蔬菜被諾如病毒和輪狀病毒污染后出現(xiàn)食物中毒的風(fēng)險(xiǎn)高,準(zhǔn)確地檢測(cè)蔬菜中兩種食源性病毒對(duì)保障食品安全具有重要意義。分離、富集蔬菜中病毒粒子能夠提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度和靈敏度。該文采用甘氨酸緩沖液洗脫-PEG 6000沉淀富集蔬菜中的諾如病毒和輪狀病毒,對(duì)影響分離、富集效果的主要因素(甘氨酸緩沖液pH,PEG 6000的濃度和沉淀時(shí)間)進(jìn)行優(yōu)化,最后采用RT-qPCR檢測(cè)病毒。結(jié)果表明:采用pH5.0的甘氨酸緩沖液洗脫,15%PEG6000沉淀洗脫液中的病毒粒子2 h,樣品中病毒回收率最大,諾如病毒回收率為13.35%～20.30%,輪狀病毒回收率為18.08%～20.00%。該研究可為蔬菜中病毒的準(zhǔn)確檢測(cè)提供方法學(xué)參考。

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【部分圖文】：

圖1不同pH甘氨酸緩沖液洗脫蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果

甘氨酸緩沖液的pH是影響蔬菜中病毒洗脫效果的重要因素之一，本研究固定其他條件，分別考察了在不同pH條件下(pH5.0、pH7.0和pH9.0)，甘氨酸緩沖液對(duì)蔬菜中NoV和RoV洗脫效果的影響。實(shí)驗(yàn)中，分別用pH5.0、pH7.0和pH9.0的甘氨酸緩沖液洗脫....

圖2不同濃度PEG6000沉淀蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果

PEG6000沉淀時(shí)間也會(huì)影響病毒的沉淀效率。為得到合適的沉淀時(shí)間，本研究考察了不同PEG6000沉淀時(shí)長(zhǎng)(2h、6h和12h)對(duì)NoV和RoV回收率的影響。取不同污染程度(高、中、低3個(gè)水平)的蔬菜模擬樣品，利用pH5.0的甘氨酸洗脫緩沖液洗脫模擬樣品上的病毒粒子....

圖3不同沉淀時(shí)間對(duì)蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果

在優(yōu)化的前處理?xiàng)l件下，甘氨酸緩沖液洗脫-PEG6000沉淀濃縮法對(duì)人工污染的蔬菜樣品(萵苣)中NoV和RoV的平均回收率見(jiàn)表4。2.3重復(fù)性考察

圖1不同pH甘氨酸緩沖液洗脫蔬菜中NoV和RoV的回收結(jié)果

甘氨酸緩沖液的pH是影響蔬菜中病毒洗脫效果的重要因素之一，本研究固定其他條件，分別考察了在不同pH條件下(pH5.0、pH7.0和pH9.0)，甘氨酸緩沖液對(duì)蔬菜中NoV和RoV洗脫效果的影響。實(shí)驗(yàn)中，分別用pH5.0、pH7.0和pH9.0的甘氨酸緩沖液洗脫....

本文編號(hào)：3989132