目的雙酚A（BPA）為一種應(yīng)用廣泛的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,可通過多種途徑進(jìn)入人體,對神經(jīng)、生殖及免疫系統(tǒng)造成損傷。研究表明BPA可以誘導(dǎo)免疫細(xì)胞發(fā)生凋亡,進(jìn)而影響機(jī)體正常的免疫功能。睪丸巨噬細(xì)胞（TM）為一類存在于睪丸間質(zhì)中的免疫細(xì)胞,對維持整個睪丸內(nèi)環(huán)境起重要作用。本研究以大鼠TM細(xì)胞為靶細(xì)胞,以脂多糖（LPS）作為激活劑,建立BPA暴露模型,應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片技術(shù),探討B(tài)PA對TM細(xì)胞基因表達(dá)的影響。在此基礎(chǔ)上,分別建立BPA暴露體內(nèi)和體外模型,選擇BPA上調(diào)最明顯的TGF-β/SMAD信號通路,探討其在BPA誘導(dǎo)大鼠細(xì)胞凋亡中的作用,為進(jìn)一步研究BPA的免疫生殖毒作用機(jī)制提供理論依據(jù)。方法原代提取大鼠TM細(xì)胞,以50μg/ml LPS為激活劑,1 00μmol/L BPA作用于TM細(xì)胞24h,應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片技術(shù),篩選影響最為明顯的基因及信號通路;以50μg/ml LPS為激活劑,100μmol/L BPA作用TM細(xì)胞4h和24h,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測作用24h后TM細(xì)胞凋亡水平,應(yīng)用RT-PCR檢測作用4h后TM細(xì)胞TGF-β2、TGF-β3、SMAD6、SMAD7、BAX和BCL... 

【文章來源】：沈陽醫(yī)學(xué)院遼寧省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

BPA與激活劑基因表達(dá)差異(火山圖)

牐穡恚錚歟?蹋牐攏校寥徑荊玻矗瑁?τ昧魘較赴?崳?儀檢測細(xì)胞凋亡水平。結(jié)果顯示，與激活劑組比較，１〇〇?ｐｍｏｌ／ＬＢＰＡ組細(xì)胞早期??凋亡，晚期凋亡和總凋亡率均無明顯差異（圖３Ａ）。??應(yīng)用ＲＴ－ＰＣＲ檢測ＢＰＡ作用４ｈ對原代ＴＭ細(xì)胞和ＳＣＬ－２基因表達(dá)的??影響。結(jié)果表明，與對照組比較，激活劑組可使辦／Ｉ基因表達(dá)降低（Ｐ＜〇．〇５）。??與激活劑組比較，１〇〇?ｐｍｏｌ／Ｌ?ＢＰＡ可顯著上調(diào)及基因表達(dá)，同時下調(diào)ＳＣＸ－２??基因表達(dá)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（圖３Ｂ）。??ｔ?ＬＰＳ?ｔ?ＬＰＳ??名姓．．－’?￥?ｊ?￥?ｊｗ？．伊、?回、（１??ｉ；?—?ｉ?——２?——Ｉ?０獻(xiàn)?５２３?Ｍ，Ｓ??？?ｉｊｍｉ，?ｊｐ?－?＞＊?ｌＯｄｕｍｏｌｌ?ＨＰＡ??＜：〇－??，?ＢＰＡ?ｔ?ＢＰＡ?，?ＢＰＡ?￥?．??°１???〇１??１?°ｔ??ＩＥ?＇??？ｊ??Ｉ?Ｉ?Ｉ?ｌ?ｌ０＊?＊?ＫｖＭ??＆?■?＆?．?ｎ?？?．?ｖ?二?．ｙ／?＝??ｉ?ｉ?ｉ??丨?ＷＭＬ?＾?１，５－?＿??。?〇?〇＇＃?ｍ?：：：：：：！??斗＿

與激活劑組比較，１００?ｐｍｏｌ／Ｌ?ＢＰＡ作川細(xì)胞４ｈ可顯著下調(diào)ｒＧｆ＾?ｍＲＮＡ表達(dá)，??同時上調(diào)＊ＳＭ４Ｄ６ｍＲＮＡ表達(dá)（戶切仍），對爪尸－你、ＳＡ以Ｄ７基因表達(dá)無明顯??改變（圖４）。??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3009321