目的:砷是自然界中廣泛存在的類金屬元素,可通過呼吸道、消化道和皮膚等途徑進入體內(nèi),造成多器官、系統(tǒng)的損傷。我們學(xué)院和瑞士聯(lián)邦水研究院合作開發(fā)的“砷污染風(fēng)險評估模型”,預(yù)測我國高砷暴露人口可能高達2000萬。砷是國際癌癥研究屬確定的人類致癌物,可引起皮膚癌、肺癌和膀胱癌。研究顯示,不僅持續(xù)性砷暴露可引起腫瘤,而且在停止砷暴露幾十年后,膀胱癌和肺癌的發(fā)生風(fēng)險仍然很高。我們研究組體外細胞實驗已觀察到長期低濃度亞砷酸鈉處理的人正常膀胱上皮細胞增殖速度明顯加快,出現(xiàn)惡性轉(zhuǎn)化傾向。因此,探索砷致膀胱癌機制,尋找有效的預(yù)防控制措施和治療方案尤為重要。由于砷本身不引起點突變,對其致癌機制的研究更多傾向于后生化機制,即通過擾亂特殊位點的外遺傳控制,導(dǎo)致異�；虮磉_而致癌。我們先前的研究發(fā)現(xiàn)低濃度砷能夠誘導(dǎo)人正常膀胱上皮細胞原癌基因表皮生長因子受體2(HER2)表達增高。HER2是表皮生長因子受體(EGFR)家族成員,其活化后,可激活多條與細胞增殖、生存、侵潤和血管發(fā)生有關(guān)的信號通路,在乳腺癌、膀胱癌、胃癌、肺癌等多種腫瘤中高表達。由于HER2在上皮癌的發(fā)生、發(fā)展、侵潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。因此,如果能以...

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :長期砷處理對F344大鼠膀胱上皮細胞癌基因HER2及相關(guān)細胞因子和增殖因子的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.2.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 動物分組及染毒
            2.2.2 尿中砷含量測定
            2.2.3 免疫熒光
            2.2.4 免疫組織化學(xué)
            2.2.5 ELISA實驗
            2.2.6 RNA提取、RT-PCR和 Real-time PCR檢測
            2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 F344大鼠的一般情況
        3.2 F344大鼠尿中砷形態(tài)含量
        3.3 長期砷處理導(dǎo)致F344大鼠膀胱上皮增生
        3.4 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細胞EGFR和 HER2蛋白及磷酸化表達的影響
        3.5 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細胞EGF,TGFα,E-cad,s E-cad蛋白表達的影響
        3.6 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細胞HSP90,IL-6,NDRG1蛋白表達的影響
        3.7 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細胞增殖因子蛋白表達影響
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :短期砷處理對膀胱上皮細胞癌基因HER2及相關(guān)細胞因子的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)與處理
            2.2.2 細胞免疫熒光
            2.2.3 RNA提取、RT-PCR和 Real-time PCR檢測
            2.2.4 細胞免疫共沉淀
            2.2.5 蛋白提取
            2.2.6 Western blot免疫印跡檢測蛋白表達
            2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細胞HER2表達及磷酸化的影響
        3.2 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細胞EGFR表達及磷酸化的影響
        3.3 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細胞中,EGFR參與HER2磷酸化的激活
        3.4 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細胞外生長因子表達的影響
        3.5 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細胞中,EGF參與HER2磷酸化的激活
        3.6 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細胞中,TGFα參與HER2磷酸化的激活
        3.7 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細胞中,E-cad不參與HER2磷酸化的激活
        3.8 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細胞內(nèi)HSP90,NDRG1,IL-6表達的影響
        3.9 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細胞中,HSP90對HER2磷酸化的影響
        3.10 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細胞中,IL-6,NDRG1對HER2磷酸化的影響
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 :長期砷處理對膀胱上皮細胞癌基因HER2及相關(guān)細胞因子和增殖因子的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)與處理
            2.2.2 細胞活力測定
            2.2.3 細胞劃痕實驗
            2.2.4 細胞遷移實驗
            2.2.5 ELISA實驗
            2.2.6 蛋白提取
            2.2.7 Western blot免疫印跡檢測蛋白表達
            2.2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 長期砷處理引起SV-HUC-1細胞明顯增生
            3.1.1 長期砷處理對SV-HUC-1細胞活力,增殖遷移水平的影響
            3.1.2 長期砷處理對SV-HUC-1細胞相關(guān)細胞因子蛋白表達影響
        3.2 長期砷處理SV-HUC-1細胞導(dǎo)致EGFR和HER2激活的相關(guān)因素
            3.2.1 長期砷處理SV-HUC-1細胞增殖和遷移中的EGFR和HER2作用
            3.2.2 長期砷處理SV-HUC-1細胞中參與EGFR和HER2激活的相關(guān)因子作用
            3.2.3 長期砷處理SV-HUC-1細胞中EGF,TGFα,HSP90激活EGFR和HER2磷酸化的作用
            3.2.4 長期砷處理SV-HUC-1細胞中E-cad,IL-6,NDRG1抑制EGFR和HER2磷酸化的作用
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
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