目的:砷是自然界中廣泛存在的類金屬元素,可通過呼吸道、消化道和皮膚等途徑進(jìn)入體內(nèi),造成多器官、系統(tǒng)的損傷。我們學(xué)院和瑞士聯(lián)邦水研究院合作開發(fā)的“砷污染風(fēng)險評估模型”,預(yù)測我國高砷暴露人口可能高達(dá)2000萬。砷是國際癌癥研究屬確定的人類致癌物,可引起皮膚癌、肺癌和膀胱癌。研究顯示,不僅持續(xù)性砷暴露可引起腫瘤,而且在停止砷暴露幾十年后,膀胱癌和肺癌的發(fā)生風(fēng)險仍然很高。我們研究組體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)已觀察到長期低濃度亞砷酸鈉處理的人正常膀胱上皮細(xì)胞增殖速度明顯加快,出現(xiàn)惡性轉(zhuǎn)化傾向。因此,探索砷致膀胱癌機(jī)制,尋找有效的預(yù)防控制措施和治療方案尤為重要。由于砷本身不引起點(diǎn)突變,對其致癌機(jī)制的研究更多傾向于后生化機(jī)制,即通過擾亂特殊位點(diǎn)的外遺傳控制,導(dǎo)致異�；虮磉_(dá)而致癌。我們先前的研究發(fā)現(xiàn)低濃度砷能夠誘導(dǎo)人正常膀胱上皮細(xì)胞原癌基因表皮生長因子受體2(HER2)表達(dá)增高。HER2是表皮生長因子受體(EGFR)家族成員,其活化后,可激活多條與細(xì)胞增殖、生存、侵潤和血管發(fā)生有關(guān)的信號通路,在乳腺癌、膀胱癌、胃癌、肺癌等多種腫瘤中高表達(dá)。由于HER2在上皮癌的發(fā)生、發(fā)展、侵潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。因此,如果能以...

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :長期砷處理對F344大鼠膀胱上皮細(xì)胞癌基因HER2及相關(guān)細(xì)胞因子和增殖因子的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.2.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 動物分組及染毒
            2.2.2 尿中砷含量測定
            2.2.3 免疫熒光
            2.2.4 免疫組織化學(xué)
            2.2.5 ELISA實(shí)驗(yàn)
            2.2.6 RNA提取、RT-PCR和 Real-time PCR檢測
            2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 F344大鼠的一般情況
        3.2 F344大鼠尿中砷形態(tài)含量
        3.3 長期砷處理導(dǎo)致F344大鼠膀胱上皮增生
        3.4 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細(xì)胞EGFR和 HER2蛋白及磷酸化表達(dá)的影響
        3.5 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細(xì)胞EGF,TGFα,E-cad,s E-cad蛋白表達(dá)的影響
        3.6 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細(xì)胞HSP90,IL-6,NDRG1蛋白表達(dá)的影響
        3.7 長期砷處理對大鼠膀胱上皮細(xì)胞增殖因子蛋白表達(dá)影響
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :短期砷處理對膀胱上皮細(xì)胞癌基因HER2及相關(guān)細(xì)胞因子的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
            2.2.2 細(xì)胞免疫熒光
            2.2.3 RNA提取、RT-PCR和 Real-time PCR檢測
            2.2.4 細(xì)胞免疫共沉淀
            2.2.5 蛋白提取
            2.2.6 Western blot免疫印跡檢測蛋白表達(dá)
            2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細(xì)胞HER2表達(dá)及磷酸化的影響
        3.2 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細(xì)胞EGFR表達(dá)及磷酸化的影響
        3.3 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細(xì)胞中,EGFR參與HER2磷酸化的激活
        3.4 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細(xì)胞外生長因子表達(dá)的影響
        3.5 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細(xì)胞中,EGF參與HER2磷酸化的激活
        3.6 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細(xì)胞中,TGFα參與HER2磷酸化的激活
        3.7 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細(xì)胞中,E-cad不參與HER2磷酸化的激活
        3.8 短期亞砷酸鈉染毒對SV-HUC-1細(xì)胞內(nèi)HSP90,NDRG1,IL-6表達(dá)的影響
        3.9 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細(xì)胞中,HSP90對HER2磷酸化的影響
        3.10 在短期亞砷酸鈉處理的SV-HUC-1細(xì)胞中,IL-6,NDRG1對HER2磷酸化的影響
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 :長期砷處理對膀胱上皮細(xì)胞癌基因HER2及相關(guān)細(xì)胞因子和增殖因子的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
            2.2.2 細(xì)胞活力測定
            2.2.3 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
            2.2.4 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
            2.2.5 ELISA實(shí)驗(yàn)
            2.2.6 蛋白提取
            2.2.7 Western blot免疫印跡檢測蛋白表達(dá)
            2.2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 長期砷處理引起SV-HUC-1細(xì)胞明顯增生
            3.1.1 長期砷處理對SV-HUC-1細(xì)胞活力,增殖遷移水平的影響
            3.1.2 長期砷處理對SV-HUC-1細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子蛋白表達(dá)影響
        3.2 長期砷處理SV-HUC-1細(xì)胞導(dǎo)致EGFR和HER2激活的相關(guān)因素
            3.2.1 長期砷處理SV-HUC-1細(xì)胞增殖和遷移中的EGFR和HER2作用
            3.2.2 長期砷處理SV-HUC-1細(xì)胞中參與EGFR和HER2激活的相關(guān)因子作用
            3.2.3 長期砷處理SV-HUC-1細(xì)胞中EGF,TGFα,HSP90激活EGFR和HER2磷酸化的作用
            3.2.4 長期砷處理SV-HUC-1細(xì)胞中E-cad,IL-6,NDRG1抑制EGFR和HER2磷酸化的作用
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
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本文編號：3753637