目的:矽肺是塵肺病的一種,通常是由于長期暴露于結晶型二氧化硅所致。矽肺的特征性表現(xiàn)為活化的纖維母細胞產生的細胞外基質過度沉積所引起的慢性炎癥和不可逆轉的肺纖維化。盡管在矽肺的整個病程中維持著顯著的炎癥反應,但是一旦纖維化形成,僅有的抗炎治療不能延緩甚至會惡化纖維化進程。最近研究證實,過度的細胞外基質沉積對纖維母細胞增殖活化所介導的持續(xù)性纖維化起到積極促進的作用,然而其具體的分子機制還有待進一步探索。本研究從纖維母細胞活化和矽肺纖維化之間的正反饋調節(jié)入手,探究細胞外基質合成,基質硬度增加對矽肺纖維化進展的調控機制,以期為延緩矽肺纖維化進程提供新的理論依據和潛在分子靶點。研究方法:本研究通過非暴露氣管灌注結晶性二氧化硅懸液構建實驗性矽肺小鼠模型。應用Western blot、免疫組化分析,檢測矽塵暴露矽肺模型小鼠肺組織中YAP的胞核胞漿表達和定位改變。利用小鼠纖維母細胞系NIH-3T3進行體外實驗。通過軟硬凝膠培養(yǎng)NIH-3T3,模擬體內正常及纖維化損傷的肺組織基質硬度環(huán)境。應用免疫熒光分析,進一步驗證基質硬度對YAP表達及定位的影響;通過生物信息學分析預測與基質硬度調控YAP相關的蛋白,...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖3.1矽塵暴露小鼠肺組織中YAP的表達改變A：Westernblot檢測56天生理鹽水組（Saline）和矽塵暴露組（Crystallinesilica）肺組織核蛋白提取物中YAP的變化水平

中國醫(yī)科大學博士學位論文13對力的響應有關。為了探索YAP與矽肺纖維化之間的關系，我們檢測了YAP在矽塵暴露小鼠肺組織中的表達情況。Westernblot結果顯示，與對照組相比，矽塵暴露模型組小鼠肺組織中YAP的核內表達水平顯著升高，差異具有統(tǒng)計學意義（圖3.1A,B）。從免疫組....

圖3.2矽塵暴露小鼠肺組織中YAP的定位改變A：IHC檢測56天生理鹽水組（Saline）和矽塵暴露組（Crystallinesilica）肺組織中YAP的分布情況

中國醫(yī)科大學博士學位論文14**，p<0.01，數(shù)據以均數(shù)±標準差表示（mean±SD）。圖3.2矽塵暴露小鼠肺組織中YAP的定位改變A：IHC檢測56天生理鹽水組（Saline）和矽塵暴露組（Crystallinesilica）肺組織中YAP的分布情況。箭頭所指的為肺組織中矽結....

圖3.3STRINGv.10生物信息學分析結果

中國醫(yī)科大學博士學位論文15白間相互作用的生物信息學分析（STRINGv.10）。如圖3.3結果顯示，基質蛋白Collagen3a1、Collagen1a1和Collagen1a2可以通過與CD44相互作用來激活胞質信號蛋白網。CD44是具有高度異質性的細胞膜表面糖蛋白，可與多種....

圖3.4基質硬度對CD44表達的影響

中國醫(yī)科大學博士學位論文16圖3.4基質硬度對CD44表達的影響A：IF檢測培養(yǎng)于軟膠（1kappa）或硬膠（60kappa）上的NIH-3T3中CD44的熒光水平(n=3，比例尺=50μm）。B：Realtime-PCR檢測培養(yǎng)于軟膠（1kappa）或硬膠（60kappa）上的....

本文編號：3944194