發(fā)布時(shí)間：2023-02-05 11:14

　　目的:耐輻射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)對(duì)電離輻射、絲裂霉素C(mitomycin C,MMC)和過(guò)氧化氫等極端環(huán)境因素的沖擊有強(qiáng)大抵抗力,課題組前期結(jié)果表明耐輻射奇球菌pprM/pprI基因在其極端環(huán)境生存中發(fā)揮了極大的作用。本研究主要通過(guò)使用¹³⁷Cs-γ射線輻照和MMC處理DR-pprM/pprI轉(zhuǎn)基因果蠅,然后觀察其各項(xiàng)生理、氧化應(yīng)激指標(biāo)和DNA損傷情況,研究pprM/pprI基因?qū)壿椛淇剐院蚆MC抗性的影響,以及耐輻射奇球菌pprM/pprI基因在黑腹果蠅機(jī)體內(nèi)的功能與作用機(jī)制。為人類輻射防護(hù)的研究和臨床上MMC的使用提供理論依據(jù)。方法:1.PCR技術(shù)鑒定DR-pprM/pprI轉(zhuǎn)基因果蠅。采用不同劑量(0-2000 Gy)¹³⁷Cs-γ射線處理DR-pprM、DR-pprI轉(zhuǎn)基因果蠅和對(duì)照果蠅yw25C6、yw68A4,測(cè)定其生殖、生存和運(yùn)動(dòng)能力,觀察各組果蠅輻照后是否產(chǎn)生畸形情況,并統(tǒng)計(jì)畸形率。2.使用含不同濃度MMC(0、40、80μg/mL)的培養(yǎng)基喂養(yǎng)DR-pprM/pprI轉(zhuǎn)基因果蠅...

【文章頁(yè)數(shù)】：83 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞
第1章 引言
第2章 pprM/pprI轉(zhuǎn)基因果蠅的輻射抗性研究
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)果蠅品系的培養(yǎng)、擴(kuò)增與雜交
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 果蠅品系GAL4雜交啟動(dòng) pprI、pprM基因表達(dá)
        2.2.2 pprM/pprI轉(zhuǎn)基因品系果蠅的PCR檢測(cè)
        2.2.3 生存能力的測(cè)定
        2.2.4 運(yùn)動(dòng)能力的測(cè)定
        2.2.5 生殖能力的測(cè)定
        2.2.6 致畸率的測(cè)定
        2.2.7 統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 結(jié)果和分析
        2.3.1 pprM/ pprI轉(zhuǎn)基因品系果蠅的PCR檢測(cè)結(jié)果
        2.3.2 pprM/pprI基因?qū)椪蘸蠊壣媛实挠绊?br>        2.3.3 pprM/pprI基因?qū)椪蘸蠊夁\(yùn)動(dòng)能力的影響
        2.3.4 pprM/pprI基因?qū)椪蘸蠊壣衬芰Φ挠绊?br>        2.3.5 pprM/pprI基因?qū)椪蘸蠊壔温实挠绊?br>    2.4 本章小節(jié)
第3章 pprM/pprI轉(zhuǎn)基因果蠅的絲裂霉素C抗性研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)果蠅品系的培養(yǎng)、增殖及雜交
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        3.2.2 生存能力的測(cè)定
        3.2.3 運(yùn)動(dòng)能力的測(cè)定
        3.2.4 生殖能力的測(cè)定
        3.2.5 果蠅總蛋白的提取與蛋白濃度測(cè)定
        3.2.6 果蠅總活性氧(ROS)檢測(cè)
        3.2.7 果蠅超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)
        3.2.8 果蠅過(guò)氧化氫酶(CAT)檢測(cè)
        3.2.9 果蠅還原型谷胱甘肽(GSH)檢測(cè)
        3.2.10 果蠅丙二醛(MDA)檢測(cè)
        3.2.11 統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果和分析
        3.3.1 MMC對(duì)果蠅壽命、生殖及運(yùn)動(dòng)方面的影響
        3.3.2 pprM/pprI基因?qū)MC處理后果蠅生存率的影響
        3.3.3 pprM/pprI基因?qū)MC處理后果蠅運(yùn)動(dòng)能力的影響
        3.3.4 pprM/pprI基因?qū)MC處理后果蠅生殖能力的影響
        3.3.5 ROS含量的影響
        3.3.6 SOD活力的影響
        3.3.7 CAT活力的影響
        3.3.8 GSH的含量
        3.3.9 MDA含量的影響
    3.4 本章小結(jié)
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
作者攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3734873