目的為實現(xiàn)轉(zhuǎn)基因甜菜GTSB77的標識管理,建立其品系特異性實時熒光聚合酶鏈式反應（PCR）檢測方法。方法針對GTSB77的3’端外源插入片段與甜菜基因組DNA之間的鄰接區(qū)序列設計引物和探針,建立GTSB77品系特異性實時熒光PCR檢測方法,并對該方法的特異性、靈敏度和重復性進行檢測。結果建立的GTSB77檢測方法特異性強,定量限（LOQ）為16拷貝,擴增效率為102%,重復性測試結果相對標準偏差（RSD）介于0. 21%～1. 66%之間。結論建立的實時熒光PCR方法可應用于GTSB77的鑒定檢測。 

【文章來源】：中國食品衛(wèi)生雜志. 2020,32(01)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

GTSB77外源插入片段示意圖

GTSB77特異性序列

圖2 GTSB77特異性序列品系特異性實時熒光PCR擴增反應體系(25μl):Premix Ex TaqTM12.5μl,ROX Reference Dye II 0.2μl,10μmol/L上下游引物各0.5μl,10μmol/L檢測探針0.5μl,DNA模板2μl,dd H2O8.3μl。反應程序:95℃預變性30 s;95℃變性5 s、60℃退火延伸34 s,40個循環(huán)，于60℃收集熒光信號。


本文編號：2992829