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不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群分布特征的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-23 18:02

  本文關(guān)鍵詞:不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群分布特征的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:通過對腸道雙歧桿菌計(jì)數(shù)及基于ERIC-PCR指紋圖譜分析技術(shù)探討不同喂養(yǎng)方式健康嬰兒腸道菌群分布特征。方法:62例30~120d健康嬰兒作為研究對象,按喂養(yǎng)方式不同分為:母乳喂養(yǎng)、國產(chǎn)奶粉喂養(yǎng)、進(jìn)口奶粉喂養(yǎng)及混合喂養(yǎng)四組。采集嬰兒新鮮糞便標(biāo)本。一份通過厭氧法分離培養(yǎng)并計(jì)數(shù)腸道雙歧桿菌。另一份提取腸道細(xì)菌總DNA,通過ERIC(腸桿菌基因間共有序列)-PCR指紋圖譜分析法尋找不同組間差異條帶;回收差異條帶并進(jìn)行克隆、測序;用Blast對所獲序列進(jìn)行同源菌檢索及其編碼蛋白的功能分析。結(jié)果:母乳喂養(yǎng)組與混合喂養(yǎng)組嬰兒腸道雙歧桿菌活菌數(shù)(9.10±1.33cfu/g;8.62±1.35cfu/g)高于國產(chǎn)奶粉及進(jìn)口奶粉喂養(yǎng)組(7.62±1.22cfu/g;7.32±0.80cfu/g,P0.05);而母乳與混和喂養(yǎng)組之間及兩個(gè)奶粉喂養(yǎng)組之間無顯著差異。所有個(gè)體腸道菌群ERIC-PCR指紋圖譜條帶豐富,不同組間ERIC-PCR條帶對比分析發(fā)現(xiàn)兩條差異條帶(A:1100bp;B:1000bp),其中A條帶主要見于母乳、國產(chǎn)奶粉及混合喂養(yǎng)組嬰兒,B條帶主要見于進(jìn)口奶粉喂養(yǎng)組嬰兒;測序及Blast分析結(jié)果顯示,A、B克隆各獲得兩個(gè)序列(A1/A2;B1/B2),該四個(gè)序列的同源菌均為長雙歧桿菌;A序列編碼產(chǎn)物為糖代謝相關(guān)酶類;B序列編碼產(chǎn)物為蛋白代謝相關(guān)酶類。結(jié)論:母乳及混合喂養(yǎng)嬰兒腸道中雙歧桿菌數(shù)量多于奶粉喂養(yǎng)嬰兒;國產(chǎn)奶粉喂養(yǎng)嬰兒腸道中菌群分布更接近于母乳喂養(yǎng)嬰兒。
【關(guān)鍵詞】:嬰兒 腸道菌群 喂養(yǎng)方式 ERIC-PCR 雙歧桿菌
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R174.4
【目錄】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-7
  • 引言7-9
  • 第一章 材料和方法9-20
  • 1.1 材料9-12
  • 1.1.1 研究對象9
  • 1.1.2 實(shí)驗(yàn)菌種9
  • 1.1.3 試劑9
  • 1.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器9-10
  • 1.1.5 主要試劑的配置10-12
  • 1.2 方法12-20
  • 1.2.1 標(biāo)本采集12
  • 1.2.2 腸道雙歧桿菌分離培養(yǎng)、鑒定及計(jì)數(shù)12-13
  • 1.2.3 ERIC-PCR13-16
  • 1.2.4 差異條帶克隆、測序及功能分析16-19
  • 1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析19-20
  • 第二章 結(jié)果20-29
  • 2.1 雙歧桿菌分離培養(yǎng)、鑒定及計(jì)數(shù)20-22
  • 2.1.1 雙歧桿菌分離培養(yǎng)、鑒定20-21
  • 2.1.2 雙歧桿菌計(jì)數(shù)21-22
  • 2.2 不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群ERIC-PCR指紋圖譜及其分析22-26
  • 2.2.1 ERIC-PCR條件的優(yōu)化22-23
  • 2.2.2 不同組喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群ERIC-PCR指紋圖譜23-24
  • 2.2.3 不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群多樣性分析24-26
  • 2.2.4 不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群相似性分析26
  • 2.3 差異條帶克隆、測序及功能分析26-29
  • 2.3.1 克隆陽性篩選及鑒定26-27
  • 2.3.2 差異條帶測序報(bào)告27-28
  • 2.3.3 差異序列同源性檢索及其編碼產(chǎn)物功能分析28-29
  • 第三章 討論29-33
  • 第四章 結(jié)論33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-37
  • 綜述37-51
  • References43-51
  • 攻讀學(xué)位期間的研究成果51-52
  • 致謝52-53

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 劉博婷;;ERIC-PCR的研究進(jìn)展[J];畜牧與飼料科學(xué);2010年08期

2 劉海燕;常玉梅;;宏基因組學(xué)及在人體微生物研究上的應(yīng)用[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2012年08期


  本文關(guān)鍵詞:不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群分布特征的初步研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:322771

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