【目的】探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSC)緩解染硅塵小鼠肺泡炎的機(jī)制。【方法】取無特定病原體級健康雄性C57BL/6小鼠10只,選擇5只小鼠以全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)BMSC,另外5只小鼠用于誘導(dǎo)骨髓巨噬細(xì)胞(BMDM)。取同類小鼠隨機(jī)分為對照組、二氧化硅(SiO₂)組以及SiO₂染毒后BMSC移植組,每組10只。采用氣管暴露法,將對照組小鼠經(jīng)氣管軟骨間隙給予一次性注射0.90%氯化鈉溶液20.0μL;SiO₂組和BMSC移植組小鼠先予一次性注射質(zhì)量濃度為250 g/L的SiO₂混懸液20.0μL,6 h后經(jīng)鼠尾靜脈分別一次性輸注500.0μL的0.90%氯化鈉溶液或BMSC(細(xì)胞密度為1×10⁹/L)。造模后第3 d處死小鼠,免疫印跡檢測小鼠肺組織中嗜中性白細(xì)胞堿性磷酸酶-3(NALP3)等炎性小體組分含量。Transwell體外共培養(yǎng)體系,上室接種小鼠BMDM,下室接種BMSC,使用SiO₂刺激BMDM,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測BMDM培養(yǎng)上清中白...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1實驗動物
        1.1.2儀器和試劑
    1.2 方法
        1.2.1 BMSC分離與培養(yǎng)
        1.2.2 動物分組和處理
        1.2.3 動物肺組織中IL-1β、caspase-1蛋白水平檢測
        1.2.4 BMDM的體外分離培養(yǎng)
        1.2.5 Transwell共培養(yǎng)體系
        1.2.6 細(xì)胞因子水平測定
        1.2.7 BMDM中pro-IL-1β、IL-1β、pro-caspase-1、caspase-1蛋白水平檢測
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 3組小鼠肺組織中pro-IL-1β、IL-1β、pro-caspase-1、caspase-1蛋白表達(dá)水平
    2.2 BMDM上清液中IL-1β水平
    2.3 BMDM中pro-IL-1β、IL-1β、pro-caspase-1、caspase-1蛋白表達(dá)水平
3 討論



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