蠟樣芽孢桿菌是食品常見的致病菌,由其引起的食物中毒通常會出現(xiàn)兩種臨床癥狀——嘔吐和腹瀉。嘔吐與熱穩(wěn)定的嘔吐毒素有關(guān),而腹瀉則是由于部分菌株產(chǎn)生了多種腸毒素。與腸毒素不同,嘔吐毒素具有較強的耐受性（耐酸、耐熱、耐蛋白酶酶解）,由產(chǎn)嘔吐毒素的蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生。有研究表明,當食物中僅存在10³ CFU/g產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌時,就可引起人嘔吐,甚至死亡。因此,應(yīng)建立快速簡便的蠟樣芽孢桿菌檢測方法,以有效避免和控制因食用被該菌污染的食物而引起中毒事件的發(fā)生。DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)自組裝反應(yīng)是指無需酶催化,DNA鏈即可在吉布斯自由能或位形熵的推動下自行組裝,實現(xiàn)信號級聯(lián)放大的雜交反應(yīng)。該方法因操作簡便、選擇性多、反應(yīng)穩(wěn)定而在現(xiàn)代分析領(lǐng)域中被廣泛關(guān)注。本研究為了縮短檢測時間,進一步提高靈敏度,建立了基于DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)自組裝信號放大方法,并結(jié)合流式微球技術(shù)、氧化石墨烯熒光傳感器用于檢測牛奶加標樣中產(chǎn)嘔吐毒素的蠟樣芽孢桿菌。各章內(nèi)容分述如下:第一章綜述了DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)自組裝信號放大策略應(yīng)用的研究進展。第二章首先建立了基于雜交鏈式反應(yīng)（HCR）-流式微球分析技術(shù)用于檢測產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

基于核酸信號放大策略分類Figure1-1Theclassificationofsignalamplificationbasedonnucleicacid

圖 1-2 HCR 原理圖Figure 1-2 The principle of HCR.2 催化發(fā)夾型 DNA 自組裝反應(yīng)催化發(fā)夾型 DNA 自組裝反應(yīng)（catalyzed hairpin assembly，CHA）是在 HCR上發(fā)展起來的一種新型的由自由能推動的發(fā)夾型 DNA 組裝方式。與 HCR，CHA 反應(yīng)中的目標鏈可以被置換出來并引發(fā)下一輪反應(yīng)，在整個反應(yīng)中類似催化劑的作用。根據(jù)放大方式不同，CHA 可分為線性放大型和指數(shù)放兩種[9]，線性放大型 CHA 中發(fā)夾型探針通常被目標鏈“激活”后依次進行自，并置換出目標鏈，生成穩(wěn)定的線性雙鏈 DNA 結(jié)構(gòu)，置換出來的靶標繼續(xù)雜交反應(yīng)，使檢測信號得到循環(huán)放大[10]（如圖 1-3），而指數(shù)放大型 CHA夾型探針被目標 DNA 催化自組裝生成中間物，該中間物又可“激活”下一輪探針同步進行自組裝[11]，從而使檢測信號得到指數(shù)式放大（如圖 1-4）。在A 反應(yīng)中，被目標鏈“激活”后，發(fā)夾型探針間進行組裝，這不僅可以增強目

CHA原理圖

【參考文獻】：
期刊論文
[1]核酸工具酶輔助的信號放大技術(shù)在生物分子檢測中的應(yīng)用[J]. 蘇晨,吉邢虎,何治柯.  分析科學學報. 2016(02)
[2]一起由蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒的流行病學分析[J]. 楊冬梅,渠怡帆.  世界最新醫(yī)學信息文摘. 2015(02)
[3]基于石墨烯的光學生物傳感器的研究進展[J]. 高原,李艷,蘇星光.  分析化學. 2013(02)
[4]一起蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒調(diào)查分析[J]. 劉成風,胡佳,丁燕,袁奮,李英嬌.  疾病預防控制通報. 2013(01)
[5]滾環(huán)擴增技術(shù)及其在生物分子診斷中的應(yīng)用[J]. 周小明,邢達.  激光生物學報. 2011(06)

碩士論文
[1]基于DNA自組裝的納米金比色檢測DNA新方法研究[D]. 吳志偉.青島科技大學 2015
[2]基于DNA催化頸環(huán)自組裝致病菌檢測新方法研究[D]. 陳文紅.重慶醫(yī)科大學 2015



本文編號：3138983