乳品中包含了許多營養(yǎng)成分,是人們?nèi)粘Ｉ钪匾氖澄锲贩N,乳品的質(zhì)量安全與消費(fèi)者的健康及乳品行業(yè)的健康發(fā)展有直接關(guān)系。原料液態(tài)奶中細(xì)菌總數(shù)的多少和乳品中的致病菌直接影響著乳品的質(zhì)量好壞,國標(biāo)要求生乳的細(xì)菌總數(shù)不得超過2×10⁶ cfu/mL,而巴氏乳中細(xì)菌總數(shù)不得超過1×10⁵ cfu/mL,而沙門菌和金黃色葡萄球菌是引起食物中毒最常見的病原菌,國標(biāo)方法對乳品中這兩種致病菌的要求是不得檢出,而國標(biāo)方法對細(xì)菌總數(shù)及特定病原菌檢測存在耗時(shí)長的缺點(diǎn),不利于企業(yè)的篩查及現(xiàn)場檢測,因此亟需一種快速高效的方法對乳品進(jìn)行檢測。乳品中的微生物主要包括細(xì)菌和酵母菌,根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室前期研究,分析并確定了吉林省區(qū)域內(nèi)乳品中的細(xì)菌組分。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR（real-time quantitative PCR,qPCR）獲得了不同細(xì)菌的Ct值與細(xì)菌總數(shù)的對應(yīng)關(guān)系,發(fā)現(xiàn)大腸桿菌16S的標(biāo)準(zhǔn)曲線值可以用以衡量乳品常見細(xì)菌的總數(shù)。本研究首先以此為基礎(chǔ),建立了乳品中細(xì)菌總數(shù)的qPCR檢測方法。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并通過確定Ct值判斷乳品中細(xì)菌總數(shù)情況,對照國標(biāo)方法對實(shí)際樣品進(jìn)行檢測... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮寫詞表
引言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 乳制品概況及檢測方法研究
        1.1 乳制品的種類與特點(diǎn)
        1.2 乳制品中的微生物污染
        1.3 國內(nèi)外乳制品微生物限量標(biāo)準(zhǔn)對比
        1.4 微生物檢測方法
    第2章 金黃色葡萄球菌及沙門菌研究進(jìn)展
        2.1 金黃色葡萄球菌研究進(jìn)展
        2.2 沙門菌污染
        2.3 乳品中金黃色葡萄球菌及沙門菌檢測
    第3章 熒光定量PCR檢測方法和環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增方法的原理及進(jìn)展
        3.1 QPCR和 LAMP的原理特點(diǎn)
        3.2 QPCR和 LAMP引物設(shè)計(jì)
        3.3 QPCR和 LAMP結(jié)果分析
        3.4 QPCR和 LAMP檢測特點(diǎn)
        3.5 QPCR和 LAMP的應(yīng)用進(jìn)展
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 乳品中細(xì)菌總數(shù)熒光定量PCR檢測方法的建立
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第2章 沙門菌環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增檢測方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
    第3章 金黃色葡萄球菌環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增檢測方法的建立
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第4章 雙重環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增檢測方法的建立及試劑盒組裝
        4.1 材料
        4.2 方法
        4.3 試劑盒的組裝
        4.4 試劑盒檢測
        4.5 結(jié)果
        4.6 討論
        4.7 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
導(dǎo)師簡介
作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于CRISPR的生物分析化學(xué)技術(shù)[J]. 李悅,李景虹.  化學(xué)進(jìn)展. 2020(01)
[2]基于微流控技術(shù)的數(shù)字PCR檢測儀設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)[J]. 何關(guān)金.  天津科技. 2020(01)
[3]Preparation of a Salmonella LAMP Detection Kit[J]. Yuping WAN,Xiaosheng WU,Yu ZHANG,Meihong DU,Zhaoqin WANG,Caiwei FENG,Zhengmiao ZHAO,Fangyang HE.  Agricultural Biotechnology. 2019(06)
[4]2016～2018年云南省肉類制品致病菌污染狀況調(diào)查分析[J]. 何玉鳳,楊菁,湯曉召,鄒顏秋碩,國譯丹.  食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào). 2019(22)
[5]歷史回顧：改革開放40年乳制品消費(fèi)增長近40倍[J]. 劉回春.  中國質(zhì)量萬里行. 2019(11)
[6]CRISPR-Cas13a結(jié)合重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增快速檢測副溶血性弧菌方法的建立[J]. 葛以躍,蘇璇,張倩,陳銀,趙康辰,吳斌,吳濤,朱小娟,唐震,朱鳳才,崔侖標(biāo).  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2019(20)
[7]我國乳制品分類淺析[J]. 任秋鴻,莊超,彭華.  中國乳業(yè). 2019(09)
[8]恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在真菌檢測中的應(yīng)用[J]. 張長軍.  臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志. 2019(59)
[9]禽致病性大腸桿菌O1、O2、O78血清型三重PCR檢測方法的建立[J]. 王娟芳,戴建君,姜敏,任建鸞,李德志,張鵬,孫建和,湯芳.  南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020(01)
[10]生牛奶中的主要微生物、檢測方法及其控制[J]. 王宇.  現(xiàn)代畜牧科技. 2019(05)

碩士論文
[1]基于CRISPR的核酸檢測新技術(shù)[D]. 王巧.東南大學(xué) 2018
[2]雞源致病性沙門氏菌毒力基因與致病性的相關(guān)性研究[D]. 張珍.廣西大學(xué) 2017
[3]生牛乳中金黃色葡萄球菌的快速檢測及耐藥性研究[D]. 張從超.齊魯工業(yè)大學(xué) 2017
[4]RT-LAMP檢測扎伊爾型埃博拉病毒的研究[D]. 李環(huán).中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 2017
[5]乳品中細(xì)菌與酵母菌PMA-qPCR活菌檢測方法的建立[D]. 蓋冬雪.吉林大學(xué) 2016
[6]鮮乳細(xì)菌總數(shù)熒光定量PCR檢測方法的建立[D]. 劉艷艷.吉林大學(xué) 2014
[7]湖南十字花科蔬菜品種抗根腫病鑒定、病菌小種及qPCR土壤病菌檢測技術(shù)研究[D]. 楊華.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[8]改良型環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法檢測金黃色葡萄球菌的研究[D]. 張濤濤.陜西科技大學(xué) 2014
[9]單增李斯特氏菌和小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌LAMP方法的建立[D]. 徐云明.吉林大學(xué) 2013



本文編號：3184412