目的:矽肺是塵肺病的一種,通常是由于長期暴露于結(jié)晶型二氧化硅所致。矽肺的特征性表現(xiàn)為活化的纖維母細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)過度沉積所引起的慢性炎癥和不可逆轉(zhuǎn)的肺纖維化。盡管在矽肺的整個病程中維持著顯著的炎癥反應(yīng),但是一旦纖維化形成,僅有的抗炎治療不能延緩甚至?xí)夯w維化進程。最近研究證實,過度的細(xì)胞外基質(zhì)沉積對纖維母細(xì)胞增殖活化所介導(dǎo)的持續(xù)性纖維化起到積極促進的作用,然而其具體的分子機制還有待進一步探索。本研究從纖維母細(xì)胞活化和矽肺纖維化之間的正反饋調(diào)節(jié)入手,探究細(xì)胞外基質(zhì)合成,基質(zhì)硬度增加對矽肺纖維化進展的調(diào)控機制,以期為延緩矽肺纖維化進程提供新的理論依據(jù)和潛在分子靶點。研究方法:本研究通過非暴露氣管灌注結(jié)晶性二氧化硅懸液構(gòu)建實驗性矽肺小鼠模型。應(yīng)用Western blot、免疫組化分析,檢測矽塵暴露矽肺模型小鼠肺組織中YAP的胞核胞漿表達和定位改變。利用小鼠纖維母細(xì)胞系NIH-3T3進行體外實驗。通過軟硬凝膠培養(yǎng)NIH-3T3,模擬體內(nèi)正常及纖維化損傷的肺組織基質(zhì)硬度環(huán)境。應(yīng)用免疫熒光分析,進一步驗證基質(zhì)硬度對YAP表達及定位的影響;通過生物信息學(xué)分析預(yù)測與基質(zhì)硬度調(diào)控YAP相關(guān)的蛋白,...

【文章頁數(shù)】：126 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖3.1矽塵暴露小鼠肺組織中YAP的表達改變A：Westernblot檢測56天生理鹽水組（Saline）和矽塵暴露組（Crystallinesilica）肺組織核蛋白提取物中YAP的變化水平

中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文13對力的響應(yīng)有關(guān)。為了探索YAP與矽肺纖維化之間的關(guān)系，我們檢測了YAP在矽塵暴露小鼠肺組織中的表達情況。Westernblot結(jié)果顯示，與對照組相比，矽塵暴露模型組小鼠肺組織中YAP的核內(nèi)表達水平顯著升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（圖3.1A,B）。從免疫組....

圖3.2矽塵暴露小鼠肺組織中YAP的定位改變A：IHC檢測56天生理鹽水組（Saline）和矽塵暴露組（Crystallinesilica）肺組織中YAP的分布情況

中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文14**，p<0.01，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（mean±SD）。圖3.2矽塵暴露小鼠肺組織中YAP的定位改變A：IHC檢測56天生理鹽水組（Saline）和矽塵暴露組（Crystallinesilica）肺組織中YAP的分布情況。箭頭所指的為肺組織中矽結(jié)....

圖3.3STRINGv.10生物信息學(xué)分析結(jié)果

中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文15白間相互作用的生物信息學(xué)分析（STRINGv.10）。如圖3.3結(jié)果顯示，基質(zhì)蛋白Collagen3a1、Collagen1a1和Collagen1a2可以通過與CD44相互作用來激活胞質(zhì)信號蛋白網(wǎng)。CD44是具有高度異質(zhì)性的細(xì)胞膜表面糖蛋白，可與多種....

圖3.4基質(zhì)硬度對CD44表達的影響

中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文16圖3.4基質(zhì)硬度對CD44表達的影響A：IF檢測培養(yǎng)于軟膠（1kappa）或硬膠（60kappa）上的NIH-3T3中CD44的熒光水平(n=3，比例尺=50μm）。B：Realtime-PCR檢測培養(yǎng)于軟膠（1kappa）或硬膠（60kappa）上的....

本文編號：3944194