目的通過檢測己烯雌酚（DES）對小鼠睪丸引帶細胞形態(tài)與增殖性影響過程中松弛素家族肽受體2（RXFP2）的表達水平,探討RXFP2在外源性雌激素影響小鼠睪丸引帶細胞中的可能作用機制。方法小鼠睪丸引帶組織進行細胞培養(yǎng),傳代后隨機分為正常組、溶劑對照組及實驗組,實驗組分別加入DES終濃度為0.01、0.10、1.00、10.00μg/m L作用48 h。觀察細胞形態(tài)變化,CCK-8檢測其增殖情況,應用免疫熒光和Western Blot對小鼠睪丸引帶細胞中RXFP2進行定位和蛋白定量分析。結(jié)果正常組細胞呈成纖維細胞型生長,同源性好。各實驗組隨DES劑量增加細胞數(shù)及細胞生存率均下降,細胞增殖明顯受抑制,失去正常形態(tài),胞漿收縮,胞體形態(tài)不規(guī)則。免疫熒光顯示RXFP2高表達于細胞膜上。蛋白定量分析發(fā)現(xiàn)各實驗組RXFP2水平與正常組相比表達降低,且差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)論 DES可影響小鼠睪丸引帶細胞形態(tài)與增殖性以及RXFP2蛋白的表達,推測DES可能通過影響RXFP2信號系統(tǒng)介導睪丸引帶的發(fā)育,進而影響睪丸的下降。 

【文章來源】：中國男科學雜志. 2020,34(01)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
        （一）實驗動物
        （二）主要試劑
        （三）主要儀器
    二、方法
        （一）小鼠睪丸引帶細胞的培養(yǎng)及分組
        （二）小鼠睪丸引帶細胞計數(shù)及存活率的檢測
        （三）CCK-8法細胞增殖抑制檢測
        （四）細胞免疫熒光檢測
        （五）Western Blot分析
    三、統(tǒng)計學分析
結(jié)果
    一、DES對小鼠睪丸引帶細胞形態(tài)的影響
    二、DES對小鼠睪丸引帶細胞增殖性的影響
    三、RXFP2的亞細胞定位及DES對小鼠睪丸引帶細胞RXFP2表達的影響
討論



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