本文關(guān)鍵詞：工頻磁場(chǎng)對(duì)小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：近年來(lái),隨著中國(guó)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和社會(huì)的進(jìn)步,環(huán)境中各種有害因素的種類和數(shù)量也隨之增長(zhǎng)。當(dāng)前出生缺陷率居高不下、不孕不育率逐年上升的現(xiàn)象提示我們,環(huán)境對(duì)生殖安全的干擾已日益明顯、令人擔(dān)憂。人為制造的工頻磁場(chǎng)在生活和職業(yè)環(huán)境中無(wú)處不在,且暴露水平日益增高,已成為影響生殖安全的重要理化因素之一。流行病學(xué)研究提示工頻磁場(chǎng)可能升高流產(chǎn)的危險(xiǎn)性,并且與子宮內(nèi)胚胎的次優(yōu)生長(zhǎng)、先天畸形、早期胚胎丟失以及死產(chǎn)等不良生育結(jié)局有關(guān)。實(shí)驗(yàn)研究初步顯示工頻磁場(chǎng)可能通過(guò)影響細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、干擾卵泡發(fā)生過(guò)程、減少排出的囊胚數(shù)等機(jī)制減弱雌性的生殖力。而工頻磁場(chǎng)對(duì)單個(gè)卵母細(xì)胞的影響卻少有報(bào)道�？紤]到卵母細(xì)胞作為女性生殖細(xì)胞所具有的重要生理作用,考察工頻磁場(chǎng)暴露對(duì)體外單獨(dú)體外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)將對(duì)女性生殖系統(tǒng)生殖毒性評(píng)價(jià)具有重要意義。 目的：研究工頻磁場(chǎng)對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟的影響。 方法：從21天ICR雌鼠獲取卵母細(xì)胞。將卵母細(xì)胞分別暴露于2mT工頻磁場(chǎng)4h、12h和24h,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)均設(shè)置一一對(duì)應(yīng)的假暴露組。暴露結(jié)束后,GV期卵母細(xì)胞采用免疫熒光法檢測(cè)DNA損傷情況。將GV期卵母細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),4h后和12h后鏡下分別統(tǒng)計(jì)GVBD率和PB1排出率。排出第一極體的MII期卵母細(xì)胞用染色體鋪片實(shí)驗(yàn)和免疫熒光法觀察其染色體數(shù)目、形態(tài)以及紡錘體的形態(tài),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。用A23187和CHX聯(lián)合處理MII期卵母細(xì)胞,統(tǒng)計(jì)孤雌激活率從而評(píng)估卵母細(xì)胞進(jìn)一步發(fā)育的潛能。 結(jié)果：與假暴露組比較,工頻磁場(chǎng)暴露后,yH2AX平均細(xì)胞焦點(diǎn)數(shù)和陽(yáng)性細(xì)胞率均沒(méi)有顯著性差異；工頻磁場(chǎng)未對(duì)GVBD率及PB1排出率、染色體數(shù)目、染色體的排列與紡錘體的形態(tài)產(chǎn)生影響；暴露組和假暴露組的孤雌激活率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)條件下,工頻磁場(chǎng)對(duì)小鼠卵母細(xì)胞體外減數(shù)分裂成熟無(wú)影響。
【關(guān)鍵詞】：工頻磁場(chǎng) 卵母細(xì)胞 減數(shù)分裂成熟 DNA損傷
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R135
【目錄】：

• 致謝4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 縮略詞10-14
• 1. 前言14-16
• 2. 試驗(yàn)材料16-19
• 2.1 主要儀器設(shè)備和耗材16
• 2.2 主要試劑16-17
• 2.3 試劑配制17-19
• 2.3.1 4%多聚甲醛17
• 2.3.2 鋪片固定液17
• 2.3.3 0.1%破膜液17-18
• 2.3.4 Washing Buffer18-19
• 3. 實(shí)驗(yàn)方法19-24
• 3.1 sXc-ELF工頻磁場(chǎng)輻照系統(tǒng)19-20
• 3.2 細(xì)胞獲取20
• 3.3 細(xì)胞處理與分組20-21
• 3.4 GVBD發(fā)生和PB1排出統(tǒng)計(jì)21
• 3.5 免疫焚光21-22
• 3.6 染色體鋪片22-23
• 3.7 孤雌激活23
• 3.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)23-24
• 4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-32
• 4.1 工頻磁場(chǎng)對(duì)GV期卵母細(xì)胞DNA損傷的影響24-26
• 4.2 工頻磁場(chǎng)對(duì)GV期卵母細(xì)胞GVBD發(fā)生和PB1排出的影響26-27
• 4.3 工頻磁場(chǎng)對(duì)體外MII期卵母細(xì)胞紡錘體和染色體形態(tài)的影響27-30
• 4.4 工頻磁場(chǎng)對(duì)MII期卵母細(xì)胞孤雌激活的影響30-32
• 5. 討論32-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-51
• 文獻(xiàn)45-51
• 作者簡(jiǎn)歷及在讀期間所取得的科研成果51

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：342077