近年來,隨著我國經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展,溫飽已經(jīng)不是關(guān)鍵,而食品安全逐漸成為人們?nèi)找骊P(guān)注的熱點,與此同時當(dāng)下社會中的食品衛(wèi)生檢測手段已無法達(dá)到目前時代進(jìn)步發(fā)展對技術(shù)的要求,人們對檢測手段的更新升級的期望已迫在眉睫,這使得更精確、更準(zhǔn)確的檢測技術(shù)成為一個熱門的研究課題。納米探針技術(shù)是日前比較火熱的生物傳感器前端技術(shù),在抗原抗體檢測、微生物識別以及基因工程方面均有廣泛的應(yīng)用。其操作尺度在納米級,可達(dá)到單細(xì)胞水平,大大提高了檢測的精確度。磁納米探針更是在微生物識別富集方面起到了重要的作用。ATP生物發(fā)光技術(shù)是檢測細(xì)菌數(shù)量的一種前沿方法,利用ATP存在的廣泛性及其特殊的發(fā)光機制可以對一些微生物進(jìn)行數(shù)量檢測,該方法大大縮短了檢測時間,能夠在二十分鐘內(nèi)獲取檢測結(jié)果,具有廣泛的應(yīng)用前景。本文提出了一種基于納米磁探針技術(shù)和ATP生物發(fā)光技術(shù)來檢測食品中大腸桿菌菌落數(shù)的生物傳感器系統(tǒng)。本設(shè)計利用表面修飾特殊抗體的納米磁球作為探針,通過抗原與抗體之間的特異性結(jié)合進(jìn)行捕獲大腸桿菌,最終通過外加磁場對目標(biāo)細(xì)菌富集。之后還是一種檢測ATP發(fā)光的實驗設(shè)備,反應(yīng)過程由單片機控制蠕動泵進(jìn)行試劑的自動加入,通過光電倍增管將采集... 

【文章來源】：山東師范大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

大腸桿菌結(jié)構(gòu)圖

作為可以檢測單個活細(xì)胞的新型微傳感器，具有體積小、實現(xiàn)對細(xì)胞無傷或微傷測等特性，因此被廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測等各大領(lǐng)域。磁納米粒子可場的作用上進(jìn)行富集，利用這一特征，在其表面結(jié)合特殊物質(zhì)的磁性納米粒子可細(xì)菌的分離提純及環(huán)境凈化。免疫磁珠（IMB）技術(shù)[18]在細(xì)菌的分離提純思路中開辟了一條新的道路。作為特體的的載體，結(jié)合了大腸桿菌的納米磁性探針在外加磁場力作用下機械地移動以離的目的。納米磁分離技術(shù)與其他方法的結(jié)合使用可以用來實現(xiàn)對食品中 E.co實時測量。本課題中，通過酶聯(lián)免疫反應(yīng)（生物素-鏈霉親和素反應(yīng)），將表面修飾鏈霉親和珠與生物素化的大腸桿菌抗體進(jìn)行結(jié)合制備出免疫磁性納米探針，作為特異性探抗原抗體反應(yīng)與大腸桿菌進(jìn)行捕獲結(jié)合產(chǎn)生免疫磁珠/抗體-大腸桿菌-納米金三免疫復(fù)合物，探針制備和捕獲過程如圖 2-1 所示。所有的磁性免疫復(fù)合物最終通分離架進(jìn)行富集。

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)光原理苷（ATP）作為直接功能物質(zhì)廣泛存在于一切活細(xì)胞中[19]，A分子及三個相連的磷酸基團(tuán)組成的核苷酸，其分子結(jié)構(gòu)式如圖細(xì)菌細(xì)胞包含的 ATP 的量是一定的，大約為 1-2fg[20]，并且 A鐘內(nèi)迅速分解，這個發(fā)現(xiàn)為利用 ATP 含量來檢測

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]6個品種油橄欖幼苗抗寒性及其與抗寒指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)度分析[J]. 令凡,焦健,楊北勝,馮震華,呂國敏,蘇天鳳,朱李春.  四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2016(02)
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碩士論文
[1]基于ATP生物發(fā)光的菌落總量快速檢測系統(tǒng)研究[D]. 劉通.山東師范大學(xué) 2015
[2]基于ATP生物發(fā)光的弱信號檢測技術(shù)[D]. 彭超.山東師范大學(xué) 2015
[3]便攜式菌落數(shù)量快速檢測系統(tǒng)[D]. 梅旦.山東師范大學(xué) 2015
[4]納米材料在快速檢測水體中大腸桿菌的應(yīng)用和研究[D]. 黃晶晶.華東師范大學(xué) 2010



本文編號：2966543