目的:多氯聯(lián)苯屬于持久性有機(jī)污染物,在環(huán)境和人體中廣泛存在,已有研究表明多氯聯(lián)苯對(duì)機(jī)體有多種毒性作用。多氯聯(lián)苯進(jìn)入機(jī)體內(nèi)會(huì)迅速代謝為羥基多氯聯(lián)苯,OH-PCBs的濃度占人體PCBs總水平的10-30%,往往高于許多單個(gè)PCB同系物,是多氯聯(lián)苯產(chǎn)生毒性的重要物質(zhì)基礎(chǔ),因此,我們闡述羥基多氯聯(lián)苯的毒性機(jī)制更有意義。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶（UGTs）是重要的II相代謝酶,能代謝體內(nèi)多種內(nèi)源性小分子（如雌激素、膽汁酸、膽紅素等）,維持機(jī)體正常的生理平衡。本研究旨在探究羥基多氯聯(lián)苯對(duì)多種尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶亞型活性的抑制作用,試圖從代謝毒理學(xué)角度闡明羥基多氯聯(lián)苯的毒性機(jī)制。方法:模擬體內(nèi)化合物的代謝環(huán)境,選取35種代表性的羥基多氯聯(lián)苯和9種主要人類(lèi)UGTs（UGT1A1、1A3、1A6、1A7、1A8、1A9、1A10、2B7和2B17）作為實(shí)驗(yàn)組,溶劑二甲基亞砜作為實(shí)驗(yàn)的空白對(duì)照,以重組UGTs催化4-甲基傘形酮（4-MU）為探針?lè)磻?yīng),通過(guò)體外孵育實(shí)驗(yàn),對(duì)其代謝產(chǎn)物4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷（4-MUG）進(jìn)行定量分析。通過(guò)比較不同氯原子數(shù)量和羥基位置的OH-PCBs對(duì)UGT... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
試劑和方法
    1.1 標(biāo)準(zhǔn)品及配制溶劑
    1.2 化學(xué)試劑
        1.2.1 體外孵育體系中所含的化合物
        1.2.2 流動(dòng)相
    1.3 配制溶液
        1.3.1 抑制劑
        1.3.2 Tris-HCl緩沖液
        1.3.3 二價(jià)金屬溶液氯化鎂溶液
        1.3.4 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的反應(yīng)起始溶液
        1.3.5 體外孵育終止反應(yīng)液(含內(nèi)標(biāo))
    1.4 儀器
    1.5 體外孵育體系
    1.6 UPLC的檢測(cè)條件
酶抑制試驗(yàn)
    2.1 羥基多氯聯(lián)苯對(duì)人重組UGT各亞型的初篩
    2.2 羥基多氯聯(lián)苯對(duì)UGT各亞型的濃度依賴(lài)性及IC_(50)
        2.2.1 濃度依賴(lài)性
        2.2.2 IC_(50)
    2.3 抑制參數(shù)和抑制類(lèi)型的判斷
        2.3.1 方法
        2.3.2 抑制動(dòng)力學(xué)類(lèi)型
        2.3.3 Ki值
    2.4 體外體內(nèi)外推法評(píng)估抑制能力
分子對(duì)接
    3.1 同源蛋白建模
    3.2 羥基多氯聯(lián)苯與尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的分子對(duì)接
統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
    5.1 各化合物的色譜峰及保留時(shí)間
    5.2 OH-PCBs對(duì) UGT各亞型的抑制初篩
    5.3 OH-PCBs對(duì) UGT各亞型的半數(shù)抑制濃度
    5.4 OH-PCBs對(duì) UGT各亞型的抑制類(lèi)型及Ki值
    5.5 基于抑制動(dòng)力學(xué)參數(shù)Ki的體外體內(nèi)外推
    5.6 分子對(duì)接驗(yàn)證
        5.6.1 活性位點(diǎn)分析
        5.6.2 氫鍵分析
        5.6.3 疏水作用分析
        5.6.4 結(jié)合自由能分析
討論
    6.1 多氯聯(lián)苯對(duì)尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的抑制作用
    6.2 多氯聯(lián)苯對(duì)磺基轉(zhuǎn)移酶等Ⅱ相代謝酶的雙重抑制作用
    6.3 科學(xué)研究對(duì)公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)的貢獻(xiàn)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 多氯聯(lián)苯與細(xì)胞色素P450 酶系的代謝反應(yīng)
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3201532