目的:探討2,2’,4,4’,5,5’–六氯聯(lián)苯(2,2′,4,4′,5,5′-hexachlorobiphenyl,PCB153)的促骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)效應(yīng),以及可能的作用機(jī)制是否涉及PI3K/Akt/NF-κB信號(hào)通路,為闡明環(huán)境污染物對(duì)OA發(fā)病的影響及作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:SW1353細(xì)胞系購(gòu)置于中國(guó)科學(xué)院上海生科院細(xì)胞資源中心。使用DMEM培養(yǎng)基、37℃、5%CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),并使用PCB153及PI3K抑制劑LY294002進(jìn)行處理。CCK-8法檢測(cè)不同濃度PCB153(0～50μM)對(duì)SW1353細(xì)胞增殖活力的影響;免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)細(xì)胞中MMP13、Ⅱ型膠原的表達(dá)水平;Western blot法檢測(cè)MMP13、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-NF-κB的蛋白表達(dá)水平;免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞中MMP13、p-Akt、p-NF-κB的表達(dá)水平。結(jié)果:1、不同濃度PCB153對(duì)SW1353細(xì)胞增殖活力的影響與空白對(duì)照組相比,DMSO對(duì)細(xì)胞增殖活力無(wú)明顯影響(P>0.05);與control組相比,PCB153...

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1前言
2 材料與方法
    2.1 主要試劑與儀器
        2.1.1 軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 SW1353細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 SW1353細(xì)胞增殖活力的測(cè)定
        2.2.3 細(xì)胞處理
        2.2.4 免疫細(xì)胞化學(xué)
        2.2.5 Western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)水平
        2.2.6 免疫熒光
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 PCB153處理對(duì)SW1353細(xì)胞增殖活力的影響
    3.2 PCB153 處理對(duì)SW1353細(xì)胞MMP13 表達(dá)的影響
    3.3 PCB153 處理對(duì)SW1353細(xì)胞Ⅱ型膠原表達(dá)的影響
    3.4 不同濃度PCB153處理對(duì)SW1353細(xì)胞p-Akt影響的時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系
    3.5 PCB153處理對(duì)SW1353細(xì)胞PI3K/Akt及NF-κB信號(hào)通路的影響
    3.6 LY294002 預(yù)處理后,PCB153對(duì)SW1353 細(xì)胞NF-κB信號(hào)的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
實(shí)踐報(bào)告
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3787382