目的:本研究旨在探討環(huán)境中廣泛存在的內(nèi)分泌干擾物2,3,7,8-四氯二苯并-對(duì)-二噁英(TCDD)和鄰苯二甲酸單(2-乙基己)酯(MEHP)單獨(dú)以及共暴露對(duì)正常人乳腺細(xì)胞MCF10A的影響,重點(diǎn)關(guān)注TCDD和MEHP對(duì)MCF10A在AhR信號(hào)通路的相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響,以初步探索TCDD和MEHP共暴露對(duì)人乳腺細(xì)胞MCF10A的毒性作用機(jī)制。方法:1.采用MTS方法檢測(cè)TCDD/MEHP對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A染毒處理的細(xì)胞活性影響。用MTS實(shí)驗(yàn)檢測(cè)1p M、10p M、100p M、1n M、10n M的TCDD染毒處理正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A 24h和48h后細(xì)胞活性的影響;或1μM、5μM、10μM、50μM、100μM的MEHP對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A染毒處理24h和48h后細(xì)胞活性的影響;以及1p M、10p M、100p M、1n M的TCDD和100μM的MEHP對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A共暴露染毒處理24h和48h后細(xì)胞活性的影響。2.采用劃痕實(shí)驗(yàn)的方法檢測(cè)TCDD/MEHP對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A遷移能力的影響。3.采用RT-P...

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號(hào)說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞系
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要儀器設(shè)備
        1.1.4 主要耗材
    1.2 方法
        1.2.1 正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A的培養(yǎng)和處理
        1.2.2 染毒物質(zhì)的配制
        1.2.3 MTS實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞活性
        1.2.4 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        1.2.5 siRNA轉(zhuǎn)染
        1.2.6 PCR相關(guān)基因mRNA的表達(dá)水平
        1.2.7 WesternBlot檢測(cè)目的蛋白表達(dá)水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    2.1 TCDD/MEHP對(duì)MCF10A細(xì)胞增殖的影響
        2.1.1 MEHP單獨(dú)暴露對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A的細(xì)胞活性影響
        2.1.2 TCDD單獨(dú)暴露對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A的細(xì)胞活性影響
        2.1.3 MEHP/TCDD共暴露對(duì)正常人乳腺上皮細(xì)胞MCF10A的細(xì)胞活性影響
    2.2 TCDD/MEHP對(duì)MCF10A遷移轉(zhuǎn)化的影響
        2.2.1 TCDD/MEHP對(duì)MCF10A遷移能力的影響
        2.2.2 TCDD/MEHP對(duì)MCF10A遷移相關(guān)mRNA以及AhR信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)水平的影響
    2.3 TCDD/MEHP通過AhR信號(hào)通路對(duì)MCF10A影響
        2.3.1 測(cè)定siRNA干擾AhR干擾效率
        2.3.2 MEHP與TCDD共暴露對(duì)AhR信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)水平的影響
        2.3.3 TCDD/MEHP對(duì)MCF10A通過AhR信號(hào)通路的相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3851298