畜牧養(yǎng)殖業(yè)中抗生素的濫用導(dǎo)致食品原料中食源耐藥菌的污染問(wèn)題日趨嚴(yán)重。有效的檢測(cè)方法對(duì)預(yù)防和控制食源耐藥菌感染和傳播,保證人類健康、防止經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。現(xiàn)有的食源致病菌的檢測(cè)方法存在著檢測(cè)周期長(zhǎng)、不能區(qū)分活死菌、儀器龐大、價(jià)格昂貴等不足。電化學(xué)傳感器技術(shù)以其選擇性好、靈敏度高、成本低廉和檢測(cè)迅速等優(yōu)勢(shì),為有效檢測(cè)方法的構(gòu)建提供了技術(shù)支撐。本文基于細(xì)菌能量代謝過(guò)程中的電子傳遞理論,引入刃天青作為氧化還原探針,研究了刃天青在食源大腸桿菌活體中的電化學(xué)特性,旨在通過(guò)活體傳感電化學(xué)信號(hào)的獲取,為構(gòu)建快速、便攜、低能耗和低成本的食源細(xì)菌耐藥性快速檢測(cè)電化學(xué)方法提供理論依據(jù)。具體結(jié)果如下:（1）優(yōu)化了刃天青在緩沖體系中電化學(xué)特性的測(cè)定條件。采用循環(huán)伏安法（CV）和控制變量法,研究了三電極體系中的最佳工作電極和參比電極,研究了不同緩沖體系（磷酸鹽緩沖溶液（PBS）和伯瑞坦-羅賓森緩沖溶液（BR））和不同pH值下BR緩沖液下刃天青的電化學(xué)特性,選擇了合適的掃速,并在此基礎(chǔ)上采用CV、差分脈沖伏安法（DPV）和方波伏安法（SWV）三種電化學(xué)方法測(cè)量了不同濃度刃天青的電化學(xué)特性。結(jié)果表明,工作電極為玻... 

【文章來(lái)源】：中南林業(yè)科技大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．４恒電位儀電路示意圖??

Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｃｙｃｌｉｃ?ｖｏｌｔａｍｍｏｇｒａｍｓ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ｒｅｓａｚｕｒｉｎ?（０．１?ｍｍｏｌ／Ｌ）?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｗｏｒｋｉｎｇ??ｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ??圖２．３中反應(yīng)出Ａｇ／ＡｇＣｌ電極的峰電流信號(hào)強(qiáng)于飽和甘萊電極，其氧化峰電??流電位比飽和甘汞電極高出一倍左右，因而在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究中可以獲得更顯著??的電化學(xué)信號(hào)。???■甘親電扱??－８?－?＼??，０－??－０．４?－０．２?０．０??Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ（Ｖ）??圖２．３不同參比電極的刃天青ＣＶ?（ｌｍｍｏｌ／Ｌ）圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｃｙｃｌｉｃ?ｖｏｌｔａｍｍｏｇｒａｍｓ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ｒｅｓａｚｕｒｉｎ?（１?ｍｍｏｌ／Ｌ）?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ??ｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ??２．３．２緩沖溶液的選擇及ｐＨ的影響??在電化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，緩沖液起到了穩(wěn)定體系ｐＨ的作用，也即是調(diào)節(jié)體系中??Ｈ＋的濃度，使酶或者其他物質(zhì)在溶液中有一個(gè)穩(wěn)定的ｐＨ環(huán)境。所以選擇適合的??緩沖溶液對(duì)電化學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)尤為重要。本實(shí)驗(yàn)選用常用的緩沖液：ＰＢＳ緩沖液??和ＢＲ緩沖液，結(jié)果如圖２．４。而隨著微生物繁殖增加，代謝產(chǎn)物累積加加快，??溶液的ｐＨ也會(huì)呈現(xiàn)一定的變化，為了了解這一趨勢(shì)，本實(shí)驗(yàn)做了緩沖溶液不同??ｐＨ值的變化趨勢(shì)曲線

?０．０??Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ（Ｖ）??圖２．２不同工作電極的刃天青（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）?ＣＶ圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２．２?Ｃｙｃｌｉｃ?ｖｏｌｔａｍｍｏｇｒａｍｓ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ｒｅｓａｚｕｒｉｎ?（０．１?ｍｍｏｌ／Ｌ）?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｗｏｒｋｉｎｇ??ｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ??圖２．３中反應(yīng)出Ａｇ／ＡｇＣｌ電極的峰電流信號(hào)強(qiáng)于飽和甘萊電極，其氧化峰電??流電位比飽和甘汞電極高出一倍左右，因而在后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究中可以獲得更顯著??的電化學(xué)信號(hào)。???■甘親電扱??－８?－?＼??，０－??－０．４?－０．２?０．０??Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ（Ｖ）??圖２．３不同參比電極的刃天青ＣＶ?（ｌｍｍｏｌ／Ｌ）圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２．３?Ｃｙｃｌｉｃ?ｖｏｌｔａｍｍｏｇｒａｍｓ?ｃｕｒｖｅｓ?ｏｆ?ｒｅｓａｚｕｒｉｎ?（１?ｍｍｏｌ／Ｌ）?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ??ｅｌｅｃｔｒｏｄｅｓ??２．３．２緩沖溶液的選擇及ｐＨ的影響??在電化學(xué)實(shí)驗(yàn)中，緩沖液起到了穩(wěn)定體系ｐＨ的作用，也即是調(diào)節(jié)體系中??Ｈ＋的濃度，使酶或者其他物質(zhì)在溶液中有一個(gè)穩(wěn)定的ｐＨ環(huán)境。所以選擇適合的??緩沖溶液對(duì)電化學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)尤為重要。本實(shí)驗(yàn)選用常用的緩沖液：ＰＢＳ緩沖液??和ＢＲ緩沖液，結(jié)果如圖２．４。而隨著微生物繁殖增加，代謝產(chǎn)物累積加加快，??溶液的ｐＨ也會(huì)呈現(xiàn)一定的變化，為了了解這一趨勢(shì)，本實(shí)驗(yàn)做了緩沖溶液不同??ｐＨ值的變化趨勢(shì)曲線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]淺談食源性疾病的傳播和耐藥性[J]. 付燕燕,張茂俊.  食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào). 2017(07)
[2]大腸桿菌耐藥現(xiàn)狀的嚴(yán)峻性[J]. 高海濤,韓俊麗,關(guān)道明.  生命科學(xué). 2017(05)
[3]關(guān)于我國(guó)畜牧業(yè)生產(chǎn)中限制抗生素的使用問(wèn)題[J]. 萬(wàn)遂如.  獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2017(05)
[4]MA120微生物鑒定/藥敏分析系統(tǒng)在臨床微生物鑒定與藥物敏感性測(cè)定中的效果評(píng)價(jià)[J]. 張鞠玲,張成龍,賈天野,王歡,袁媛,龐君麗,陳素明,張樹(shù)永,鮑春梅,曲芬.  傳染病信息. 2016(05)
[5]細(xì)菌快速藥敏試驗(yàn)方法研究進(jìn)展[J]. 李珍,李從榮.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床. 2016(08)
[6]奶牛乳房炎大腸桿菌刃天青微量板快速診斷及藥敏試驗(yàn)[J]. 王娟,李洋洋,徐光宇,史蕾,孫懷昌.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2016(02)
[7]奶牛乳房炎鏈球菌的刃天青微量板快速診斷與藥敏試驗(yàn)[J]. 李洋洋,李光亞,包利平,史蕾,王娟,孫懷昌.  中國(guó)奶牛. 2016(01)
[8]奶牛乳腺炎葡萄球菌刃天青微量板快速診斷方法的建立與應(yīng)用[J]. 史蕾,盧會(huì)鵬,李洋洋,徐佳,劉曉娟,張?chǎng)斡?夏曉莉,孫懷昌.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2015(12)
[9]以氧化還原探針為信號(hào)標(biāo)簽的多組分電化學(xué)傳感器的研究進(jìn)展[J]. 朱強(qiáng),唐榮霞,林瀟,田雪.  化學(xué)傳感器. 2015 (02)
[10]莫西沙星耐藥的艱難梭菌多重聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)和基因分型[J]. 黃麗清,肖克林,周天祥,王中興,孔繁榮.  中華傳染病雜志. 2015 (05)

博士論文
[1]樟樹(shù)葉中木脂素提取分離及其生物活性研究[D]. 周海旭.中南林業(yè)科技大學(xué) 2017
[2]細(xì)菌跨膜電子傳遞過(guò)程的環(huán)境功能和電化學(xué)調(diào)控[D]. 李道波.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2014
[3]多重分子信標(biāo)探針芯片構(gòu)建與結(jié)核桿菌耐藥基因多重突變位點(diǎn)檢測(cè)研究[D]. 陳慶海.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
[4]掃描電化學(xué)顯微鏡測(cè)定單細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶和納米電極的應(yīng)用[D]. 王曉蕾.山東大學(xué) 2003

碩士論文
[1]雞、豬、奶牛源大腸桿菌的耐藥性與其I類整合子和質(zhì)粒相關(guān)性研究[D]. 陸光武.揚(yáng)州大學(xué) 2016
[2]大腸桿菌烷基過(guò)氧化氫還原酶（AhpF-AhpC）的結(jié)構(gòu)與功能研究和大腸桿菌YcjY蛋白的結(jié)構(gòu)與功能研究[D]. 陳超飛.安徽大學(xué) 2015
[3]基于DNA分子開(kāi)關(guān)的核酸適體生物傳感器的研究[D]. 夏云峰.上海師范大學(xué) 2013
[4]上海地區(qū)豬源大腸桿菌和沙門氏菌的耐藥性及耐藥基因的研究[D]. 郭士博.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]基于HRP和納米材料的凝血酶電化學(xué)適體傳感器的研究[D]. 趙潔.湖南師范大學(xué) 2011
[6]牛源大腸桿菌耐藥性及耐藥機(jī)制研究[D]. 王宏.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[7]青霉素類抗生素快速檢測(cè)方法的研究[D]. 陳碧.湖南師范大學(xué) 2010
[8]CALB脂肪酶在畢赤酵母中的表達(dá)及酶學(xué)性質(zhì)研究[D]. 朱艷飛.華南理工大學(xué) 2010
[9]電化學(xué)活化玻碳電極及其在電分析中的應(yīng)用[D]. 胡坤.廈門大學(xué) 2007
[10]內(nèi)蒙地區(qū)奶牛環(huán)境性乳房炎主要病原菌的分離鑒定及克雷伯氏菌的基因分型[D]. 海巖.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



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