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H19/SAHH/DNMT1在苯并[a]芘致BEAS-2B細(xì)胞DNA損傷中的作用

發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 13:37
  目的:研究長(zhǎng)鏈非編碼RNA(LncRNA)H19、S-腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)以及DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)在苯并[a]芘(BaP)所致BEAS-2B細(xì)胞8-羥基鳥(niǎo)嘌吟DNA糖苷酶1(OGG1)甲基化、DNA氧化損傷及細(xì)胞周期阻滯的影響。方法:通過(guò)20siRNA20技術(shù)構(gòu)建六種低表達(dá)(si-H19,si-SAHH,si-DNMT1,si-H19+si-SAHH,si-H19+si-DNMT1,si-SAHH+si-DNMT1)細(xì)胞模型,均設(shè)有陰性序列對(duì)照組。通過(guò)采用Western20blot檢測(cè)DNMTs蛋白表達(dá)水平,通過(guò)采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)DNMT1活性及8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)含量,通過(guò)采用免疫共沉淀(Co-IP)檢測(cè)SAHH和DNMT1的相互作用,通過(guò)免疫熒光(IF)觀察H19、SAHH及DNMT1的分布,通過(guò)采用焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)OGG1基因甲基化水平,通過(guò)采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期分布。結(jié)果:染毒后,BEAS-2B細(xì)胞中DNMT1的表達(dá)量升高(P<0.05),在32μmol/L20BaP染毒24h時(shí)較溶劑對(duì)照升高了2058%... 

【文章來(lái)源】:山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
常用縮寫詞中英文對(duì)照表
前言
1. 材料方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
    1.2 試劑和耗材
    1.3 主要儀器
    1.4 主要溶液的配置
    1.5 實(shí)驗(yàn)方法
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    1.7 技術(shù)路線圖
2 結(jié)果
    2.1 BaP染毒致BEAS-2B細(xì)胞內(nèi)DNMTs表達(dá)水平的劑量效應(yīng)與時(shí)間效應(yīng)
    2.2 H19/SAHH對(duì)BaP致BEAS-2B細(xì)胞內(nèi)DNMTs的影響
    2.3 H19對(duì)BaP致BEAS-2B細(xì)胞內(nèi)SAHH與DNMT1相互作用的影響
    2.4 H19/SAHH/DNMT1對(duì)BaP致BEAS-2B細(xì)胞DNA損傷的影響
3 討論
    3.1 H19/SAHH參與調(diào)控DNMT1的表達(dá)和活性
    3.2 H19參與調(diào)控SAHH和DNMT1的結(jié)合
    3.3 H19/SAHH/DNMT1參與調(diào)控DNA損傷
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]苯并[a]芘對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞H19與SAHH表達(dá)的影響[J]. 傅曄,楊瑾,王武斌,張紅杰,劉艷麗,牛瑩瑩.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2018(04)
[2]RING2對(duì)苯并[a]芘導(dǎo)致的人支氣管上皮細(xì)胞BPDE-DNA加合物及CHK1的影響[J]. 王武斌,張紅杰,劉艷麗,楊瑾.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2017(03)



本文編號(hào):3177396

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