目的:多氯聯(lián)苯屬于持久性有機污染物,在環(huán)境和人體中廣泛存在,已有研究表明多氯聯(lián)苯對機體有多種毒性作用。多氯聯(lián)苯進(jìn)入機體內(nèi)會迅速代謝為羥基多氯聯(lián)苯,OH-PCBs的濃度占人體PCBs總水平的10-30%,往往高于許多單個PCB同系物,是多氯聯(lián)苯產(chǎn)生毒性的重要物質(zhì)基礎(chǔ),因此,我們闡述羥基多氯聯(lián)苯的毒性機制更有意義。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶（UGTs）是重要的II相代謝酶,能代謝體內(nèi)多種內(nèi)源性小分子（如雌激素、膽汁酸、膽紅素等）,維持機體正常的生理平衡。本研究旨在探究羥基多氯聯(lián)苯對多種尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶亞型活性的抑制作用,試圖從代謝毒理學(xué)角度闡明羥基多氯聯(lián)苯的毒性機制。方法:模擬體內(nèi)化合物的代謝環(huán)境,選取35種代表性的羥基多氯聯(lián)苯和9種主要人類UGTs（UGT1A1、1A3、1A6、1A7、1A8、1A9、1A10、2B7和2B17）作為實驗組,溶劑二甲基亞砜作為實驗的空白對照,以重組UGTs催化4-甲基傘形酮（4-MU）為探針反應(yīng),通過體外孵育實驗,對其代謝產(chǎn)物4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷（4-MUG）進(jìn)行定量分析。通過比較不同氯原子數(shù)量和羥基位置的OH-PCBs對UGT... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語/符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
試劑和方法
    1.1 標(biāo)準(zhǔn)品及配制溶劑
    1.2 化學(xué)試劑
        1.2.1 體外孵育體系中所含的化合物
        1.2.2 流動相
    1.3 配制溶液
        1.3.1 抑制劑
        1.3.2 Tris-HCl緩沖液
        1.3.3 二價金屬溶液氯化鎂溶液
        1.3.4 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸的反應(yīng)起始溶液
        1.3.5 體外孵育終止反應(yīng)液(含內(nèi)標(biāo))
    1.4 儀器
    1.5 體外孵育體系
    1.6 UPLC的檢測條件
酶抑制試驗
    2.1 羥基多氯聯(lián)苯對人重組UGT各亞型的初篩
    2.2 羥基多氯聯(lián)苯對UGT各亞型的濃度依賴性及IC_(50)
        2.2.1 濃度依賴性
        2.2.2 IC_(50)
    2.3 抑制參數(shù)和抑制類型的判斷
        2.3.1 方法
        2.3.2 抑制動力學(xué)類型
        2.3.3 Ki值
    2.4 體外體內(nèi)外推法評估抑制能力
分子對接
    3.1 同源蛋白建模
    3.2 羥基多氯聯(lián)苯與尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的分子對接
統(tǒng)計學(xué)方法
結(jié)果
    5.1 各化合物的色譜峰及保留時間
    5.2 OH-PCBs對 UGT各亞型的抑制初篩
    5.3 OH-PCBs對 UGT各亞型的半數(shù)抑制濃度
    5.4 OH-PCBs對 UGT各亞型的抑制類型及Ki值
    5.5 基于抑制動力學(xué)參數(shù)Ki的體外體內(nèi)外推
    5.6 分子對接驗證
        5.6.1 活性位點分析
        5.6.2 氫鍵分析
        5.6.3 疏水作用分析
        5.6.4 結(jié)合自由能分析
討論
    6.1 多氯聯(lián)苯對尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶的抑制作用
    6.2 多氯聯(lián)苯對磺基轉(zhuǎn)移酶等Ⅱ相代謝酶的雙重抑制作用
    6.3 科學(xué)研究對公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)的貢獻(xiàn)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 多氯聯(lián)苯與細(xì)胞色素P450 酶系的代謝反應(yīng)
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3201532