微（納米）塑料由于其特殊的性質(zhì)如小粒徑、高表面活性以及降解困難等,給生態(tài)環(huán)境和人類的生命健康帶來潛在的危害,已經(jīng)作為一類新型環(huán)境污染物受到科研人員的高度關(guān)注。目前大量研究報道了微（納米）塑料在水生生物體內(nèi)的累積以及毒性作用。此外,已經(jīng)證明工程納米材料（ENMs）進入生物體內(nèi)接觸生理環(huán)境后,會迅速吸附體液中的蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)形成“蛋白冠”。這不僅改變了ENMs固有的表面性質(zhì),而且會進一步影響其后續(xù)的生物學(xué)效應(yīng)。然而,目前關(guān)于塑料顆粒介導(dǎo)的蛋白冠效應(yīng)研究較少,尤其是從納米塑料的納米特性角度進行分析。因此,迫切需要開展相關(guān)的工作。暴露在自然環(huán)境中的塑料受到外界因素如紫外照射、風(fēng)化、機械應(yīng)力以及空氣中氧氣等作用發(fā)生老化。而老化可以顯著影響塑料的物理化學(xué)性質(zhì),使其表現(xiàn)出與原始塑料不同的表面特性。因此在研究微（納米）塑料的環(huán)境行為及生物學(xué)效應(yīng)時,老化帶來的相關(guān)影響也不容忽視。第一部分:聚苯乙烯是生產(chǎn)和生活中應(yīng)用最普遍的商用塑料之一,因此本實驗選用聚苯乙烯納米塑料（PS NPs）為納米塑料模型,分析了其與胎牛血清（FBS）蛋白的相互作用以及隨后對小鼠單核巨噬細胞白血病細胞（RAW264.7）的毒性... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PSNPs的TEM成像

第二章PSNPs與FBS的相互作用以及對細胞毒性的影響21接下來，我們進一步通過液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）定性及定量分析了PSNPs表面蛋白冠的組成，并根據(jù)生理功能對鑒定出的所有蛋白質(zhì)進行分類。結(jié)果如圖2-2（C），不同種類的蛋白質(zhì)以不同的比例吸附在PSNPs表面，包括球蛋白，血紅蛋白，急性期蛋白，白蛋白，補體蛋白，凝血相關(guān)蛋白，載脂蛋白以及熱休克蛋白等。以上實驗結(jié)果說明，PSNPs與FBS孵育后，可以吸附FBS中不同分子量以及不同種類的蛋白質(zhì)形成蛋白冠。圖2-2PSNPs與FBS蛋白的相互作用。（A）PSNPs與不同濃度的FBS的相互作用。（B）PSNPs與FBS在不同時間內(nèi)的相互作用。(C)LC-MS/MS分析蛋白冠的組成。Fig.2-2TheinteractionbetweenPSNPsandFBSproteins.(A)InteractionbetweenPSNPsandFBSatdifferentconcentrations.(B)InteractionbetweenPSNPsandFBSatdifferenttimes.(C)LC-MS/MSanalysisofproteincoronacomposition.2.4.3PS@FBS復(fù)合物的表征

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文22通過TEM對PSNPs與FBS孵育后的形貌進行觀察。如圖2-3所示，PSNPs與FBS作用后，F(xiàn)BS蛋白包裹在PSNPs表面，形成了厚度為46nm的蛋白冠層。此外，將PSNPs與10%FBS相互作用后形成PS@FBS復(fù)合物，用馬爾文激光粒度儀對PS@FBS復(fù)合物在不同介質(zhì)中的水合粒徑以及Zeta電位進行測定，結(jié)果如表2-2所示。與裸露的PSNPs相比，PS@FBS復(fù)合物在兩種介質(zhì)中的水合粒徑均有不同程度的增加，并且Zeta電位絕對值都有所降低，進一步說明FBS蛋白在PSNPs上的吸附。圖2-3PS@FBS復(fù)合物的透射電鏡成像Fig.2-3TEMimagingofPS@FBScomplexes表2-2PS@FBS復(fù)合物的水合粒徑及Zeta電位Table.2-2HydrodynamicsizeandZetapotentialofPS@FBScomplexes2.4.4PSNPs與PS@FBS復(fù)合物對RAW264.7的細胞毒性影響大量研究報導(dǎo)了蛋白冠形成后導(dǎo)致的納米顆粒細胞毒性的差異[76]。因此，我們進一步分析了FBS蛋白質(zhì)的包裹是否對PSNPs的細胞毒性產(chǎn)生影響。首先，評估了裸露的PSNPs作用于RAW264.7細胞后的細胞活力。將不同濃度的PSNPs（50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL）作用于RAW264.7細胞24h，


本文編號：3521739