目的:壬基酚（nonylphenol,NP）是典型的持久性有機(jī)污染物（Persistent Organic Pollutants,POPs）,對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重。中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system,CNS）在發(fā)育期對(duì)POPs非常敏感。越來越多的證據(jù)表明,孕哺期NP暴露會(huì)損害子代的CNS。髓鞘在小腦中蘊(yùn)含豐富,它是CNS的基本和必要結(jié)構(gòu),而孕哺期NP暴露對(duì)子代小腦髓鞘的影響亟待開展。因此,我們建立了孕哺期NP暴露模型,研究NP對(duì)子代小腦依賴的運(yùn)動(dòng)功能及髓鞘發(fā)育的影響;研究少突膠質(zhì)細(xì)胞（髓鞘形成細(xì)胞）增殖情況;在上述研究基礎(chǔ)上,我們深入探討了TGFβRIISmad2/3信號(hào)通路（調(diào)控少突膠質(zhì)細(xì)胞增殖的信號(hào)通路）的變化與NP暴露引起子代小腦髓鞘損傷之間的關(guān)系。實(shí)驗(yàn)方法:將雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、NP處理組和陽(yáng)性對(duì)照組。從妊娠第0天（gestational day 0,GD0）至子代出生后第21天（postnatal day 21,PND21）,NP染毒組通過灌胃給予不同劑量的NP（10,50 mg/kg/day,玉米油為溶劑）,對(duì)照組每天給予玉米油灌胃,陽(yáng)性對(duì)照組除每... 

【文章來源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

-1，前爪抓力實(shí)驗(yàn)和轉(zhuǎn)輪疲勞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文9（P<0.05）（圖3.1-2-B）。圖3.1-2，仔鼠步態(tài)分析的結(jié)果注：圖3.1-2-A為仔鼠前肢的步長(zhǎng)結(jié)果圖，3.1-2-B為仔鼠后肢的步長(zhǎng)結(jié)果圖。*，與對(duì)照組相比，P<0.05；**，與對(duì)照組相比，P<0.01。n=123.2孕哺期NP暴露對(duì)仔鼠小腦髓鞘發(fā)育的影響髓鞘是由少突膠質(zhì)細(xì)胞圍繞軸突形成的一種層膜結(jié)構(gòu)，在小腦中大量存在，它能加速軸突的傳導(dǎo)速度，從而影響小腦運(yùn)動(dòng)功能[20]。為了觀察孕哺期NP暴露對(duì)子代小腦髓鞘形態(tài)的影響，我們進(jìn)行了免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)仔鼠小腦中MBP蛋白與PLP蛋白的表達(dá)情況。MBP和PLP是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中髓磷脂的兩種主要成分，其含量大致相等。在PND40時(shí)鏡下觀察仔鼠小腦白質(zhì)區(qū)兩種蛋白免疫熒光染色。結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，孕哺期暴露于NP導(dǎo)致仔鼠小腦髓鞘長(zhǎng)度和密度明顯減少，且髓鞘密度減少隨NP劑量增加而加重，且50mg/kg染毒組的密度減少程度接近VPA陽(yáng)性對(duì)照組（圖3.2）。

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文10圖3.2，仔鼠小腦白質(zhì)周圍髓鞘免疫熒光染色注：圖3.2,紅色為為仔鼠小腦PLP免疫熒光染色。圖中標(biāo)尺為100μm，放大倍數(shù)為10×20。圖3.2,綠色為仔鼠小腦MBP免疫熒光染色。n=6。3.3孕哺期NP暴露激活仔鼠小腦TGFβRII-Smad2/3信號(hào)通路3.3.1孕哺期NP暴露激活仔鼠小腦的TGFβRII與p-Smad2/3TGFβ信號(hào)在少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞的增殖中起著關(guān)鍵作用[34][35]。而TGFβRII信號(hào)通路及其主要底物Smad2/3的激活阻止髓鞘發(fā)育成熟[29]。因此我們使用免疫印跡技術(shù)檢測(cè)仔鼠小腦中TGFβRII和Smad2/3以及p-Smad2/3（Smad2/3的活性形式）蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，PND14時(shí)50mg/kgNP染毒組與VPA陽(yáng)性對(duì)照組中，TGFβRII的表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；其下游效應(yīng)因子Smad2/3的表達(dá)水平在PND14時(shí)10mg/kg及50mg/kg染毒組與對(duì)照組相比輕微下降，但其結(jié)果沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，三組總Smad2/3的水平也保持穩(wěn)定。VPA陽(yáng)性對(duì)照組與對(duì)照組相比表達(dá)減少，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而在PND14時(shí)50mg/kg染毒組與VPA陽(yáng)性對(duì)照組的p-Smad2/3表達(dá)水平高于對(duì)照組，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），VPA陽(yáng)性對(duì)照組與對(duì)照組間的差異更顯著（圖3.3.1）。


本文編號(hào)：3547939