七種水果提取物抗氧化和抑制腫瘤活性研究
發(fā)布時(shí)間:2017-05-12 18:09
本文關(guān)鍵詞:七種水果提取物抗氧化和抑制腫瘤活性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明自由基具有強(qiáng)氧化性,能攻擊生物大分子,損害機(jī)體的組織和細(xì)胞,導(dǎo)致癌癥、炎癥、心臟病、心血管疾病、糖尿病等疾病的發(fā)生,流行病學(xué)研究表明,增加水果的攝入量能夠降低患癌和慢性疾病的幾率。本文以甜柿、黑李、紅李、楊梅、山竹、獼猴桃、杏七種水果丙酮提取物為研究對(duì)象,分析總多酚、總黃酮、花青素等活性成分含量。利用化學(xué)模擬和細(xì)胞培養(yǎng)體系,系統(tǒng)評(píng)價(jià)其抗氧化及抑制腫瘤細(xì)胞增殖能力,并通過流式細(xì)胞術(shù)、ELISA等技術(shù)探究黑李提取物抑制腫瘤作用機(jī)制。 七種水果提取物中均含有豐富的多酚、黃酮和花青素。其中甜柿總多酚含量最高,達(dá)3.416mg沒食子酸當(dāng)量/g鮮重,甜柿總黃酮含量也是最高,達(dá)9.532mg蘆丁當(dāng)量/g鮮重,黑李花青素含量最高,達(dá)1.569mg矢車菊-3-葡糖苷當(dāng)量/g鮮重。通過分析七種提取物的總還原能力及清除自由基(·OH、ABTS·+、DPPH·)能力發(fā)現(xiàn)甜柿對(duì)三種自由基清除能力最強(qiáng),IC50依次為:1.582mg/mL、0.845mg/mL、0.045mg/mL,其次是楊梅、黑李、紅李、山竹、獼猴桃、杏,,且抗氧化能力與總多酚含量之間具有很好的相關(guān)性(P0.01)。 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明七種水果提取物均具有抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞和結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞增殖的能力,黑李提取物的抑制作用最強(qiáng),IC50分別為:747μg/mL和384μg/mL,其他六種水果提取物抑制腫瘤作用的強(qiáng)弱依次為楊梅、紅李、山竹、獼猴桃、杏、甜柿。除甜柿外的六種水果提取物抑制腫瘤細(xì)胞能力與多酚和花青素的含量之間具有很好的相關(guān)性(P0.01)。花青素含量對(duì)兩種腫瘤細(xì)胞增殖抑制起著更重要作用。 經(jīng)黑李提取物處理的結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)體積明顯變小、變圓,染色質(zhì)粗糙貼壁能力下降,細(xì)胞密度下降;提取其總DNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳可觀察到凋亡細(xì)胞特征性的梯度條帶;提示黑李提取物能夠顯著地誘導(dǎo)結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞凋亡;流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示黑李提取物能夠阻滯結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞在G2/M期或G0/G1期,使癌細(xì)胞增殖速度減慢。黑李提取物處理后細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白CytC、caspase-9、caspase-3的表達(dá)量隨濃度增大而增強(qiáng)。說明黑李提取物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用可能是通過線粒體介導(dǎo)通路實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:水果 抗氧化 抑制腫瘤 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:天津大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R151
【目錄】:
- 摘要3-4
- ABSTRACT4-9
- 第一章 文獻(xiàn)綜述9-18
- 1.1 人體氧化損傷與癌癥9-13
- 1.1.1 自由基簡(jiǎn)介9-10
- 1.1.2 自由基與癌癥的關(guān)系10-11
- 1.1.3 常見癌癥研究現(xiàn)狀11-12
- 1.1.4 抗氧化劑與癌癥預(yù)防12-13
- 1.2 七種常見水果簡(jiǎn)介13-15
- 1.2.1 甜柿13
- 1.2.2 楊梅13-14
- 1.2.3 山竹14
- 1.2.4 杏14
- 1.2.5 獼猴桃14
- 1.2.6 李14-15
- 1.3 天然活性物質(zhì)生理功能15-17
- 1.3.1 多酚類化合物15-16
- 1.3.2 黃酮類化合物16
- 1.3.3 花青素類化合物16-17
- 1.4 研究背景、目的和意義17
- 1.5 研究?jī)?nèi)容17-18
- 第二章 七種水果生物活性物質(zhì)含量及抗氧化活性研究18-29
- 2.1 實(shí)驗(yàn)材料18-19
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器18-19
- 2.1.2 主要試劑19
- 2.2 試驗(yàn)方法19-22
- 2.2.1 七種水果丙酮提取物制備19-20
- 2.2.2 活性物質(zhì)含量分析20
- 2.2.3 抗氧化活性的評(píng)價(jià)20-21
- 2.2.4 數(shù)據(jù)分析21-22
- 2.3 結(jié)果與分析22-26
- 2.3.1 總多酚、總黃酮、花青素含量22-23
- 2.3.2 總還原能力的測(cè)定23-24
- 2.3.3 抗氧化能力的評(píng)價(jià)24-26
- 2.3.3.1 ABTS 自由基清除活性24-25
- 2.3.3.2 DPPH 自由基清除活性25
- 2.3.3.3 羥基自由基清除活性25-26
- 2.4 七種水果生物活性成分與抗氧化能力相關(guān)性分析26-27
- 2.5 小結(jié)27-29
- 第三章 七種水果提取物抑制腫瘤活性研究29-37
- 3.1 實(shí)驗(yàn)材料29-30
- 3.1.1 藥物和試劑29-30
- 3.1.2 實(shí)驗(yàn)器材30
- 3.1.3 細(xì)胞株30
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法30-32
- 3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)30
- 3.2.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)30-31
- 3.2.3 樣品配制31
- 3.2.4 MTT 實(shí)驗(yàn)31
- 3.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析31-32
- 3.3 結(jié)果與討論32-35
- 3.3.1 七種水果提取物抑制乳腺癌 MCF-7 細(xì)胞增殖作用率32-33
- 3.3.2 七種水果提取物抑制結(jié)腸癌 Caco-2 細(xì)胞增殖作用33-34
- 3.3.3 抗氧化與腫瘤抑制相關(guān)性分析34-35
- 3.4 小結(jié)35-37
- 第四章 黑李丙酮提取物誘導(dǎo) Caco-2 結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡機(jī)理研究37-46
- 4.1 實(shí)驗(yàn)材料37-38
- 4.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器37-38
- 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑38
- 4.1.3 細(xì)胞株38
- 4.2 實(shí)驗(yàn)方法38-40
- 4.2.1 樣品處理38
- 4.2.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察38-39
- 4.2.3 DNA ladder 的檢測(cè)39
- 4.2.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期39
- 4.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡39
- 4.2.6 CytC、caspase-9、caspase-3 相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定39-40
- 4.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析40
- 4.3 結(jié)果與討論40-45
- 4.3.1 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察40-41
- 4.3.2 瓊脂糖凝膠電泳41-42
- 4.3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡42-43
- 4.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期43-44
- 4.3.5 CytC、caspase-9、caspase-3 相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定44-45
- 4.4 小結(jié)45-46
- 第五章 全文結(jié)論與展望46-47
- 5.1 全文結(jié)論46
- 5.2 展望46-47
- 參考文獻(xiàn)47-55
- 發(fā)表論文和參加科研情況說明55-56
- 致謝56
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 陳昌杰;劉臣彪;章菊;楊清玲;藤風(fēng)猛;;葡萄籽提取物對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖和Survivin基因表達(dá)的影響[J];中國(guó)中藥雜志;2009年04期
本文關(guān)鍵詞:七種水果提取物抗氧化和抑制腫瘤活性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):360482
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