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二氧化硅誘導(dǎo)的肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與凋亡機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-13 14:11
  背景與目的:硅肺是由于長(zhǎng)期吸入大量游離二氧化硅粉塵所致,以肺部廣泛結(jié)節(jié)性纖維化為主的疾病,是塵肺中最常見、進(jìn)展最快、危害最嚴(yán)重的一種類型。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress, ERS)是以內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白聚集和鈣離子平衡紊亂為主要特征,短期的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)細(xì)胞是一種保護(hù)作用,在嚴(yán)重和長(zhǎng)期的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激下,未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response,UPR)激活導(dǎo)致細(xì)胞凋亡通路。本研究主要探討SiO2是否誘導(dǎo)肺泡巨噬細(xì)胞(alveolar macrophages,AM)發(fā)生內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激并介導(dǎo)凋亡(Apoptosis)。方法:(1)以200μg/ml SiO2刺激的RAW264.7細(xì)胞為模型,作用時(shí)間點(diǎn)為0小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí),透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變,實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time PCR)及蛋白印跡法(Western blot)分別檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志物免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白(immunoglobulin heavy chain binding protein, BiP)和CCA... 

【文章來(lái)源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

二氧化硅誘導(dǎo)的肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與凋亡機(jī)制研究


Si02對(duì)RAW264.7細(xì)胞形態(tài)的觀察1,2,3,4為對(duì)照組Oh5,6,7,8為Si02誘導(dǎo)細(xì)胞6h9,10,11,12為24h

生長(zhǎng)曲線,對(duì)照組,情況,時(shí)間點(diǎn)


降低(P<0.()5); +10^iM/2(V^^ 4-PBA組與對(duì)照組生長(zhǎng)曲線基本一致,其細(xì)胞增殖能力與對(duì)照組無(wú)顯著差異(表2-2,圖2-13)。 表2-2 MTT法檢測(cè)使用4-PBA后RAW264.7細(xì)胞增殖 MTT 時(shí)間點(diǎn)/ 對(duì)照組 200^g/ml l^M lO^M 20^M各組 OD 值 SiCh 組 4-PBA 組 4-PBA 組 4-PBA 組Oh 0.803士0.068 0.803±0.068 0.803±0.068 0.803±0.068 0.803±0.0686h 1.201±0.070 0.717±0.045 1.001±0.020 1.489±0.023 1.498±0.017* # # #12h 1.493±0.071 1.040±0.042 1.001±0.046 1.517±0.046 1.474士 0.039* * # #24h 2.086±0.028 1.534±0.060 1.518±0.023 2.556±0.034 2.389±0.037* * * # * #48h 2.501±0.035 1.949±0.067 2.054±0.075 2.615±0.019 2.714±0.018 * * # #(注:*P<0.05 VS 對(duì)照組,# P<0.05 VS Si02 組)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]C/EBP同源蛋白介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡途徑參與腹主動(dòng)脈狹窄致大鼠心肌肥厚[J]. 張振英,劉秀華,孫勝,榮飛,郭曉筍,胡維誠(chéng).  生理學(xué)報(bào). 2009(02)
[2]Caspase Family Proteases and Apoptosis[J]. Ting-Jun FAN Li-Hui HAN Ri-Shan CONG Jin LIANG College of Marine Life Sciences,Division of Life Science and Technology,Ocean University of China,Qingdao 266003,China;College of Chemistry & Chemical Engineering,Ocean University of China,Qingdao 266003,China.  Acta Biochimica et Biophysica Sinica. 2005(11)

碩士論文
[1]2006-2010年湖南省塵肺病流行病學(xué)特征分析[D]. 聶云峰.中南大學(xué) 2012
[2]核轉(zhuǎn)錄因子Snail調(diào)控二氧化硅誘導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)型作用機(jī)制的研究[D]. 李飛鳳.中南大學(xué) 2011
[3]Rho/ROCK信號(hào)通路在矽塵誘導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)型中的作用機(jī)制研究[D]. 梁冠男.中南大學(xué) 2009



本文編號(hào):2914669

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