鎘（Cd）是一種對(duì)人體有害的元素,可通過(guò)呼吸道或皮膚吸收進(jìn)入人體,因半衰期長(zhǎng)、排泄率低,逐漸累積在人體的各種組織器官中,從而引起多器官損害,甚至促進(jìn)癌癥發(fā)展。研究表明,低劑量的鎘可以誘導(dǎo)凋亡和自噬。越來(lái)越多的研究表明細(xì)胞凋亡與自噬之間存在密不可分的關(guān)系,如自噬相關(guān)蛋白（Atg）12,通過(guò)與Bcl-2家族成員相互作用誘導(dǎo)凋亡。同樣,抗凋亡蛋白Bcl-2家族也可以調(diào)節(jié)自噬。Atg4B作為Atg家族中的一員,在自噬發(fā)生的過(guò)程中具有重要作用。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)氯化鎘（CdCl₂）通過(guò)誘導(dǎo)活性氧（ROS）產(chǎn)生引起Atg4B表達(dá)上調(diào),Atg4B上調(diào)誘導(dǎo)的自噬在A549細(xì)胞周期和增殖的變化中起了重要作用。目前沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道Atg4B在凋亡中的作用,且低劑量CdCl₂誘導(dǎo)凋亡與自噬的轉(zhuǎn)換機(jī)制也在探索階段。因此,本研究以CdCl₂作為研究對(duì)象,探討Atg4B在CdCl₂所誘導(dǎo)的凋亡與自噬中的作用。目的:探討Atg4B在CdCl₂誘導(dǎo)的A549細(xì)胞凋亡和自噬中可能的分子機(jī)制。方法:本研究以人肺腺癌細(xì)... 

【文章來(lái)源】：大連醫(yī)科大學(xué)遼寧省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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CdCl2對(duì)A549細(xì)胞內(nèi)凋亡和自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文1.2 形態(tài)學(xué)觀察 CdCl2對(duì) A549 細(xì)胞凋亡的影響通過(guò) Hoechst33342 染色觀察 2 μM CdCl2處理 A549 細(xì)胞 0，12，24，36 和48 小時(shí)細(xì)胞核形態(tài)的變化。如圖 2 所示，與對(duì)照組相比，可以觀察到在 CdCl2處理 12 和 24 小時(shí)，固縮、碎裂的細(xì)胞核數(shù)量明顯升高，提示凋亡發(fā)生。在 CdCl2處理 36 和 48 小時(shí)固縮、碎裂的細(xì)胞核數(shù)量較 24 小時(shí)降低（P<0.01）。

圖 3 CdCl2對(duì) A549 細(xì)胞 AVOs 的影響**表示與對(duì)照組相比較，P<0.01；##表示與 CdCl2處理 24 小時(shí)組相比較，P<0.012. CdCl2誘導(dǎo)的凋亡在 A549 細(xì)胞自噬中的影響2.1 CdCl2誘導(dǎo)的凋亡對(duì) A549 細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響為了探討凋亡在 CdCl2引起的 A549 細(xì)胞自噬中的作用，我們采用凋亡抑制劑 Z-VAD-FMK（20 μM）預(yù)處理 A549 細(xì)胞 1 小時(shí)后處理 CdCl2。結(jié)果如圖 4 所示，與對(duì)照組相比，2 μM CdCl2處理 A549 細(xì)胞 36 小時(shí)，自噬相關(guān)蛋白 LC3-II、Beclin1 蛋白表達(dá)水平升高，P62 表達(dá)降低（P<0.05，P<0.01）；經(jīng)過(guò) Z-VAD-FMK預(yù)處理 1 小時(shí)后，與單獨(dú) CdCl2處理組相比，CdCl2誘導(dǎo)的 A549 細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白 LC3-II、Beclin1 蛋白表達(dá)水平顯著降低，P62 表達(dá)升高（P<0.05，P<0.01）。


本文編號(hào)：3427910