目的比較生菜表面污染隱孢子蟲卵囊的洗脫與檢測方法。方法對生菜表面人工"種植"的隱孢子蟲卵囊的洗脫次數(shù)、振蕩方式、振蕩頻率、振蕩時間、洗脫液種類等進(jìn)行比較,以及3種商業(yè)化DNA提取試劑盒提取水溶液中隱孢子蟲卵囊DNA的效果進(jìn)行比較。結(jié)果采取往返振蕩,振蕩頻率為100次/min,振蕩時間為1 h,洗脫液采用1%Alconox^○R時,其總體回收率最高,達(dá)71.40%。不同DNA試劑盒比較顯示,土壤DNA提取試劑盒與糞便DNA提取試劑盒較組織DNA提取試劑盒提取水溶液中隱孢子蟲卵囊DNA的質(zhì)與量均高。結(jié)論本研究建立了巢式PCR檢測生菜表面微小隱孢子蟲卵囊的檢測方法,為蔬菜的食品安全提供新的技術(shù)方法。 

【文章來源】：中國人獸共患病學(xué)報. 2020年03期 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
        1.1.1 生菜樣品來源
        1.1.2 隱孢子蟲卵囊
        1.1.3 洗滌溶液種類
    1.2 卵囊計(jì)數(shù)及種植方法
    1.3 卵囊的洗脫方法優(yōu)化
        1.3.1 洗脫次數(shù)的比較
        1.3.2 振蕩方式的優(yōu)化
        1.3.3 振蕩頻率的優(yōu)化
        1.3.4 振蕩時間的優(yōu)化
        1.3.5 洗滌液的優(yōu)化
    1.4 洗脫液的回收與卵囊計(jì)數(shù)
    1.5 洗脫液中卵囊DNA提取的優(yōu)化
        1.5.1 卵囊DNA的提取
        1.5.2 隱孢子蟲特異性基因的擴(kuò)增
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 不同洗脫次數(shù)的對比
    2.2 不同振蕩方式的比較
    2.3 不同振蕩頻率的比較
    2.4 不同振蕩時間的比較
    2.5 不同洗滌液的比較
    2.6 生菜表面污染隱孢子蟲卵囊總體回收率
    2.7 洗脫液中卵囊DNA提取方式的優(yōu)化
        2.7.1 提取DNA的濃度、純度和提取率比較
        2.7.2 提取DNA的穩(wěn)定性
        2.7.3 提取DNA的特異性
        2.7.4 提取DNA的敏感性
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微小隱孢子蟲卵囊擴(kuò)增及其純化方法篩選[J]. 張璐,劉珍珍,王臣榮,張振杰,胡蘇輝,王榮軍,寧長申,菅復(fù)春.  中國病原生物學(xué)雜志. 2018(02)
[2]鮮切果蔬中4種病原微生物多重PCR檢測技術(shù)[J]. 馮可,胡文忠,姜愛麗,薩仁高娃,徐永平,司琦,馬新秀.  食品科學(xué). 2018(06)
[3]4種方法提取牛肉干DNA的效果比較[J]. 石盼盼,魏法山,馮波.  食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2016(07)
[4]自制固相萃取柱-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定果蔬中的8種真菌毒素[J]. 王蒙,姜楠,韋迪哲,馮曉元.  食品科學(xué). 2016(10)
[5]六種試劑盒提取血液基因組DNA效果比較[J]. 張艷,王金鴻,呂亞莉,菅復(fù)春,張龍現(xiàn),寧長申.  中國草食動物科學(xué). 2014(02)



本文編號：2922183