目的:以改變飲食中的蛋白質(zhì)濃度作為干預(yù)因素,長(zhǎng)期飼養(yǎng)中老年小鼠,通過(guò)檢測(cè)各組小鼠肝臟和結(jié)腸的組織學(xué)改變,以及脾臟淋巴細(xì)胞含量的變化情況,來(lái)探究低蛋白飲食對(duì)中老年小鼠非特異性炎癥反應(yīng)的影響,并簡(jiǎn)要探究這一過(guò)程可能的機(jī)制。方法:將14月齡健康雌性KM小鼠隨機(jī)分為四組,分別為對(duì)照組、低蛋白組、高蛋白組、高蛋白+雷帕霉素組。對(duì)照組給予標(biāo)準(zhǔn)小鼠飼料,低蛋白組給予低蛋白飲食,高蛋白組給予高蛋白飲食,高蛋白+雷帕霉素組在給予高蛋白飲食的同時(shí)隔日腹腔注射雷帕霉素（2mg/Kg）。實(shí)驗(yàn)時(shí)間為三個(gè)月,實(shí)驗(yàn)期間所有小鼠自由進(jìn)食進(jìn)水。實(shí)驗(yàn)三個(gè)月末使用頸椎脫臼法處死小鼠,取小鼠的肝臟、結(jié)腸和脾臟組織。使用HE染色觀(guān)察各組中老年小鼠肝臟和結(jié)腸的組織學(xué)改變,使用免疫組織化學(xué)檢測(cè)法檢測(cè)肝臟組織CD68和mTOR蛋白的表達(dá)情況,使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)脾臟CD4⁺T、CD8⁺T細(xì)胞百分比,使用免疫印跡法檢測(cè)肝臟mTOR蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:1.中老年小鼠肝組織中肝小葉結(jié)構(gòu)依然完整,但肝細(xì)胞胞漿疏松淡染,肝竇廣泛擴(kuò)張,長(zhǎng)期低蛋白飲食可以減輕中老年小鼠肝臟的以上改變,高蛋白飲食作用相反... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

小鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)（HE染色，400×，bar=500μm）A為Ctrl組，B為L(zhǎng)PG組，C為HPG組，D為HPRG組

圖 2 小鼠肝臟 CD68 分子的表達(dá)（免疫組織化學(xué)染色，400×，bar=500μm）A 為 Ctrl 組，為 LPG 組，C 為 HPG 組，D 為 HPRG 組，E 為統(tǒng)計(jì)圖：*代表與 Ctrl 組相比差異顯著（p＜0.05）#代表與 HPRG 組相比差異顯著（p＜0.05）。2.1.3 結(jié)腸組織學(xué)觀(guān)察光鏡下可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)的中老年小鼠結(jié)腸組織中腸粘膜改變，隱窩變淺，個(gè)別部位甚至有上皮細(xì)胞的缺失，杯狀細(xì)胞數(shù)量增多（圖 3A）；長(zhǎng)期低蛋白飲食能夠減輕中老年小鼠結(jié)腸的時(shí)間相關(guān)性改變（圖 3B）；長(zhǎng)期高蛋白飲食會(huì)加重中老年小鼠結(jié)腸的以上改變，視野中固有層淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)明顯（圖 3C）；高蛋白飲食喂養(yǎng)的小鼠同時(shí)給予雷帕霉素腹腔注射后結(jié)腸的以上時(shí)間相關(guān)性改變會(huì)明顯減輕（圖 3D）

12圖 3 小鼠結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)（HE 染色，左側(cè)為 200×，右側(cè)為 400×，bar=500μm） A1、A2為Ctrl 組，B1、B2為 LPG 組，C1、C2為 HPG 組，D1、D2為 HPRG 組。2.2 脾臟 T 淋巴細(xì)胞含量改變2.2.1 脾臟 CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比改變采用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)脾臟 CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比，發(fā)現(xiàn)中老年小鼠的脾臟CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯偏低（圖 4A）；長(zhǎng)期給予低蛋白飲食后，發(fā)現(xiàn) LPG 組小鼠脾臟 CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比有所回升（圖 4B）；長(zhǎng)期高蛋白飲食對(duì)小鼠的 CD4+

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Effect of ageing on colonic mucosal regeneration[J]. Ferenc Sipos,Katalin Leiszter,Zsolt Tulassay.  World Journal of Gastroenterology. 2011(25)



本文編號(hào)：2930641