目的:探討2,2’,4,4’,5,5’–六氯聯(lián)苯(2,2′,4,4′,5,5′-hexachlorobiphenyl,PCB153)的促骨關(guān)節(jié)炎(osteoarthritis,OA)效應(yīng),以及可能的作用機制是否涉及PI3K/Akt/NF-κB信號通路,為闡明環(huán)境污染物對OA發(fā)病的影響及作用機制提供實驗依據(jù)。方法:SW1353細胞系購置于中國科學院上海生科院細胞資源中心。使用DMEM培養(yǎng)基、37℃、5%CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱進行培養(yǎng),并使用PCB153及PI3K抑制劑LY294002進行處理。CCK-8法檢測不同濃度PCB153(0～50μM)對SW1353細胞增殖活力的影響;免疫組織化學染色法檢測細胞中MMP13、Ⅱ型膠原的表達水平;Western blot法檢測MMP13、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-NF-κB的蛋白表達水平;免疫熒光法檢測細胞中MMP13、p-Akt、p-NF-κB的表達水平。結(jié)果:1、不同濃度PCB153對SW1353細胞增殖活力的影響與空白對照組相比,DMSO對細胞增殖活力無明顯影響(P>0.05);與control組相比,PCB153...

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1前言
2 材料與方法
    2.1 主要試劑與儀器
        2.1.1 軟骨細胞的培養(yǎng)
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 試劑配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 SW1353細胞培養(yǎng)
        2.2.2 SW1353細胞增殖活力的測定
        2.2.3 細胞處理
        2.2.4 免疫細胞化學
        2.2.5 Western blot檢測相關(guān)蛋白表達水平
        2.2.6 免疫熒光
    2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
    3.1 PCB153處理對SW1353細胞增殖活力的影響
    3.2 PCB153 處理對SW1353細胞MMP13 表達的影響
    3.3 PCB153 處理對SW1353細胞Ⅱ型膠原表達的影響
    3.4 不同濃度PCB153處理對SW1353細胞p-Akt影響的時間-效應(yīng)關(guān)系
    3.5 PCB153處理對SW1353細胞PI3K/Akt及NF-κB信號通路的影響
    3.6 LY294002 預(yù)處理后,PCB153對SW1353 細胞NF-κB信號的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
實踐報告
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3787382