蠟樣芽孢桿菌是食品常見的致病菌,由其引起的食物中毒通常會(huì)出現(xiàn)兩種臨床癥狀——嘔吐和腹瀉。嘔吐與熱穩(wěn)定的嘔吐毒素有關(guān),而腹瀉則是由于部分菌株產(chǎn)生了多種腸毒素。與腸毒素不同,嘔吐毒素具有較強(qiáng)的耐受性（耐酸、耐熱、耐蛋白酶酶解）,由產(chǎn)嘔吐毒素的蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生。有研究表明,當(dāng)食物中僅存在10³ CFU/g產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢桿菌時(shí),就可引起人嘔吐,甚至死亡。因此,應(yīng)建立快速簡(jiǎn)便的蠟樣芽孢桿菌檢測(cè)方法,以有效避免和控制因食用被該菌污染的食物而引起中毒事件的發(fā)生。DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)自組裝反應(yīng)是指無需酶催化,DNA鏈即可在吉布斯自由能或位形熵的推動(dòng)下自行組裝,實(shí)現(xiàn)信號(hào)級(jí)聯(lián)放大的雜交反應(yīng)。該方法因操作簡(jiǎn)便、選擇性多、反應(yīng)穩(wěn)定而在現(xiàn)代分析領(lǐng)域中被廣泛關(guān)注。本研究為了縮短檢測(cè)時(shí)間,進(jìn)一步提高靈敏度,建立了基于DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)自組裝信號(hào)放大方法,并結(jié)合流式微球技術(shù)、氧化石墨烯熒光傳感器用于檢測(cè)牛奶加標(biāo)樣中產(chǎn)嘔吐毒素的蠟樣芽孢桿菌。各章內(nèi)容分述如下:第一章綜述了DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)自組裝信號(hào)放大策略應(yīng)用的研究進(jìn)展。第二章首先建立了基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（HCR）-流式微球分析技術(shù)用于檢測(cè)產(chǎn)嘔吐毒素蠟樣芽孢... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

基于核酸信號(hào)放大策略分類Figure1-1Theclassificationofsignalamplificationbasedonnucleicacid

圖 1-2 HCR 原理圖Figure 1-2 The principle of HCR.2 催化發(fā)夾型 DNA 自組裝反應(yīng)催化發(fā)夾型 DNA 自組裝反應(yīng)（catalyzed hairpin assembly，CHA）是在 HCR上發(fā)展起來的一種新型的由自由能推動(dòng)的發(fā)夾型 DNA 組裝方式。與 HCR，CHA 反應(yīng)中的目標(biāo)鏈可以被置換出來并引發(fā)下一輪反應(yīng)，在整個(gè)反應(yīng)中類似催化劑的作用。根據(jù)放大方式不同，CHA 可分為線性放大型和指數(shù)放兩種[9]，線性放大型 CHA 中發(fā)夾型探針通常被目標(biāo)鏈“激活”后依次進(jìn)行自，并置換出目標(biāo)鏈，生成穩(wěn)定的線性雙鏈 DNA 結(jié)構(gòu)，置換出來的靶標(biāo)繼續(xù)雜交反應(yīng)，使檢測(cè)信號(hào)得到循環(huán)放大[10]（如圖 1-3），而指數(shù)放大型 CHA夾型探針被目標(biāo) DNA 催化自組裝生成中間物，該中間物又可“激活”下一輪探針同步進(jìn)行自組裝[11]，從而使檢測(cè)信號(hào)得到指數(shù)式放大（如圖 1-4）。在A 反應(yīng)中，被目標(biāo)鏈“激活”后，發(fā)夾型探針間進(jìn)行組裝，這不僅可以增強(qiáng)目

CHA原理圖

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]核酸工具酶輔助的信號(hào)放大技術(shù)在生物分子檢測(cè)中的應(yīng)用[J]. 蘇晨,吉邢虎,何治柯.  分析科學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]一起由蠟樣芽胞桿菌引起食物中毒的流行病學(xué)分析[J]. 楊冬梅,渠怡帆.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2015(02)
[3]基于石墨烯的光學(xué)生物傳感器的研究進(jìn)展[J]. 高原,李艷,蘇星光.  分析化學(xué). 2013(02)
[4]一起蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒調(diào)查分析[J]. 劉成風(fēng),胡佳,丁燕,袁奮,李英嬌.  疾病預(yù)防控制通報(bào). 2013(01)
[5]滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)及其在生物分子診斷中的應(yīng)用[J]. 周小明,邢達(dá).  激光生物學(xué)報(bào). 2011(06)

碩士論文
[1]基于DNA自組裝的納米金比色檢測(cè)DNA新方法研究[D]. 吳志偉.青島科技大學(xué) 2015
[2]基于DNA催化頸環(huán)自組裝致病菌檢測(cè)新方法研究[D]. 陳文紅.重慶醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號(hào)：3138983