應(yīng)用免疫磁珠和量子點(diǎn)標(biāo)記技術(shù)快速檢測(cè)副溶血性弧菌的方法研究
發(fā)布時(shí)間:2022-01-16 07:38
近年來(lái)由副溶血性弧菌引起的食物中毒以及人群暴露規(guī)模呈明顯的上升趨勢(shì),已經(jīng)超過(guò)沙門氏菌,成為我國(guó)首要的食源性致病菌。因此加強(qiáng)對(duì)食品中副溶血性弧菌的防控,開(kāi)發(fā)快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)十分必要。目前針對(duì)副溶血性弧菌的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法存在檢測(cè)周期長(zhǎng)、特異性差、靈敏度低及操作繁瑣等缺點(diǎn),難以滿足快速檢測(cè)的需求。所以建立一種快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)的副溶血性弧菌檢測(cè)方法,對(duì)加強(qiáng)食源性疾病的預(yù)防和控制具有重要意義。本課題利用免疫磁珠分離技術(shù)和量子點(diǎn)熒光標(biāo)記技術(shù),依據(jù)抗原抗體特異性反應(yīng)的原理,通過(guò)免疫磁珠上的抗體與樣品中目標(biāo)菌的特異性結(jié)合,從樣品中富集分離目標(biāo)菌,再利用量子點(diǎn)熒光生物探針進(jìn)行標(biāo)記,得到免疫磁珠-目標(biāo)菌-量子點(diǎn)探針“三明治”夾心復(fù)合物,利用熒光分光光度計(jì)對(duì)得到的復(fù)合物熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè),從而建立一種基于免疫磁分離技術(shù)和量子點(diǎn)熒光標(biāo)記技術(shù)的副溶血性弧菌快速檢測(cè)方法。1.功能化Fe3O4粒子的制備和表征本實(shí)驗(yàn)首先通過(guò)水熱合成法合成Fe3O4磁性納米粒子,然后采用微乳液法制備Tween-20修飾的Fe
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第1章 前言
1.1 副溶血性弧菌概述
1.1.1 副溶血性弧菌的危害
1.1.2 副溶血性弧菌的流行情況
1.1.3 檢測(cè)方法
1.2 磁性納米復(fù)合粒子
1.2.1 磁性納米粒子的制備
1.2.2 磁性納米復(fù)合粒子的制備
1.2.3 磁性納米復(fù)合粒子表面的修飾
1.2.4 磁性納米復(fù)合納米粒子在醫(yī)學(xué)相關(guān)研究中的應(yīng)用
1.3 免疫熒光標(biāo)記技術(shù)
1.4 研究目的及意義
第2章 材料與方法
2.1 材料和儀器
2.1.1 試劑
2.1.2 試劑的配置
2.1.3 主要儀器
2.1.4 菌株
2.1.5 羧基化量子點(diǎn)與副溶血性弧菌多克隆抗體的來(lái)源
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 功能化Fe_3O_4粒子的制備和表征
2.2.2 免疫磁珠的制備及其對(duì)VP富集效率的檢測(cè)
2.2.3 副溶血性弧菌檢測(cè)方法的建立
2.2.4 檢測(cè)方法的評(píng)價(jià)
2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2.2.6 檢測(cè)方法陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 功能化磁珠的表征結(jié)果
3.2 富集效率的檢測(cè)
3.3 副溶血性弧菌方法建立
3.4 檢測(cè)方法的評(píng)價(jià)
第4章 討論
4.1 功能化Fe_3O_4粒子的制備和表征
4.2 免疫磁珠的制備及其對(duì)VP富集效率的檢測(cè)
4.3 VP檢測(cè)方法的建立與效果評(píng)價(jià)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及攻讀碩士期間取得的科研成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]副溶血弧菌分子致病機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 楊芳,李秀娟,徐保紅. 中華疾病控制雜志. 2010(06)
[2]PCR法制備地高辛標(biāo)記DNA探針斑點(diǎn)雜交檢測(cè)副溶血性弧菌tlh基因[J]. 曹小紅,朱雪蘭,陳艷,劉秀梅. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志. 2009(04)
[3]副溶血弧菌預(yù)測(cè)模型與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的研究進(jìn)展[J]. 姬華,韓海紅,王洪新,劉秀梅. 食品工業(yè)科技. 2009(05)
[4]副溶血性弧菌及其溶血毒素研究進(jìn)展[J]. 李毅,朱心強(qiáng). 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2008(12)
[5]副溶血性弧菌的致病性及其快速檢測(cè)[J]. 寧喜斌,劉代新,張繼倫. 微生物與感染. 2008(01)
[6]食品中副溶血性弧菌的危害分析、檢測(cè)與預(yù)防控制[J]. 陳瑞英,魯建章,蘇意誠(chéng),劉承初. 食品科學(xué). 2007(01)
[7]食品中單核細(xì)胞增多李斯特菌的快速檢測(cè)[J]. 閆冰,李一松,霍貴成,姜毓君. 食品工業(yè)科技. 2006(10)
[8]副溶血性弧菌引起食物中毒的微生物學(xué)診斷的研究[J]. 何連生,徐淳行,張大帆,楊寧敏. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2006(05)
[9]2003年中國(guó)食源性疾病暴發(fā)的監(jiān)測(cè)資料分析[J]. 劉秀梅,陳艷,樊永祥,王茂起. 衛(wèi)生研究. 2006(02)
[10]副溶血弧菌的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 蔡潭溪,蔣魯巖,黃克和. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2005(10)
博士論文
[1]海產(chǎn)品中致病性副溶血弧菌PCR快速檢測(cè)體系建立及定量研究[D]. 祝儒剛.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號(hào):3592221
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第1章 前言
1.1 副溶血性弧菌概述
1.1.1 副溶血性弧菌的危害
1.1.2 副溶血性弧菌的流行情況
1.1.3 檢測(cè)方法
1.2 磁性納米復(fù)合粒子
1.2.1 磁性納米粒子的制備
1.2.2 磁性納米復(fù)合粒子的制備
1.2.3 磁性納米復(fù)合粒子表面的修飾
1.2.4 磁性納米復(fù)合納米粒子在醫(yī)學(xué)相關(guān)研究中的應(yīng)用
1.3 免疫熒光標(biāo)記技術(shù)
1.4 研究目的及意義
第2章 材料與方法
2.1 材料和儀器
2.1.1 試劑
2.1.2 試劑的配置
2.1.3 主要儀器
2.1.4 菌株
2.1.5 羧基化量子點(diǎn)與副溶血性弧菌多克隆抗體的來(lái)源
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 功能化Fe_3O_4粒子的制備和表征
2.2.2 免疫磁珠的制備及其對(duì)VP富集效率的檢測(cè)
2.2.3 副溶血性弧菌檢測(cè)方法的建立
2.2.4 檢測(cè)方法的評(píng)價(jià)
2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2.2.6 檢測(cè)方法陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 功能化磁珠的表征結(jié)果
3.2 富集效率的檢測(cè)
3.3 副溶血性弧菌方法建立
3.4 檢測(cè)方法的評(píng)價(jià)
第4章 討論
4.1 功能化Fe_3O_4粒子的制備和表征
4.2 免疫磁珠的制備及其對(duì)VP富集效率的檢測(cè)
4.3 VP檢測(cè)方法的建立與效果評(píng)價(jià)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及攻讀碩士期間取得的科研成果
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]副溶血弧菌分子致病機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 楊芳,李秀娟,徐保紅. 中華疾病控制雜志. 2010(06)
[2]PCR法制備地高辛標(biāo)記DNA探針斑點(diǎn)雜交檢測(cè)副溶血性弧菌tlh基因[J]. 曹小紅,朱雪蘭,陳艷,劉秀梅. 中國(guó)食品衛(wèi)生雜志. 2009(04)
[3]副溶血弧菌預(yù)測(cè)模型與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的研究進(jìn)展[J]. 姬華,韓海紅,王洪新,劉秀梅. 食品工業(yè)科技. 2009(05)
[4]副溶血性弧菌及其溶血毒素研究進(jìn)展[J]. 李毅,朱心強(qiáng). 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2008(12)
[5]副溶血性弧菌的致病性及其快速檢測(cè)[J]. 寧喜斌,劉代新,張繼倫. 微生物與感染. 2008(01)
[6]食品中副溶血性弧菌的危害分析、檢測(cè)與預(yù)防控制[J]. 陳瑞英,魯建章,蘇意誠(chéng),劉承初. 食品科學(xué). 2007(01)
[7]食品中單核細(xì)胞增多李斯特菌的快速檢測(cè)[J]. 閆冰,李一松,霍貴成,姜毓君. 食品工業(yè)科技. 2006(10)
[8]副溶血性弧菌引起食物中毒的微生物學(xué)診斷的研究[J]. 何連生,徐淳行,張大帆,楊寧敏. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2006(05)
[9]2003年中國(guó)食源性疾病暴發(fā)的監(jiān)測(cè)資料分析[J]. 劉秀梅,陳艷,樊永祥,王茂起. 衛(wèi)生研究. 2006(02)
[10]副溶血弧菌的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 蔡潭溪,蔣魯巖,黃克和. 中國(guó)人獸共患病雜志. 2005(10)
博士論文
[1]海產(chǎn)品中致病性副溶血弧菌PCR快速檢測(cè)體系建立及定量研究[D]. 祝儒剛.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號(hào):3592221
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