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谷氨酰胺對(duì)膿毒癥小鼠氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用研究

發(fā)布時(shí)間:2017-05-12 10:27

  本文關(guān)鍵詞:谷氨酰胺對(duì)膿毒癥小鼠氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:探討谷氨酰胺是否可以減少膿毒癥小鼠的氧化應(yīng)激損傷,在危重癥疾病氧化應(yīng)激狀態(tài)下發(fā)揮保護(hù)作用。 方法: 1.動(dòng)物分組與造模方法: 5周齡雄性昆明小鼠30只,利用隨機(jī)數(shù)字表,采取完全隨機(jī)方法將其平均分為三組,每組10只,分別設(shè)為對(duì)照組,(control, C組)、內(nèi)毒素組(LPS, L組)、谷氨酰胺組(Gln, G組)。 內(nèi)毒素組與谷氨酰胺組采用腹腔注射內(nèi)毒素的方法制造膿毒癥動(dòng)物模型,內(nèi)毒素的注射劑量為5ml/kg。對(duì)照組腹腔注射等量生理鹽水。造模成功后,谷氨酰胺組即刻尾靜脈注射丙氨酰谷氨酰胺注射液,注射劑量為0.75g/kg。內(nèi)毒素組尾靜脈注射等量無(wú)菌生理鹽水作為陽(yáng)性對(duì)照,對(duì)照組尾靜脈注射等量生理鹽水作為陰性對(duì)照。6小時(shí)后終止實(shí)驗(yàn),眼眶取血后采用頸椎脫臼法處死動(dòng)物,解剖分離動(dòng)物肝、腎組織,迅速液氮冷凍。動(dòng)物血低溫放置,待血清析出后離心,取血清,液氮冷凍待測(cè)。 2.氧化應(yīng)激指標(biāo)的測(cè)定方法: 每次測(cè)試樣品前先將樣品從液氮中取出在4℃冰箱中解凍。取動(dòng)物組織塊在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱(chēng)重0.3g,放入勻漿管中,按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(生理鹽水2.7ml)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。將玻璃勻漿管置于冰水浴條件下,手動(dòng)勻漿,30秒/次,間隔30秒,重復(fù)6~8次,制成10%的勻漿液。將制備好的10%勻漿液用普通離心機(jī)2500轉(zhuǎn)/分,離心15分鐘,,取上清液進(jìn)行測(cè)定。部分10%的勻漿液用生理鹽水按體積比1:9稀釋成1%的組織勻漿待測(cè)。為達(dá)到實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定性,制備好的勻漿液都在在制備當(dāng)天進(jìn)行測(cè)定。 取3組小鼠血清、肝、腎組織勻漿進(jìn)行氧化應(yīng)激指標(biāo)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶GSH-Px(glutathion peroxidase)、超氧化酶歧化酶SOD(superoxide dismutase)、丙二醛MDA(malonaldehyde)的測(cè)量。具體的測(cè)量方法按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。 3.數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法: 數(shù)據(jù)的收集與錄入使用Excel2003,數(shù)據(jù)的描述與分析使用SPSS16.0。首先對(duì)各組進(jìn)行正態(tài)性與方差齊性檢驗(yàn),如果獨(dú)立樣本的數(shù)據(jù)服從正態(tài)性與方差齊性,采取參數(shù)檢驗(yàn)方法進(jìn)行假設(shè)檢驗(yàn)。兩獨(dú)立樣本的比較取用完全獨(dú)立樣本比較的t檢驗(yàn),三個(gè)獨(dú)立樣本的比較采用完全獨(dú)立多樣本比較的單因素方差分析。進(jìn)一步的兩兩比較采用SNK-q法進(jìn)行。如果資料不服從正態(tài)性與方差齊性,則采用多個(gè)獨(dú)立樣本比較的Kruskal-Wallis H非參數(shù)檢驗(yàn),進(jìn)一步的兩兩比較采用秩轉(zhuǎn)換的方差分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,P<0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果: 1.谷氨酰胺組的小鼠血清、肝臟和腎臟中的GSH-Px、SOD水平均高于內(nèi)毒素組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.谷氨酰胺組的小鼠血清、肝臟和腎臟中的MDA水平低于內(nèi)毒素組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:膿毒癥造成氧化應(yīng)激與氧化損傷,使用谷氨酰胺可以提高抗氧化酶GSH-Px、SOD的水平,增強(qiáng)抗氧化能力。減少脂質(zhì)代謝產(chǎn)物MDA含量,減少有毒代謝產(chǎn)物。起到降低氧化應(yīng)激損傷的作用。
【關(guān)鍵詞】:膿毒癥 氧化應(yīng)激 谷氨酰胺
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類(lèi)號(hào)】:R459.7;R151.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-9
  • 前言9-11
  • 材料與方法11-17
  • 結(jié)果17-19
  • 附圖19-21
  • 討論21-25
  • 結(jié)論25-26
  • 參考文獻(xiàn)26-29
  • 綜述29-36
  • 參考文獻(xiàn)32-36
  • 致謝36-37
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷37

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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4 孫欣;經(jīng)肛腸途徑營(yíng)養(yǎng)支持的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2004年

5 李亞麗;下丘腦—垂體—卵巢軸系衰老機(jī)理及何首烏飲延緩衰老的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

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7 楊雷香;四類(lèi)天然產(chǎn)物及其衍生物的抗氧化和抗腫瘤活性研究[D];浙江大學(xué);2008年

8 高鳳莉;頭頸部腫瘤患者放療期間營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)及營(yíng)養(yǎng)干預(yù)效果的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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8 胡e

本文編號(hào):359551


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