本文關(guān)鍵詞：焦?fàn)t逸散物致血液系統(tǒng)損傷的流行病學(xué)分析及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的焦?fàn)t逸散物(Coke oven emissions, COE)由煙煤在高溫乏氧的焦?fàn)t炭化室內(nèi)干餾產(chǎn)生,并在其他生產(chǎn)過程彌散到空氣中,是氣體、蒸氣和煙塵的統(tǒng)稱,包含多種致癌物或促癌物,廣泛存在于鋁、鋼、石墨、電氣、建筑等行業(yè)中。焦炭生產(chǎn)不但對(duì)環(huán)境特別是空氣造成污染,同時(shí)對(duì)職業(yè)暴露人群身體健康產(chǎn)生嚴(yán)重危害。慢性長(zhǎng)期性暴露于COE可導(dǎo)致焦?fàn)t工人產(chǎn)生呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)損傷以及結(jié)膜炎等。癌癥是COE暴露的主要問題,國(guó)際癌癥研究署(International Agency for Research on Cancer, I ARC)將COE確認(rèn)為1類致癌物,我國(guó)衛(wèi)生計(jì)生委等4部門將COE所致肺癌列為職業(yè)性腫瘤之一。在焦?fàn)t工人的健康監(jiān)護(hù)中,除COE的致癌效應(yīng)外,其對(duì)血液系統(tǒng)的損傷及其機(jī)制研究報(bào)道較少,是有待解決的職業(yè)衛(wèi)生問題。外源性化學(xué)物質(zhì)經(jīng)機(jī)體吸收后首先進(jìn)入血液并達(dá)到較高濃度,代謝過程中也必須依靠血液來(lái)運(yùn)輸,所以外周血中各種血細(xì)胞容易受到外源性化學(xué)物的損傷。血液毒性的結(jié)局主要有血細(xì)胞生成異常、血紅蛋白(Hemoglobin, HGB)異常和出血性疾病等。我們采用橫斷面的流行病學(xué)設(shè)計(jì),選擇焦?fàn)t工人為目標(biāo)人群,檢測(cè)作業(yè)環(huán)境中的COE濃度和工人COE內(nèi)暴露水平,對(duì)工人進(jìn)行血常規(guī)檢查,評(píng)估不同COE暴露水平與血液系統(tǒng)損傷的關(guān)系。在此基礎(chǔ)上,建立COE致人體血液細(xì)胞損傷的細(xì)胞模型,檢測(cè)COE對(duì)白細(xì)胞造成的細(xì)胞毒性、氧化損傷、遺傳物質(zhì)損傷、核轉(zhuǎn)錄因子-κB (Nuclear factor-κB, NF-κB)通路蛋白改變等,尋找COE致血液細(xì)胞損傷的關(guān)鍵通路,初步闡明COE致血液系統(tǒng)損傷的生物學(xué)機(jī)制,為進(jìn)一步完善COE的健康損害效應(yīng)評(píng)估,建立健全焦?fàn)t工人群的健康監(jiān)護(hù)方案提供重要依據(jù)。研究方法1.COE致血液系統(tǒng)損傷的流行病學(xué)分析選取山東省某焦化廠263名在職焦?fàn)t工人為COE暴露組,當(dāng)?shù)鼐嚯x焦化廠3公里以外的氧氣廠113名近一年來(lái)無(wú)明確腎臟病史的工人為對(duì)照組。對(duì)調(diào)查對(duì)象進(jìn)行統(tǒng)一的問卷調(diào)查、一般體格檢查、血常規(guī)檢查等。調(diào)查問卷主要包括個(gè)人基本情況、工作經(jīng)歷、吸煙飲酒情況、既往病史及現(xiàn)病史等。收集工人班后尿液30-50m1,采用高效液相色譜(High performance liquid chromatography, HPLC)法測(cè)定工人尿中1-羥基芘(1-hydroxypyrene,1-OHP)水平,超高效液相色譜(Ultra-high performance liquid chromatography, UPLC)串聯(lián)質(zhì)譜(Mass spectrometry, MS)方法測(cè)定工人尿中8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)水平,此外,采用HPLC法測(cè)定樣本中尿肌酐的濃度,用以校正1-OHP和8-OhdG的個(gè)體差異水平。2.COE致血液系統(tǒng)損傷的機(jī)制研究選取人急性早幼粒白血病細(xì)胞(Human acute promyelocytic leukemia cells, HL-60), COE有機(jī)提取物為染毒物質(zhì),染毒用培養(yǎng)基中胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)含量為5%。將COE有機(jī)提取物儲(chǔ)備液溶于染毒培養(yǎng)基中稀釋至終濃度為2.5、5、10、20μg/ml,1%DMSO為control組,染毒時(shí)間為24h與4d。采用CCK-8法、乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase, LDH)法和碘化丙啶(Propidium iodide, PI)/異硫氰酸熒光素(Fluorescein isothiocyanate, FITC)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)COE對(duì)細(xì)胞的毒性作用,2',7'-二氫二氯熒光素二乙酸酯(Dichlorofluorescein diacetate, DCFH-DA)熒光探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(Reactive oxygen species, ROS)水平的改變,硝基藍(lán)四氮唑染料法檢測(cè)細(xì)胞釋放的ROS水平的改變,單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(Single cell gel eleetrophoresis assay, SCGE)檢測(cè)細(xì)胞的脫氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid, DNA)損傷情況,Western-Blot法檢測(cè)NF-κB通路蛋白表達(dá)的改變情況。研究結(jié)果1.COE致血液系統(tǒng)損傷的流行病學(xué)分析焦化廠工作環(huán)境中的COE濃度是對(duì)照廠的5倍多,工作環(huán)境中的COE濃度與工作位置相關(guān)性顯著(P0.05)。與對(duì)照組工人相比,暴露組工人尿中1-OHP水平顯著升高(P0.05),在扣除了性別、年齡、體重指數(shù)(Body mass index, BMI)和吸煙飲酒的影響后,工人尿中1-OHP水平與是否接觸COE之間相關(guān)關(guān)系顯著(P0.05),提示其可以作為焦?fàn)t工人COE職業(yè)暴露的內(nèi)暴露水平。暴露組工人尿中8-OHdG的水平比對(duì)照組高51.3%(P0.05),工人尿中8-OHdG水平與1-OHP水平線性正相關(guān)關(guān)系顯著(P0.05),提示COE對(duì)職業(yè)暴露人群產(chǎn)生一定的DNA氧化損傷,使其患癌風(fēng)險(xiǎn)增高。血常規(guī)檢查中,暴露組工人的白細(xì)胞計(jì)數(shù)(White blood cell count, WBC)低于對(duì)照組,但差異不顯著(P0.05)。在暴露組工人中,WBC隨工人尿中8-OHdG水平的升高呈下降趨勢(shì),差異具有臨界顯著性(P=0.055)。2.COE致血液系統(tǒng)損傷的機(jī)制研究CCK-8、LDH、PI/FITC三種細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯示,COE染毒能夠?qū)θ梭w血液細(xì)胞造成一定的損傷。與control組相比,隨著染毒劑量的升高,細(xì)胞存活率降低(P0.05),細(xì)胞釋放的ROS水平升高(P0.05),細(xì)胞DNA損傷加重(P0.05),并且4d實(shí)驗(yàn)細(xì)胞損傷程度高于24h實(shí)驗(yàn),細(xì)胞NF-κB通路蛋白表達(dá)水平升高(P0.05)。與COE 2.5μg/ml劑量組相比,隨著染毒劑量的升高,24h實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞IκBα與NF-Kb p65蛋白表達(dá)下降(P0.05),磷酸化IκBα與磷酸化NF-Kb p65蛋白表達(dá)升高(P0.05)；4d實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞的兩組蛋白表達(dá)均升高(P0.05),有較好的劑量效應(yīng)關(guān)系。結(jié)論1.COE可以導(dǎo)致職業(yè)暴露人群的血液系統(tǒng)中血細(xì)胞數(shù)目的改變,這可能與DNA氧化損傷有關(guān)。2.在體外細(xì)胞學(xué)中發(fā)現(xiàn),COE能夠?qū)Π准?xì)胞HL-60造成一定程度的氧化損傷和遺傳物質(zhì)的損傷,隨著染毒劑量的增加損傷加重。3.COE導(dǎo)致白細(xì)胞的損傷改變可能與NF-κB通路活化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：焦?fàn)t逸散物 血常規(guī)檢查 HL-60細(xì)胞 細(xì)胞毒性 活性氧 DNA損傷 NF-κB
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R135
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 符號(hào)說(shuō)明13-16
• 前言16-20
• 第一部分 COE致血液系統(tǒng)損傷的流行病學(xué)分析20-30
• 資料與方法20-23
• 結(jié)果23-28
• 討論28-30
• 第二部分 COE致血液系統(tǒng)損傷的機(jī)制研究30-65
• 材料與方法30-41
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-61
• 討論61-65
• 結(jié)論65-66
• 附錄1：工人健康狀況調(diào)查問卷66-67
• 附錄2：調(diào)查內(nèi)容及相關(guān)說(shuō)明67-68
• 參考文獻(xiàn)68-75
• 致謝75-76
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文76-77
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表77

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張燕;李時(shí)恩;李春陽(yáng);徐玉寶;王麗;;焦化廠焦?fàn)t工血清中活性氧的檢測(cè)[J];河南外科學(xué)雜志;2008年05期

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本文編號(hào)：298288