目的:探討鄰苯二甲酸單丁酯（monobutyl phthalate,MBP）和鄰苯二甲酸單（2-乙基）己酯（mono（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP）聯(lián)合染毒影響體外培養(yǎng)的小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞（TM-3）睪酮生成水平的線粒體損傷機制。方法:1、在含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基中,培養(yǎng)小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞（TM-3）,分為對照組0μmol/L及1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L MBP和MEHP染毒組,各組小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞染毒處理24h。2、以四甲基偶氮唑藍(lán)法檢測并計算細(xì)胞增殖抑制率,觀察MBP和MEHP毒性作用下細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變。3、透射電鏡觀察細(xì)胞線粒體超微結(jié)構(gòu)的改變。4、線粒體膜電位檢測試劑盒染色,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞線粒體膜電位的改變。5、蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測細(xì)胞裂解液中二氫硫辛酰胺脫氫酶（DLD）,類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白（StAR）的表達(dá)水平。6、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細(xì)胞環(huán)磷酰胺（cAMP）水平。7、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測細(xì)胞睪酮（T）水平。結(jié)果:1、MBP... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學(xué)寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度的MBP染毒24h后TM-3細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化

圖 2 不同濃度的 MEHP 染毒 24h 后 TM-3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化按照 1.2.3 MTT 法檢測細(xì)胞活力的實驗方法經(jīng) MTT 實驗檢測各組吸光度值，計算抑制率進(jìn)而依據(jù)改良寇氏法公式可求得 MBP、MEHP 的半數(shù)致死濃度，分別為 LC50MBP= 500μmol/L，LC50MEHP= 450μmol/L[25]，數(shù)據(jù)引自同課題組師兄已發(fā)表論文。2.2 MBP 和 MEHP 聯(lián)合染毒對睪丸間質(zhì)細(xì)胞線粒體超微結(jié)構(gòu)的影響對照組(×100)MEHP 1μmol/L (×100)MEHP 10μmol/L (×100)MEHP 100μmol/L (×100) MEHP 500μmol/L (×100) MEHP 1000μmol/L (×100)D E F100um100um100um

圖 2 不同濃度的 MEHP 染毒 24h 后 TM-3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化按照 1.2.3 MTT 法檢測細(xì)胞活力的實驗方法經(jīng) MTT 實驗檢測各組吸光度值，計算抑制率進(jìn)而依據(jù)改良寇氏法公式可求得 MBP、MEHP 的半數(shù)致死濃度，分別為 LC50MBP= 500μmol/L，LC50MEHP= 450μmol/L[25]，數(shù)據(jù)引自同課題組師兄已發(fā)表論文。2.2 MBP 和 MEHP 聯(lián)合染毒對睪丸間質(zhì)細(xì)胞線粒體超微結(jié)構(gòu)的影響A 對照組 B MBP 單獨染毒組 C MEHP 單獨染毒組 D MBP+MEHP 聯(lián)合染毒組MEHP 100μmol/L (×100) MEHP 500μmol/L (×100) MEHP 1000μmol/L (×100)

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3484619