目的雙酚A（BPA）為一種應(yīng)用廣泛的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,可通過多種途徑進(jìn)入人體,對(duì)神經(jīng)、生殖及免疫系統(tǒng)造成損傷。研究表明BPA可以誘導(dǎo)免疫細(xì)胞發(fā)生凋亡,進(jìn)而影響機(jī)體正常的免疫功能。睪丸巨噬細(xì)胞（TM）為一類存在于睪丸間質(zhì)中的免疫細(xì)胞,對(duì)維持整個(gè)睪丸內(nèi)環(huán)境起重要作用。本研究以大鼠TM細(xì)胞為靶細(xì)胞,以脂多糖（LPS）作為激活劑,建立BPA暴露模型,應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片技術(shù),探討B(tài)PA對(duì)TM細(xì)胞基因表達(dá)的影響。在此基礎(chǔ)上,分別建立BPA暴露體內(nèi)和體外模型,選擇BPA上調(diào)最明顯的TGF-β/SMAD信號(hào)通路,探討其在BPA誘導(dǎo)大鼠細(xì)胞凋亡中的作用,為進(jìn)一步研究BPA的免疫生殖毒作用機(jī)制提供理論依據(jù)。方法原代提取大鼠TM細(xì)胞,以50μg/ml LPS為激活劑,1 00μmol/L BPA作用于TM細(xì)胞24h,應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片技術(shù),篩選影響最為明顯的基因及信號(hào)通路;以50μg/ml LPS為激活劑,100μmol/L BPA作用TM細(xì)胞4h和24h,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)作用24h后TM細(xì)胞凋亡水平,應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)作用4h后TM細(xì)胞TGF-β2、TGF-β3、SMAD6、SMAD7、BAX和BCL... 

【文章來源】：沈陽醫(yī)學(xué)院遼寧省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

BPA與激活劑基因表達(dá)差異(火山圖)

牐穡恚錚歟?蹋牐攏校寥徑荊玻矗瑁?τ昧魘較赴?崳?儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平。結(jié)果顯示，與激活劑組比較，１〇〇?ｐｍｏｌ／ＬＢＰＡ組細(xì)胞早期??凋亡，晚期凋亡和總凋亡率均無明顯差異（圖３Ａ）。??應(yīng)用ＲＴ－ＰＣＲ檢測(cè)ＢＰＡ作用４ｈ對(duì)原代ＴＭ細(xì)胞和ＳＣＬ－２基因表達(dá)的??影響。結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，激活劑組可使辦／Ｉ基因表達(dá)降低（Ｐ＜〇．〇５）。??與激活劑組比較，１〇〇?ｐｍｏｌ／Ｌ?ＢＰＡ可顯著上調(diào)及基因表達(dá)，同時(shí)下調(diào)ＳＣＸ－２??基因表達(dá)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖３Ｂ）。??ｔ?ＬＰＳ?ｔ?ＬＰＳ??名姓．．－’?￥?ｊ?￥?ｊｗ？．伊、?回、（１??ｉ；?—?ｉ?——２?——Ｉ?０獻(xiàn)?５２３?Ｍ，Ｓ??？?ｉｊｍｉ，?ｊｐ?－?＞＊?ｌＯｄｕｍｏｌｌ?ＨＰＡ??＜：〇－??，?ＢＰＡ?ｔ?ＢＰＡ?，?ＢＰＡ?￥?．??°１???〇１??１?°ｔ??ＩＥ?＇??？ｊ??Ｉ?Ｉ?Ｉ?ｌ?ｌ０＊?＊?ＫｖＭ??＆?■?＆?．?ｎ?？?．?ｖ?二?．ｙ／?＝??ｉ?ｉ?ｉ??丨?ＷＭＬ?＾?１，５－?＿??。?〇?〇＇＃?ｍ?：：：：：：！??斗＿

與激活劑組比較，１００?ｐｍｏｌ／Ｌ?ＢＰＡ作川細(xì)胞４ｈ可顯著下調(diào)ｒＧｆ＾?ｍＲＮＡ表達(dá)，??同時(shí)上調(diào)＊ＳＭ４Ｄ６ｍＲＮＡ表達(dá)（戶切仍），對(duì)爪尸－你、ＳＡ以Ｄ７基因表達(dá)無明顯??改變（圖４）。??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1與心血管疾病的研究進(jìn)展[J]. 王正輝,張國(guó)輝.  臨床與病理雜志. 2019(02)
[2]妊娠期和哺乳期雙酚A暴露對(duì)子代雄性小鼠青春期啟動(dòng)及生精能力的影響[J]. 孟沅,楊洪梅,林任,吳鳳娟,賈麗紅.  環(huán)境與健康雜志. 2018(05)
[3]國(guó)內(nèi)外雙酚A的供需現(xiàn)狀及發(fā)展前景分析[J]. 崔小明.  石油化工技術(shù)與經(jīng)濟(jì). 2017(04)
[4]雙酚A增加CD1小鼠肝細(xì)胞凋亡[J]. 易娟,高茹菲,劉露路,彭川,李丹婷,李啟富.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016(06)
[5]青春期雄性小鼠雙酚A暴露對(duì)生殖功能及子代性別比的影響[J]. 李玉華,段斐,楊芬,周小羽,潘鴻捷,李揚(yáng),李潤(rùn)生.  生殖與避孕. 2015(03)
[6]低劑量雙酚A及其與苯并芘聯(lián)合染毒對(duì)人乳腺上皮細(xì)胞MDM2基因的影響[J]. 楊淋清,羅凌鳳,黃海燕,吳德生,崔棟,周麗,林曉陽,劉建軍,張文昌,莊志雄.  毒理學(xué)雜志. 2014(03)
[7]鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯對(duì)大鼠睪丸巨噬細(xì)胞凋亡的影響[J]. 裴秀叢,段志文,馬明月,張玉敏,孫飛躍.  環(huán)境與健康雜志. 2013(12)
[8]TGF-β1/Smads信號(hào)通路與eNOS在內(nèi)皮細(xì)胞穩(wěn)態(tài)及動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生中的作用[J]. 趙瑛,羅玉玉,張文成.  武警后勤學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(06)
[9]出生前后雙酚A暴露對(duì)子鼠雄性生殖細(xì)胞凋亡的影響[J]. 劉曉利,陳曉宇,李云,丁宋軍,趙歡,沈彤.  中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志. 2012(06)
[10]TGF-β在卵巢癌中作用的研究進(jìn)展[J]. 高娜,吳濤.  大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(04)

博士論文
[1]益氣補(bǔ)腎中藥對(duì)2型糖尿病小鼠海馬體基因表達(dá)的調(diào)控及機(jī)制研究[D]. 慈莉婭.山東大學(xué) 2018

碩士論文
[1]三唑類殺菌劑對(duì)雄性秀麗線蟲生殖功能的影響及作用機(jī)制[D]. 張敏輝.東南大學(xué) 2016
[2]TGF β-SMAD信號(hào)通路對(duì)豬顆粒細(xì)胞和繁殖性狀的作用研究[D]. 徐夢(mèng)思.石河子大學(xué) 2015
[3]雙酚A暴露對(duì)雄性性激素及精子質(zhì)量的影響[D]. 冉茂梅.山西醫(yī)科大學(xué) 2013
[4]環(huán)境雌激素雙酚A對(duì)雄性小鼠生殖系統(tǒng)的表觀遺傳學(xué)效應(yīng)[D]. 李凱.哈爾濱工業(yè)大學(xué) 2012
[5]孕期暴露不同劑量外源性雌激素己烯雌酚（DES）對(duì)仔小鼠睪丸有關(guān)生長(zhǎng)因子及其受體的影響[D]. 陶楨.汕頭大學(xué) 2007
[6]不同月齡大鼠睪丸微血管構(gòu)筑、eNOS表達(dá)及血睪屏障變化的研究[D]. 康友敏.河北師范大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3009321