本文關(guān)鍵詞：豬肉中一株鼠傷寒沙門菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：沙門菌(Salmonella)是腸道致病菌,是人和動物最主要的食源性病原菌之一。世界衛(wèi)生組織將其列入具有嚴(yán)重危害和中等危害的食源性病原菌。據(jù)統(tǒng)計(jì),在世界各國的細(xì)菌性食物中毒中,沙門菌常列榜首。我國內(nèi)陸地區(qū)的細(xì)菌性食物中毒中有70%-80%的是由沙門菌引起的,其中90%來源于被污染的肉類食品。豬肉是我國的主要動物源性食品,屠宰過程中的沙門菌污染是引起豬肉食品安全問題的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。因此,研究屠宰過程中沙門菌的污染狀況及其致病機(jī)理具有重要意義。基于以上分析,本研究從揚(yáng)州市某屠宰場豬肉胴體分離出了一株鼠傷寒沙門菌(S.typhimurium)菌株,并對其生物學(xué)特性和宿主細(xì)胞對其感染早期的應(yīng)答情況進(jìn)行了分析,為控制和預(yù)防沙門菌病提供了重要參考。1一株鼠傷寒沙門菌的分離與鑒定豬肉屠宰環(huán)節(jié)的沙門菌污染是引起食物中毒的主要原因之一。本實(shí)驗(yàn)從揚(yáng)州市某屠宰場豬肉胴體進(jìn)行采樣,分離出了一株沙門菌菌株,通過生化鑒定及血清型分析,判斷該菌株為鼠傷寒沙門菌。藥物敏感性分析表明,該菌株對氨芐青霉素高度耐藥,而對頭孢類等藥物敏感。動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,腹腔注射5×105cfu/只的劑量即可致死小鼠。1X 104cfu/只的劑量感染后,雖然不能致死小鼠,但能明顯地引起肝臟和脾臟的病理損傷和炎癥反應(yīng),臟器系數(shù)明顯升高；另外,細(xì)菌在小鼠體內(nèi)的定殖能力較強(qiáng),感染后第一周即達(dá)到最高值,之后逐漸降低,四周以后肝臟和脾臟中仍能分離到；此外,相對于對照組,肝勻漿中丙二醛水平顯著升高(P0.01),而超氧化物歧化酶的水平在感染后第一周明顯升高(P0.01),之后逐漸降低；小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶明顯高于對照組(P0.01),而堿性磷酸酶、總蛋白和白蛋白水平明顯低于對照組(P0.01)；除此之外,血清中細(xì)胞因子(干擾素-γ、腫瘤壞死因子和單核細(xì)胞趨化蛋白-1)的分泌增加；并且,該菌株能誘導(dǎo)脾臟中T淋巴細(xì)胞的活化。通過以上分析,對該菌株的生物學(xué)特性有了初步的了解。2利用流式細(xì)胞術(shù)分析小鼠中性粒細(xì)胞和B細(xì)胞對沙門菌感染早期的應(yīng)答沙門菌是兼性胞內(nèi)菌,可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞功能,從而在宿主細(xì)胞內(nèi)存活,使機(jī)體長期帶菌,這給動物和人類健康帶來了嚴(yán)重威脅。目前,關(guān)于沙門菌與宿主細(xì)胞相互作用的研究大部分以巨噬細(xì)胞為對象,而對其他宿主細(xì)胞的研究則相對較少。本研究選取了中性粒細(xì)胞(Neutrophilic granulocyte, NG)和B細(xì)胞作為研究對象,通過體外感染鼠傷寒沙門菌分離株,動態(tài)分析了兩種細(xì)胞在沙門菌感染初期的應(yīng)答情況。結(jié)果表明,分離的NGs(Gr-1+)和B細(xì)胞(B220+)均為圓形,非貼壁生長。感染NGs后,凋亡NGs所占比例略有升高,但差異不顯著,而壞死細(xì)胞明顯增多,隨著時間的延長,壞死細(xì)胞所占比例呈上升趨勢,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平、線粒體膜電位、鈣離子濃度等均有所升高,細(xì)胞表面分子(CD80、CD86)的表達(dá)上調(diào),說明NGs啟動了吞噬殺傷和抗原提呈作用。而感染B細(xì)胞后,相對于對照組,未見明顯的細(xì)胞凋亡和死亡現(xiàn)象發(fā)生,除了鈣離子濃度升高外,活性氧、線粒體膜電位和CD86的表達(dá)均下降。這進(jìn)一步證明了沙門菌與宿主細(xì)胞的相互作用是一個復(fù)雜的過程。本研究通過分析鼠傷寒沙門菌分離株的生物學(xué)特性,以及NGs和B細(xì)胞在感染早期對沙門菌的應(yīng)答情況,為沙門菌致病機(jī)理和疾病防御的研究提供了重要數(shù)據(jù)。另外,本研究發(fā)現(xiàn),NGs和B細(xì)胞對沙門菌感染早期的應(yīng)答情況存在差別,其中的原因尚需進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】：鼠傷寒沙門菌 生物學(xué)特性 小鼠 中性粒細(xì)胞 B細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R155.55
【目錄】：

• 摘要2-4
• Abstract4-9
• 符號說明9-11
• 第一章 緒論11-18
• 1 立題依據(jù)11-13
• 1.1 沙門菌簡介11
• 1.2 沙門菌的危害11
• 1.3 豬肉食品中沙門菌的污染11-12
• 1.4 沙門菌的致病機(jī)制12-13
• 1.5 沙門菌感染細(xì)胞的研究13
• 2 研究內(nèi)容13-14
• 3 技術(shù)路線14
• 參考文獻(xiàn)14-18
• 第二章 一株鼠傷寒沙門菌的分離鑒定及致病性分析18-38
• 1 材料與方法18-22
• 1.1 材料18-19
• 1.2 方法19-22
• 2 結(jié)果22-31
• 2.1 生化鑒定分析結(jié)果22-24
• 2.2 藥物敏感性實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果24-25
• 2.3 對小鼠的致死性分析結(jié)果25
• 2.4 感染后小鼠體重分析結(jié)果25-26
• 2.5 感染后小鼠肝臟及臟器系數(shù)分析結(jié)果26-27
• 2.6 感染后小鼠脾臟及臟器系數(shù)分析結(jié)果27-28
• 2.7 感染后小鼠肝臟和脾臟病理切片分析結(jié)果28
• 2.8 感染后小鼠血清生化指標(biāo)分析結(jié)果28-29
• 2.9 感染后小鼠血清中細(xì)胞因子分析結(jié)果29
• 2.10 感染后肝臟中抗氧化指標(biāo)分析結(jié)果29-30
• 2.11 感染后沙門菌在小鼠體內(nèi)的定殖分析結(jié)果30
• 2.12 感染后小鼠脾臟中T細(xì)胞活化分析結(jié)果30-31
• 3 討論31-34
• 3.1 屠宰場中沙門菌的污染狀況與流行特點(diǎn)31
• 3.2 鼠傷寒沙門菌的致病性31-32
• 3.3 鼠傷寒沙門菌的耐藥性32
• 3.4 鼠傷寒沙門菌感染對小鼠臟器系數(shù)的影響32
• 3.5 鼠傷寒沙門菌感染對小鼠血清生化指標(biāo)的影響32-33
• 3.6 鼠傷寒沙門菌感染對小鼠血清細(xì)胞因子的影響33
• 3.7 鼠傷寒沙門菌感染對小鼠肝臟抗氧化指標(biāo)的影響33-34
• 3.8 鼠傷寒沙門菌感染誘導(dǎo)小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞活化34
• 4 本章小結(jié)34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 第三章 利用流式細(xì)胞術(shù)分析小鼠中性粒細(xì)胞和B細(xì)胞對沙門菌感染早期的應(yīng)答38-57
• 1 材料與方法38-40
• 1.1 材料38-39
• 1.2 方法39-40
• 2 結(jié)果40-48
• 2.1 NGs的FCM分析結(jié)果40-41
• 2.2 B細(xì)胞的FCM分析結(jié)果41-42
• 2.3 NGs的應(yīng)答分析結(jié)果42-45
• 2.4 B細(xì)胞的應(yīng)答分析結(jié)果45-48
• 3 討論48-52
• 3.1 NGs對沙門菌感染的應(yīng)答48-50
• 3.2 B細(xì)胞對沙門菌感染的應(yīng)答50-52
• 4 本章小結(jié)52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 綜述 流式細(xì)胞術(shù)在營養(yǎng)和食品衛(wèi)生評價中的應(yīng)用57-68
• 1 流式細(xì)胞儀概述57
• 2 食品檢測中常用的FCM分析技術(shù)57-60
• 2.1 細(xì)胞代謝活性分析57-58
• 2.2 DNA分析58
• 2.3 細(xì)胞凋亡分析58
• 2.4 酶活性分析58-59
• 2.5 細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測59
• 2.6 細(xì)胞膜電位分析59
• 2.7 細(xì)胞內(nèi)pH值分析59-60
• 3 FCM在食品功能成分活性評價中的應(yīng)用60-62
• 3.1 增強(qiáng)免疫方面的評價60
• 3.2 抗氧化方面的評價60-61
• 3.3 抗腫瘤方面的評價61
• 3.4 其他方面的評價61-62
• 4 FCM在食品微生物檢測方面的應(yīng)用62-63
• 4.1 細(xì)菌活性判斷方面的應(yīng)用62
• 4.2 食品微生物的在線監(jiān)測62
• 4.3 益生菌方面的應(yīng)用62-63
• 4.4 食源性致病菌的檢測63
• 5 小結(jié)與展望63
• 參考文獻(xiàn)63-68
• 全文小結(jié)68-69
• 致謝69-70
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄70-71

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 許華;廖周勇;;一起由鼠傷寒沙門菌引起食物中毒的調(diào)查與實(shí)驗(yàn)室分析[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年20期

2 王蔣麗;李彩云;曾強(qiáng);王偉;高杰;姜明杰;;熒光PCR法與細(xì)菌培養(yǎng)法在鼠傷寒沙門菌食物中毒檢測中的應(yīng)用比較[J];中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2010年12期

3 王均華;高海英;;一起由鼠傷寒沙門菌引起食物中毒的實(shí)驗(yàn)室檢測[J];中國現(xiàn)代醫(yī)生;2011年30期

4 曾憲啟,黃萍,代敏,黃成輝,鄭華英;自佐料小蔥中分離出1例鼠傷寒沙門菌調(diào)查報告[J];中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志;2005年01期

5 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 潘若男;魏旭蘭;羅明;何曉清;侯惠珍;周剛;謝一俊;;我國部分省市區(qū)鼠傷寒沙門菌的質(zhì)粒譜分型及其分布[A];面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展（下冊）[C];1999年

2 駱艷婷;梁景濤;陳愛貞;廖華樂;何秀榕;;鼠傷寒沙門菌分子分型與多重耐藥研究及應(yīng)用探討[A];新發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會論文集[C];2014年

3 蘭和魁;陳麗珊;任大明;;減毒鼠傷寒沙門菌介導(dǎo)的Epo在鼠體內(nèi)長期表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十四次全國兒科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫亮亮;鼠傷寒沙門菌L型的體外膽汁誘導(dǎo)及豬膽囊鼠傷寒沙門菌L型的檢測研究[D];貴陽醫(yī)學(xué)院;2015年

2 任潔;鼠傷寒沙門菌pat/cobB缺失株的構(gòu)建及其應(yīng)對酸壓力的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 何云;基于核酸適體和金納米粒子信號放大策略的電化學(xué)傳感器對鼠傷寒沙門菌的快速檢測[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 李文華;豬肉中一株鼠傷寒沙門菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性分析[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

5 黃燕惠;廣東省鼠傷寒沙門菌的分子流行病學(xué)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

6 陳晶;社區(qū)獲得性腹瀉病原菌耐藥性及鼠傷寒沙門菌對喹諾酮類藥物耐藥機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2006年

7 李廣波;巨噬細(xì)胞過氧化物酶體與鼠傷寒沙門菌相互作用的初步分析[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

8 葛闖;一、流動注射化學(xué)發(fā)光法快速測定血漿鹽酸阿霉素 二、電化學(xué)傳感器對鼠傷寒沙門菌的高靈敏性檢測[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

9 吳春雪;鼠傷寒沙門菌spvB、spvC基因缺陷變異株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[D];南昌大學(xué);2014年

10 胡寧;減毒鼠傷寒沙門菌ΔcrpΔcyaΔasdSL1344缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性[D];河南科技大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：豬肉中一株鼠傷寒沙門菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：306633