本研究針對(duì)水產(chǎn)品中地西泮殘留的問(wèn)題,建立了一種快速、靈敏的免疫磁珠-膠體金免疫層析法。采用鏈霉親和素磁珠與生物素化地西泮單克隆抗體偶聯(lián)制備的免疫磁珠,快速富集、分離水產(chǎn)品中地西泮殘留,并結(jié)合膠體金免疫層析法進(jìn)行半定量檢測(cè)。結(jié)果表明,經(jīng)過(guò)優(yōu)化后試劑卡最佳工藝為金標(biāo)抗體標(biāo)記量25μg/mL、T線抗原包被量0.6 mg/mL、C線羊抗鼠二抗包被量1.5 mg/mL、金標(biāo)噴量3.0μL/cm,地西泮加標(biāo)濃度為1.0、5.0、10.0和15.0μg/kg時(shí)回收率為78.34%～90.40%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為5.03%～8.96%。本方法特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性好,可在25 min內(nèi)完成單個(gè)樣本檢測(cè),對(duì)水產(chǎn)品中地西泮殘留檢出限為0.5μg/kg,優(yōu)于常規(guī)前處理法。經(jīng)驗(yàn)證,對(duì)40份水產(chǎn)品樣本檢測(cè)結(jié)果與GC-MS法結(jié)果一致,證明免疫磁珠-膠體金免疫層析法可作為水產(chǎn)品中地西泮殘留快速檢測(cè)的有效手段。 

【文章來(lái)源】：食品工業(yè)科技. 2020,41(20)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

免疫膠體金試紙條結(jié)構(gòu)示意圖

制備的膠體金溶液,可經(jīng)肉眼觀察到均一的酒紅色。將膠體金溶液在400～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描,結(jié)果見(jiàn)圖2所示。由圖2可知,膠體金溶液在波長(zhǎng)524 nm左右有單一的最大吸收峰,峰寬較小,說(shuō)明膠體金顆粒整體上比較均一。根據(jù)膠體金顆粒直徑與最大吸收峰之間的關(guān)系λ=0.4271φ+514.56[25]計(jì)算,膠體金的顆粒大小約為22 nm,符合膠體金層析法要求。2.2 地西泮膠體金免疫層析試紙條參數(shù)優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]改進(jìn)膠體金免疫層析檢測(cè)靈敏度的方法[J]. 趙曉明.  技術(shù)與市場(chǎng). 2019(10)
[2]飼料中地西泮殘留的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒研制[J]. 萬(wàn)宇平,吳小勝,臧永軍,崔廷婷,王喜平,王建軍,曹東山,何方洋.  貴州畜牧獸醫(yī). 2018(06)
[3]基于免疫磁珠的膠體金免疫層析法同時(shí)檢測(cè)豬肉中3-甲基-喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸[J]. 周松,劉河冰,馬立才,丁亞芳,張佳林,白春陽(yáng),陶曉奇.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2018(11)
[4]免疫膠體金法快速檢測(cè)水產(chǎn)品中喹諾酮類藥物[J]. 柳愛(ài)春,劉超,張樂(lè),童朝明,李鋒,趙蕓.  浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(02)
[5]畜肉中10種鎮(zhèn)靜劑殘留的超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法[J]. 張爍,周爽,陳達(dá)煒,花鎮(zhèn)東,吳永寧,孫承業(yè),趙云峰.  分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2014(11)
[6]免疫磁珠的原理與特性及其在動(dòng)物源性食品檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J]. 費(fèi)楓,黃迅辰.  浙江畜牧獸醫(yī). 2014(05)
[7]地西泮單克隆抗體的制備及其酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)方法的建立[J]. 李桂敏,寧保安,白家磊,趙麗,趙翠嬌,高志賢.  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2014(03)
[8]氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定臘腸中7種鎮(zhèn)靜劑類藥物殘留[J]. 譚貴良,趙天珍,王文林,李向麗,張娜.  現(xiàn)代食品科技. 2014(02)
[9]高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定羊肉中的11種鎮(zhèn)靜劑類藥物[J]. 魏晉梅,羅玉柱,白云旭.  食品工業(yè)科技. 2014(10)
[10]膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)豬肝中喹乙醇?xì)埩鬧J]. 霍如林,朱愛(ài)榮,張林,高峰,周光宏.  食品工業(yè)科技. 2014(09)



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