基于納米探針與ATP發(fā)光技術(shù)的大腸桿菌快速檢測(cè)方法研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-09 11:15
近年來(lái),隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展,溫飽已經(jīng)不是關(guān)鍵,而食品安全逐漸成為人們?nèi)找骊P(guān)注的熱點(diǎn),與此同時(shí)當(dāng)下社會(huì)中的食品衛(wèi)生檢測(cè)手段已無(wú)法達(dá)到目前時(shí)代進(jìn)步發(fā)展對(duì)技術(shù)的要求,人們對(duì)檢測(cè)手段的更新升級(jí)的期望已迫在眉睫,這使得更精確、更準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)成為一個(gè)熱門(mén)的研究課題。納米探針技術(shù)是日前比較火熱的生物傳感器前端技術(shù),在抗原抗體檢測(cè)、微生物識(shí)別以及基因工程方面均有廣泛的應(yīng)用。其操作尺度在納米級(jí),可達(dá)到單細(xì)胞水平,大大提高了檢測(cè)的精確度。磁納米探針更是在微生物識(shí)別富集方面起到了重要的作用。ATP生物發(fā)光技術(shù)是檢測(cè)細(xì)菌數(shù)量的一種前沿方法,利用ATP存在的廣泛性及其特殊的發(fā)光機(jī)制可以對(duì)一些微生物進(jìn)行數(shù)量檢測(cè),該方法大大縮短了檢測(cè)時(shí)間,能夠在二十分鐘內(nèi)獲取檢測(cè)結(jié)果,具有廣泛的應(yīng)用前景。本文提出了一種基于納米磁探針技術(shù)和ATP生物發(fā)光技術(shù)來(lái)檢測(cè)食品中大腸桿菌菌落數(shù)的生物傳感器系統(tǒng)。本設(shè)計(jì)利用表面修飾特殊抗體的納米磁球作為探針,通過(guò)抗原與抗體之間的特異性結(jié)合進(jìn)行捕獲大腸桿菌,最終通過(guò)外加磁場(chǎng)對(duì)目標(biāo)細(xì)菌富集。之后還是一種檢測(cè)ATP發(fā)光的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,反應(yīng)過(guò)程由單片機(jī)控制蠕動(dòng)泵進(jìn)行試劑的自動(dòng)加入,通過(guò)光電倍增管將采集...
【文章來(lái)源】:山東師范大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
大腸桿菌結(jié)構(gòu)圖
作為可以檢測(cè)單個(gè)活細(xì)胞的新型微傳感器,具有體積小、實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞無(wú)傷或微傷測(cè)等特性,因此被廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等各大領(lǐng)域。磁納米粒子可場(chǎng)的作用上進(jìn)行富集,利用這一特征,在其表面結(jié)合特殊物質(zhì)的磁性納米粒子可細(xì)菌的分離提純及環(huán)境凈化。免疫磁珠(IMB)技術(shù)[18]在細(xì)菌的分離提純思路中開(kāi)辟了一條新的道路。作為特體的的載體,結(jié)合了大腸桿菌的納米磁性探針在外加磁場(chǎng)力作用下機(jī)械地移動(dòng)以離的目的。納米磁分離技術(shù)與其他方法的結(jié)合使用可以用來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)食品中 E.co實(shí)時(shí)測(cè)量。本課題中,通過(guò)酶聯(lián)免疫反應(yīng)(生物素-鏈霉親和素反應(yīng)),將表面修飾鏈霉親和珠與生物素化的大腸桿菌抗體進(jìn)行結(jié)合制備出免疫磁性納米探針,作為特異性探抗原抗體反應(yīng)與大腸桿菌進(jìn)行捕獲結(jié)合產(chǎn)生免疫磁珠/抗體-大腸桿菌-納米金三免疫復(fù)合物,探針制備和捕獲過(guò)程如圖 2-1 所示。所有的磁性免疫復(fù)合物最終通分離架進(jìn)行富集。
山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)光原理苷(ATP)作為直接功能物質(zhì)廣泛存在于一切活細(xì)胞中[19],A分子及三個(gè)相連的磷酸基團(tuán)組成的核苷酸,其分子結(jié)構(gòu)式如圖細(xì)菌細(xì)胞包含的 ATP 的量是一定的,大約為 1-2fg[20],并且 A鐘內(nèi)迅速分解,這個(gè)發(fā)現(xiàn)為利用 ATP 含量來(lái)檢測(cè)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]6個(gè)品種油橄欖幼苗抗寒性及其與抗寒指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)度分析[J]. 令凡,焦健,楊北勝,馮震華,呂國(guó)敏,蘇天鳳,朱李春. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]基于溫度參數(shù)的經(jīng)驗(yàn)密度模式修正方法[J]. 李勰,唐歌實(shí),李正,李翠蘭,劉舒蒔. 載人航天. 2015(01)
[3]淺析基于AT89C51矩陣鍵盤(pán)檢測(cè)的編程技巧[J]. 黃麗英,章敏. 科技創(chuàng)業(yè)家. 2013(02)
[4]線反轉(zhuǎn)法矩陣鍵盤(pán)程序設(shè)計(jì)[J]. 黃忠良. 電腦學(xué)習(xí). 2011(01)
[5]熒光分光光度計(jì)測(cè)定保健食品總抗氧化能力[J]. 趙建,劉璇,文鏡. 食品科學(xué). 2010(22)
[6]食品中大腸桿菌檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]. 陳玲霞,丁洪強(qiáng). 疾病監(jiān)測(cè)與控制. 2010(06)
[7]微弱熒光信號(hào)檢測(cè)電路抗噪聲能力對(duì)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀測(cè)量精度的影響[J]. 王慧鋒,秦添. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(04)
[8]一種帶紋波補(bǔ)償?shù)母呔萈MT直流高壓開(kāi)關(guān)電源[J]. 范金友,孟爽,莊其仁. 光電子技術(shù). 2008(01)
[9]基于ADuC834單片機(jī)的高精度電壓監(jiān)測(cè)系統(tǒng)[J]. 羅云,孫春生,王昌平. 儀表技術(shù)與傳感器. 2007(10)
[10]ICL7650-CMOS斬波集成運(yùn)放簡(jiǎn)介及應(yīng)用[J]. 文亞鳳,趙蓮清,劉向軍. 現(xiàn)代電子技術(shù). 2006(12)
碩士論文
[1]基于ATP生物發(fā)光的菌落總量快速檢測(cè)系統(tǒng)研究[D]. 劉通.山東師范大學(xué) 2015
[2]基于ATP生物發(fā)光的弱信號(hào)檢測(cè)技術(shù)[D]. 彭超.山東師范大學(xué) 2015
[3]便攜式菌落數(shù)量快速檢測(cè)系統(tǒng)[D]. 梅旦.山東師范大學(xué) 2015
[4]納米材料在快速檢測(cè)水體中大腸桿菌的應(yīng)用和研究[D]. 黃晶晶.華東師范大學(xué) 2010
本文編號(hào):2966543
【文章來(lái)源】:山東師范大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
大腸桿菌結(jié)構(gòu)圖
作為可以檢測(cè)單個(gè)活細(xì)胞的新型微傳感器,具有體積小、實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞無(wú)傷或微傷測(cè)等特性,因此被廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等各大領(lǐng)域。磁納米粒子可場(chǎng)的作用上進(jìn)行富集,利用這一特征,在其表面結(jié)合特殊物質(zhì)的磁性納米粒子可細(xì)菌的分離提純及環(huán)境凈化。免疫磁珠(IMB)技術(shù)[18]在細(xì)菌的分離提純思路中開(kāi)辟了一條新的道路。作為特體的的載體,結(jié)合了大腸桿菌的納米磁性探針在外加磁場(chǎng)力作用下機(jī)械地移動(dòng)以離的目的。納米磁分離技術(shù)與其他方法的結(jié)合使用可以用來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)食品中 E.co實(shí)時(shí)測(cè)量。本課題中,通過(guò)酶聯(lián)免疫反應(yīng)(生物素-鏈霉親和素反應(yīng)),將表面修飾鏈霉親和珠與生物素化的大腸桿菌抗體進(jìn)行結(jié)合制備出免疫磁性納米探針,作為特異性探抗原抗體反應(yīng)與大腸桿菌進(jìn)行捕獲結(jié)合產(chǎn)生免疫磁珠/抗體-大腸桿菌-納米金三免疫復(fù)合物,探針制備和捕獲過(guò)程如圖 2-1 所示。所有的磁性免疫復(fù)合物最終通分離架進(jìn)行富集。
山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文發(fā)光原理苷(ATP)作為直接功能物質(zhì)廣泛存在于一切活細(xì)胞中[19],A分子及三個(gè)相連的磷酸基團(tuán)組成的核苷酸,其分子結(jié)構(gòu)式如圖細(xì)菌細(xì)胞包含的 ATP 的量是一定的,大約為 1-2fg[20],并且 A鐘內(nèi)迅速分解,這個(gè)發(fā)現(xiàn)為利用 ATP 含量來(lái)檢測(cè)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]6個(gè)品種油橄欖幼苗抗寒性及其與抗寒指標(biāo)的灰色關(guān)聯(lián)度分析[J]. 令凡,焦健,楊北勝,馮震華,呂國(guó)敏,蘇天鳳,朱李春. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(02)
[2]基于溫度參數(shù)的經(jīng)驗(yàn)密度模式修正方法[J]. 李勰,唐歌實(shí),李正,李翠蘭,劉舒蒔. 載人航天. 2015(01)
[3]淺析基于AT89C51矩陣鍵盤(pán)檢測(cè)的編程技巧[J]. 黃麗英,章敏. 科技創(chuàng)業(yè)家. 2013(02)
[4]線反轉(zhuǎn)法矩陣鍵盤(pán)程序設(shè)計(jì)[J]. 黃忠良. 電腦學(xué)習(xí). 2011(01)
[5]熒光分光光度計(jì)測(cè)定保健食品總抗氧化能力[J]. 趙建,劉璇,文鏡. 食品科學(xué). 2010(22)
[6]食品中大腸桿菌檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J]. 陳玲霞,丁洪強(qiáng). 疾病監(jiān)測(cè)與控制. 2010(06)
[7]微弱熒光信號(hào)檢測(cè)電路抗噪聲能力對(duì)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀測(cè)量精度的影響[J]. 王慧鋒,秦添. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(04)
[8]一種帶紋波補(bǔ)償?shù)母呔萈MT直流高壓開(kāi)關(guān)電源[J]. 范金友,孟爽,莊其仁. 光電子技術(shù). 2008(01)
[9]基于ADuC834單片機(jī)的高精度電壓監(jiān)測(cè)系統(tǒng)[J]. 羅云,孫春生,王昌平. 儀表技術(shù)與傳感器. 2007(10)
[10]ICL7650-CMOS斬波集成運(yùn)放簡(jiǎn)介及應(yīng)用[J]. 文亞鳳,趙蓮清,劉向軍. 現(xiàn)代電子技術(shù). 2006(12)
碩士論文
[1]基于ATP生物發(fā)光的菌落總量快速檢測(cè)系統(tǒng)研究[D]. 劉通.山東師范大學(xué) 2015
[2]基于ATP生物發(fā)光的弱信號(hào)檢測(cè)技術(shù)[D]. 彭超.山東師范大學(xué) 2015
[3]便攜式菌落數(shù)量快速檢測(cè)系統(tǒng)[D]. 梅旦.山東師范大學(xué) 2015
[4]納米材料在快速檢測(cè)水體中大腸桿菌的應(yīng)用和研究[D]. 黃晶晶.華東師范大學(xué) 2010
本文編號(hào):2966543
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