發(fā)布時間：2021-05-09 13:37

　　目的:研究長鏈非編碼RNA（LncRNA）H19、S-腺苷高半胱氨酸水解酶（SAHH）以及DNA甲基轉移酶1（DNMT1）在苯并[a]芘（BaP）所致BEAS-2B細胞8-羥基鳥嘌吟DNA糖苷酶1（OGG1）甲基化、DNA氧化損傷及細胞周期阻滯的影響。方法:通過20siRNA20技術構建六種低表達（si-H19,si-SAHH,si-DNMT1,si-H19+si-SAHH,si-H19+si-DNMT1,si-SAHH+si-DNMT1）細胞模型,均設有陰性序列對照組。通過采用Western20blot檢測DNMTs蛋白表達水平,通過采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測DNMT1活性及8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）含量,通過采用免疫共沉淀（Co-IP）檢測SAHH和DNMT1的相互作用,通過免疫熒光（IF）觀察H19、SAHH及DNMT1的分布,通過采用焦磷酸測序法檢測OGG1基因甲基化水平,通過采用流式細胞術（FCM）檢測細胞周期分布。結果:染毒后,BEAS-2B細胞中DNMT1的表達量升高（P<0.05）,在32μmol/L20BaP染毒24h時較溶劑對照升高了2058%... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
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前言
1. 材料方法
    1.1 實驗細胞株
    1.2 試劑和耗材
    1.3 主要儀器
    1.4 主要溶液的配置
    1.5 實驗方法
    1.6 統(tǒng)計學方法
    1.7 技術路線圖
2 結果
    2.1 BaP染毒致BEAS-2B細胞內DNMTs表達水平的劑量效應與時間效應
    2.2 H19/SAHH對BaP致BEAS-2B細胞內DNMTs的影響
    2.3 H19對BaP致BEAS-2B細胞內SAHH與DNMT1相互作用的影響
    2.4 H19/SAHH/DNMT1對BaP致BEAS-2B細胞DNA損傷的影響
3 討論
    3.1 H19/SAHH參與調控DNMT1的表達和活性
    3.2 H19參與調控SAHH和DNMT1的結合
    3.3 H19/SAHH/DNMT1參與調控DNA損傷
4 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]苯并[a]芘對人支氣管上皮細胞H19與SAHH表達的影響[J]. 傅曄,楊瑾,王武斌,張紅杰,劉艷麗,�，摤�.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學. 2018(04)
[2]RING2對苯并[a]芘導致的人支氣管上皮細胞BPDE-DNA加合物及CHK1的影響[J]. 王武斌,張紅杰,劉艷麗,楊瑾.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學. 2017(03)



本文編號：3177396