苯并芘暴露促進小鼠蛻膜化過程中基質(zhì)細胞增殖并抑制分化
發(fā)布時間：2021-10-11 23:37
目的:苯并芘（BaP）是一種重要的環(huán)境污染物,具有明顯的生殖毒性。課題組前期的研究發(fā)現(xiàn),孕早期BaP暴露損害小鼠子宮內(nèi)膜形態(tài)并誘導(dǎo)蛻膜化缺陷。蛻膜化是子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞增殖分化形成大的上皮樣蛻膜細胞的過程,為胚胎生長和胎盤形成提供空間。蛻膜化的正常進行與細胞周期調(diào)節(jié)密切相關(guān),但關(guān)于BaP對早孕小鼠基質(zhì)細胞蛻膜化過程中細胞周期的影響尚不清楚。本研究探討了BaP對蛻膜化過程中基質(zhì)細胞增殖分化的影響,為進一步研究BaP的生殖毒性提供實驗依據(jù)。方法:前期實驗結(jié)果證明0.2mg/kg/d BaP染毒影響了早孕小鼠子宮內(nèi)膜容受性及蛻膜化過程,導(dǎo)致胚胎著床數(shù)下降,因此本實驗采用0.2mg/kg/d BaP作為染毒劑量。首先建立BaP染毒孕鼠模型,從妊娠第1天（D1）至第8天（D8）,每日給予灌胃處理,分別于孕6、7、8天收取子宮材料,進行以下實驗:（1）HE染色觀察蛻膜組織形態(tài),Western blot檢測蛻膜化標(biāo)志物BMP2的表達。（2）免疫組化,Real-time PCR和Western blot的方法檢測蛻膜組織的增殖（Ki67和PCNA）,分化（Prl8a2和Prl3c1）以及多倍體化相關(guān)分子...
【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】：54 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
BaP處理導(dǎo)致小鼠的蛻膜化缺陷（A）妊娠D7植入點數(shù)量統(tǒng)計圖；（B）妊娠D7小鼠子宮圖片，箭頭指向異常胚胎；（C）
圖 2 BaP 暴露影響蛻膜化過程中基質(zhì)細胞的增殖和分化）IHC 檢測妊娠 D7 小鼠子宮 Ki67 的表達；（B）IHC 檢測妊娠 D7 小鼠子宮 PCNA 的；棕色染色表示陽性反應(yīng)；（C）RT-PCR 檢測 D6-D8 的蛻膜組織 Prl8a2 的 mRNA 水平；）RT-PCR 檢測 D6-D8 的蛻膜組織 Pr13c1 的 mRNA 水平。（**：p <0.01，***：p <0.001）。.2 BaP affects the proliferation and differentiation of stromal cells. (A) IHC analyses of7 in the uterine tissues on D7 of pregnancy. (B) IHC analyses of PCNA on D7 of pregnancywn staining indicates positivity. (C) The mRNA levels of Prl8a2 on D6-8 detected by-PCR. (D) The mRNA levels of Prl3c1 on D6-8 detected by RT-PCR. **：p <0.01，***：p001. BaP 影響蛻膜細胞的多倍體化相關(guān)因子的表達有研究證明，CyclinD3、CDK6 和 p21 參與蛻膜多倍體化形成[17]，在蛻膜化過
圖 3 BaP 暴露損害蛻膜多倍體化相關(guān)因子的表達Western blot 檢測蛻膜化過程中 CyclinD3，CDK6 和 p21 的表達；（B）CyclinD3，CD 的蛋白定量分析；（C）IHC 檢測 CyclinD3 的表達；（D）IHC 檢測 CDK6 的表達HC 檢測 p21 的表達。（*：p <0.05，**：p <0.01）aP impairs the expression of polyploid related factors. (A). Analyses of CyclinD3, CD1 protein expression during decidualization by western blot. (B) Quantitative analysD3, CDK6 and P21 expression show in the Bar plot. (C) The location of the Cycli in the uterine tissues of D6, D7 and D8 is determined by IHC. (D) and (E) IHC anaression of CDK6 and P21 in the uterine tissues on D7. *: p< 0.05, **: p<0.01.BaP 誘導(dǎo)細胞發(fā)生 G1/S 期轉(zhuǎn)換1 / S 檢驗點失調(diào)會導(dǎo)致異常的細胞增殖。CDK2 通過與 CyclinA 和 E 結(jié)合
本文編號：3431459
【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市
【文章頁數(shù)】：54 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
BaP處理導(dǎo)致小鼠的蛻膜化缺陷（A）妊娠D7植入點數(shù)量統(tǒng)計圖；（B）妊娠D7小鼠子宮圖片，箭頭指向異常胚胎；（C）
圖 2 BaP 暴露影響蛻膜化過程中基質(zhì)細胞的增殖和分化）IHC 檢測妊娠 D7 小鼠子宮 Ki67 的表達；（B）IHC 檢測妊娠 D7 小鼠子宮 PCNA 的；棕色染色表示陽性反應(yīng)；（C）RT-PCR 檢測 D6-D8 的蛻膜組織 Prl8a2 的 mRNA 水平；）RT-PCR 檢測 D6-D8 的蛻膜組織 Pr13c1 的 mRNA 水平。（**：p <0.01，***：p <0.001）。.2 BaP affects the proliferation and differentiation of stromal cells. (A) IHC analyses of7 in the uterine tissues on D7 of pregnancy. (B) IHC analyses of PCNA on D7 of pregnancywn staining indicates positivity. (C) The mRNA levels of Prl8a2 on D6-8 detected by-PCR. (D) The mRNA levels of Prl3c1 on D6-8 detected by RT-PCR. **：p <0.01，***：p001. BaP 影響蛻膜細胞的多倍體化相關(guān)因子的表達有研究證明，CyclinD3、CDK6 和 p21 參與蛻膜多倍體化形成[17]，在蛻膜化過
圖 3 BaP 暴露損害蛻膜多倍體化相關(guān)因子的表達Western blot 檢測蛻膜化過程中 CyclinD3，CDK6 和 p21 的表達；（B）CyclinD3，CD 的蛋白定量分析；（C）IHC 檢測 CyclinD3 的表達；（D）IHC 檢測 CDK6 的表達HC 檢測 p21 的表達。（*：p <0.05，**：p <0.01）aP impairs the expression of polyploid related factors. (A). Analyses of CyclinD3, CD1 protein expression during decidualization by western blot. (B) Quantitative analysD3, CDK6 and P21 expression show in the Bar plot. (C) The location of the Cycli in the uterine tissues of D6, D7 and D8 is determined by IHC. (D) and (E) IHC anaression of CDK6 and P21 in the uterine tissues on D7. *: p< 0.05, **: p<0.01.BaP 誘導(dǎo)細胞發(fā)生 G1/S 期轉(zhuǎn)換1 / S 檢驗點失調(diào)會導(dǎo)致異常的細胞增殖。CDK2 通過與 CyclinA 和 E 結(jié)合
本文編號：3431459
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/yufangyixuelunwen/3431459.html
最近更新
教材專著
