔ)上,分別加入的;撬崤c脂多糖、干擾素γ共培養(yǎng)48h。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測M1型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)標(biāo)志物:腫瘤壞死因子α(TNF-α)、環(huán)加氧酶2(COX-2)、CXC趨化因子配體-10(CXCL-10)和白細(xì)胞介素6(IL-6)的mRNA表達(dá)水平;微量法試劑盒分別檢測糖酵解相關(guān)酶—己糖激酶(HK)、乳酸脫氫酶(LDH)活性;用刃天青檢測細(xì)胞內(nèi)線粒體呼吸鏈代謝酶活性。結(jié)果 M1型極化組:M1型極化相關(guān)標(biāo)志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明顯升高,己糖激酶(HK)、乳酸脫氫酶(LDH)活性均增加,線粒體呼吸鏈代謝酶活性降低;;撬崽幚斫M:M1型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)標(biāo)志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明顯降低,己糖激酶(HK)、乳酸脫...

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng):
        1.2.2 細(xì)胞極化及分組:
        1.2.3 倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài):
        1.2.4 刃天青檢測活性:
        1.2.5 qPCR檢測M1型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)標(biāo)志物環(huán)加氧酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白細(xì)胞介素6(interleukin 6,IL-6)、CXC趨化因子配體-10(CXC motif chemokine ligand-10,CXCL-10)mRNA表達(dá)水平:
        1.2.6 微量法試劑盒測試細(xì)胞內(nèi)糖酵解相關(guān)酶:
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化(圖1)
    2.2 牛磺酸處理后刃天青檢測細(xì)胞線粒體呼吸鏈代謝酶活性增加(圖2)
    2.3 ;撬崽幚砗驧1型極化相關(guān)基因標(biāo)志物
    2.4 ;撬崽幚砗筇墙徒庀嚓P(guān)酶HK和LDH活性降低(圖4)
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