目的:探討鄰苯二甲酸單丁酯（monobutyl phthalate,MBP）和鄰苯二甲酸單（2-乙基）己酯（mono（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP）在不同染毒濃度下,對小鼠睪丸間質(zhì)細胞（TM-3）活性的毒作用,以及激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應并通過葡糖糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78）-活化轉錄因子4（ATF4）-C/EBP同源蛋白（CHOP）通路致細胞凋亡的過程,進而探討TM-3細胞凋亡過程中MBP和MEHP聯(lián)合染毒對細胞凋亡的影響。方法:1,用10%的胎牛血清及雙抗（青霉素和鏈霉素）和DMEM高糖的完全培養(yǎng)基體外培養(yǎng)TM-3細胞,每隔12小時測量細胞密度并繪制出細胞生長曲線;2,將小鼠睪丸間質(zhì)細胞以初濃度0（對照組）、50、100、200、400、800μmol/L不同濃度梯度的MBP、MEHP和MBP+MEHP,分別作用小鼠睪丸間質(zhì)細胞24、36、48小時;3,用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法檢測染毒組對細胞活性的影響,按照抑制率計算公式計算出染毒對細胞活性抑制率的影響,參考改良寇氏法計算出的半數(shù)抑制劑量來確定后續(xù)染毒劑量和染毒時間,觀察染毒后細... 

【文章來源】：寧夏醫(yī)科大學寧夏回族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

正常小鼠睪丸間質(zhì)細胞在培養(yǎng)不同時間下細胞生長曲線圖

不同濃度的MBP和（或）MMBP+MEHP800μmol/L（×200）

圖 3 MBP 和（或）MEHP 染毒小鼠睪丸間質(zhì)細胞內(nèi) GRP78 和 CHOP 蛋白表達的凝膠電泳圖注：A:GRP78 蛋白；B:ATF4 蛋白；C：CHOP 蛋白；D：MBP 和（或）MEHP400μmol/L 染毒 后 GRP78 蛋白、ATF4 蛋白、CHOP 蛋白變化趨勢；1、5、9、13：對照組；2、6、10：200 μmol/L組；3、7、11：400 μmol/L 染毒組；4、8、12：800 μmol/L 染毒組；13：MBP 400 μmol/L 染毒14：MEHP 400μmol/L 染毒組；15：MBP（400 μmol/L）+MEHP（400 μmol/L）染毒組。MBP 染毒對 TM-3 細胞中 GRP78、ATF4 和 CHOP 蛋白表達水平的影響（見表 7）。由表 7 可知，與對照（0 μmol/L）組相比，隨著 MBP 染毒濃度的升高可致 TM-3中的 GRP78、ATF4 和 CHOP 蛋白的表達量隨之升高，經(jīng)單因素方差分析具有統(tǒng)計義（P<0.05）。AB CD


本文編號：3220126