有機(jī)致癌物自身通常缺乏生物反應(yīng)性,需要經(jīng)過代謝活化才具有致突變和致癌性�；瘜W(xué)物的致突變性篩查通常采用體外細(xì)胞遺傳毒理學(xué)試驗(yàn),然而,由于常規(guī)細(xì)胞缺少生物轉(zhuǎn)化酶活性,易致假陰性結(jié)果。采用體外代謝活化系統(tǒng)（如大鼠肝臟S9混合物）可增加致突變物的檢出率。然而,某些重要的代謝酶在肝細(xì)胞中并不表達(dá)或者表達(dá)量不受常用誘導(dǎo)劑（如Aroclor 1254）影響,導(dǎo)致依賴相應(yīng)酶活化的前致突變物在添加S9混合物的實(shí)驗(yàn)體系中也表現(xiàn)為陰性結(jié)果。采用重組表達(dá)特定細(xì)胞色素P450（cytochrome P450,CYP）酶的細(xì)胞系作為遺傳毒性研究的實(shí)驗(yàn)體系可明顯增加前致突變物的檢出率。CYP2E1是活化某些親脂性小分子化合物的重要代謝酶,表達(dá)該酶的各種細(xì)胞模型已被用于研究相關(guān)前致突變物的遺傳毒作用,然而關(guān)于細(xì)胞內(nèi)表達(dá)代謝酶的實(shí)驗(yàn)體系與細(xì)胞外添加S9混合物的活化體系的比較優(yōu)勢尚未見報(bào)道。N-二乙基亞硝胺（NDEA）是重要的食品污染物及肝臟誘癌劑,在缺乏代謝酶活性的實(shí)驗(yàn)體系中遺傳毒性試驗(yàn)結(jié)果為陰性,只有在添加S9混合物并采用高濃度處理才表現(xiàn)致突變作用。有研究提示其可能經(jīng)CYP2E1酶代謝活化。本研究采用表達(dá)人CYP2E... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：103 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１?Ｖ７９－Ｍｚ、Ｖ７９衍生細(xì)胞和Ｌ－０２細(xì)胞系中ＣＹＰ２Ｅ１酶的表達(dá)??

ｌｉｖｅｒ?Ｓ９?ｍｉｘ??１．３．５．４?ＤＭＳＯ?對?Ｖ７９－ｈＣＹＰ２Ｅｌ－ｈＳＵＬＴｌＡＩ?細(xì)胞?ＣＹＰ２Ｅ１?酶表達(dá)量的影響??由圖１?－７可知，與陰性對照組相比，ＤＭＳＯ在０．０５％？０．２％的范圍內(nèi)不影響??Ｖ７９－ｈＣＹＰ２Ｅｌ－ｈＳＵＬＴｌＡ丨細(xì)胞屮ＣＹＰ２Ｅ１酶表達(dá)水、卜，統(tǒng)計(jì)學(xué)無差異（ｐ?＞?０．０５）。??４３??

分細(xì)胞沖付基因發(fā)生自發(fā)突變；陽性對照組ＮＤＥＡ的平皿中克隆數(shù)顯著增多，??提示了?ＮＤＥＡ加入后發(fā)生基因突變獲得６－ＴＧ抗性的細(xì)胞數(shù)目增加，（見??圖２－２Ａ、Ｂ）?，?ＰＣＢ２８和ＰＣＢ５２組的突變克隆圖片與陽性對照類似。??Ｄ?ＡＭ??曹??Ａ?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｂ?ＮＤＥＡ?（２０〇ｎｍｏｌ／Ｌ）??圖?２－２?６－ＴＧ?抗性?Ｖ７９－ｈＣＹＰ２Ｅｌ－ｈＳＵＬＴｌＡｌ?突變克隆??Ｆｉｇ．?２－２?６－Ｔｈｉｏｇｕａｎｉｎｅ?（ＴＧ）－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ?Ｖ７９－ｈＣＹＰ２Ｅｌ－ｈＳＵＬＴｌ?Ａ１?ｍｕｔａｎｔｓ??２．３．２．２篩選突變克隆獲取沖／７基因ＰＣＲ產(chǎn)物??陰性對照組、ＰＣＢ?２８（?１０?ｐｍｏｌ／Ｌ、２０?ｐｍｏｌ／Ｌ、４０?｜ｉｍｏｌ／Ｌ）、ＰＣＢ?５２（８０?ｐｍｏｌ／Ｌ）??及陽性對照ＮＤＥＡ?（２００卩ｍｏｌ／Ｌ）組隨機(jī)選擇Ｈ）個(gè)突變克隆，通過細(xì)胞傳代擴(kuò)??大培養(yǎng)后，提取細(xì)胞總ＲＮＡ，逆轉(zhuǎn)錄成ｃＤＮＡ，并通過ＰＣＲ對ｃＤＮＡ進(jìn)行／／ｐｒ；??基因片段的擴(kuò)增，通過瓊脂糖電泳鑒定ＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物，如圖２－３?（列出部分產(chǎn)物??的電泳結(jié)果），部分克�。悖模危翢oＰＣＲ擴(kuò)增產(chǎn)物。??６５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]某典型電子垃圾拆解區(qū)大氣中氯化石蠟和多氯聯(lián)苯的污染特征[J]. 陳滿英,路風(fēng)輝,劉瓊,陳潔.  再生資源與循環(huán)經(jīng)濟(jì). 2018(08)
[2]我國飲用水中亞硝胺類消毒副產(chǎn)物暴露水平的Meta分析[J]. 王海燕,石修權(quán),覃明,董蕾,李童.  遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(03)
[3]天津?yàn)I海新區(qū)大氣中多氯聯(lián)苯的季節(jié)分布與氣粒分配[J]. 李志勇,趙鵬,張敬紅.  中國環(huán)境科學(xué). 2015(08)
[4]北京市大氣中多氯聯(lián)苯的污染水平和分布特征[J]. 洪維哲,李英明,張林楠,鮑佳,王璞,朱超飛,張慶華.  環(huán)境化學(xué). 2015(03)
[5]珠江三角洲地區(qū)大氣和土壤中多氯聯(lián)苯分布特征研究[J]. 迭慶杞,聶志強(qiáng),何潔,劉鋒,黃啟飛,田書磊.  環(huán)境工程技術(shù)學(xué)報(bào). 2014(06)
[6]杭州市冬季大氣氣溶膠PM2.5中二惡英和多氯聯(lián)苯的污染特征[J]. 李沐霏,劉勁松,周欣,朱國華,鞏宏平,陳貝,王玲,孫軍軍.  色譜. 2014(09)
[7]深圳市大氣多氯聯(lián)苯的分布特征與來源[J]. 劉國卿,劉德全,李志剛,周志華,李軍,張鴻.  深圳大學(xué)學(xué)報(bào)(理工版). 2014(04)
[8]電子垃圾拆解區(qū)多氯聯(lián)苯暴露對新生兒生長發(fā)育的影響[J]. 陸紹琦,徐錫金,劉俊曉,邱少汕,李斌,張?jiān)×?霍霞.  汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(03)
[9]某電子垃圾拆解地鯽魚和雞蛋中二噁英和多氯聯(lián)苯的污染狀況研究[J]. 宋楊,吳南翔,韓見龍,沈海濤,譚玉鳳,丁剛強(qiáng),項(xiàng)菊香,陶核,金順亮.  環(huán)境與健康雜志. 2011(04)
[10]深圳市大氣中多氯聯(lián)苯污染水平[J]. 王春雷,張建清,楊大成,彭朝瓊,蔣友勝,周健,黃海燕,何龍,招康賽.  環(huán)境化學(xué). 2010(05)

碩士論文
[1]市售動(dòng)物性腌制食品（臘腸和咸魚）中揮發(fā)性亞硝胺的調(diào)查研究[D]. 余衛(wèi)軍.南方醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號：2949233