目的:耐輻射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)對電離輻射、絲裂霉素C(mitomycin C,MMC)和過氧化氫等極端環(huán)境因素的沖擊有強大抵抗力,課題組前期結果表明耐輻射奇球菌pprM/pprI基因在其極端環(huán)境生存中發(fā)揮了極大的作用。本研究主要通過使用¹³⁷Cs-γ射線輻照和MMC處理DR-pprM/pprI轉基因果蠅,然后觀察其各項生理、氧化應激指標和DNA損傷情況,研究pprM/pprI基因對果蠅輻射抗性和MMC抗性的影響,以及耐輻射奇球菌pprM/pprI基因在黑腹果蠅機體內的功能與作用機制。為人類輻射防護的研究和臨床上MMC的使用提供理論依據。方法:1.PCR技術鑒定DR-pprM/pprI轉基因果蠅。采用不同劑量(0-2000 Gy)¹³⁷Cs-γ射線處理DR-pprM、DR-pprI轉基因果蠅和對照果蠅yw25C6、yw68A4,測定其生殖、生存和運動能力,觀察各組果蠅輻照后是否產生畸形情況,并統(tǒng)計畸形率。2.使用含不同濃度MMC(0、40、80μg/mL)的培養(yǎng)基喂養(yǎng)DR-pprM/pprI轉基因果蠅...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞
第1章 引言
第2章 pprM/pprI轉基因果蠅的輻射抗性研究
    2.1 實驗材料及儀器
        2.1.1 實驗果蠅品系的培養(yǎng)、擴增與雜交
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 果蠅品系GAL4雜交啟動 pprI、pprM基因表達
        2.2.2 pprM/pprI轉基因品系果蠅的PCR檢測
        2.2.3 生存能力的測定
        2.2.4 運動能力的測定
        2.2.5 生殖能力的測定
        2.2.6 致畸率的測定
        2.2.7 統(tǒng)計分析
    2.3 結果和分析
        2.3.1 pprM/ pprI轉基因品系果蠅的PCR檢測結果
        2.3.2 pprM/pprI基因對輻照后果蠅生存率的影響
        2.3.3 pprM/pprI基因對輻照后果蠅運動能力的影響
        2.3.4 pprM/pprI基因對輻照后果蠅生殖能力的影響
        2.3.5 pprM/pprI基因對輻照后果蠅畸形率的影響
    2.4 本章小節(jié)
第3章 pprM/pprI轉基因果蠅的絲裂霉素C抗性研究
    3.1 實驗材料及儀器
        3.1.1 實驗果蠅品系的培養(yǎng)、增殖及雜交
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 實驗分組
        3.2.2 生存能力的測定
        3.2.3 運動能力的測定
        3.2.4 生殖能力的測定
        3.2.5 果蠅總蛋白的提取與蛋白濃度測定
        3.2.6 果蠅總活性氧(ROS)檢測
        3.2.7 果蠅超氧化物歧化酶(SOD)檢測
        3.2.8 果蠅過氧化氫酶(CAT)檢測
        3.2.9 果蠅還原型谷胱甘肽(GSH)檢測
        3.2.10 果蠅丙二醛(MDA)檢測
        3.2.11 統(tǒng)計分析
    3.3 結果和分析
        3.3.1 MMC對果蠅壽命、生殖及運動方面的影響
        3.3.2 pprM/pprI基因對MMC處理后果蠅生存率的影響
        3.3.3 pprM/pprI基因對MMC處理后果蠅運動能力的影響
        3.3.4 pprM/pprI基因對MMC處理后果蠅生殖能力的影響
        3.3.5 ROS含量的影響
        3.3.6 SOD活力的影響
        3.3.7 CAT活力的影響
        3.3.8 GSH的含量
        3.3.9 MDA含量的影響
    3.4 本章小結
第4章 討論
第5章 結論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
作者攻讀學位期間的科研成果
致謝



本文編號：3734873