【摘要】：中華按蚊是中國及東南亞國家最主要的瘧疾等疾病的傳播媒介之一,防控中華按蚊,切斷其傳播途徑,是控制瘧疾的關鍵。利用殺蟲劑控制傳播媒介是抗擊瘧疾的主要方法,擬除蟲菊酯類殺蟲劑是世界衛(wèi)生組織唯一批準可用于浸漬蚊帳的殺蟲劑,其中溴氰菊酯是中國應用最多的一種殺蟲劑。在殺蟲劑的長期作用下,蚊蟲不僅形成嚴重的抗藥性,其行為還發(fā)生改變,嚴重削弱現(xiàn)有防治手段的效果。中華按蚊對溴氰菊酯的抗性已有大量報道,但其行為變化還無相關研究。本研究以實驗室敏感種群(WX-LS)和云南元陽(YY-FR)、重慶璧山(BS-FR)、安徽五河(WH-FR)野外抗性種群為研究對象,采用WHO區(qū)分劑量標準和方法測定中華按蚊對溴氰菊酯的抗性水平,利用分子手段進行物種鑒定和檢測kdr基因突變情況;利用WHO錐形器分別測定這四個種群對溴氰菊酯蚊帳的接觸性應激行為;對云南元陽野外和實驗室敏感種群進行轉錄組測序,初步探討及推測其行為改變的分子機制。主要研究結果如下:(1)中華按蚊的抗性水平及kdr突變檢測通過接觸筒法對中華按蚊溴氰菊酯抗藥性進行生測,發(fā)現(xiàn)元陽、璧山和五河的野外種群對溴氰菊酯均產(chǎn)生了抗性,其中五河種群的抗性水平最高,其次是元陽和璧山種群。Kdr突變檢測結果顯示,璧山和五河種群均有3種kdr突變類型,分別為L1014F(TTT和TTC)和L1014C(TGT),元陽種群沒有kdr突變。璧山種群的kdr突變頻率為82.88%,五河種群的突變頻率為100%。(2)不同地理種群對溴氰菊酯的接觸性應激行為測定采用錐形器測定方法比較了實驗室敏感蚊蟲和野外抗性蚊蟲對溴氰菊酯處理蚊帳(Deltamethrin treated net,DTN)的接觸性應激行為,研究結果發(fā)現(xiàn),敏感種群對溴氰菊酯有明顯的接觸性應激反應,而野外抗性種群對溴氰菊酯的應激反應與實驗室敏感種群相比明顯減弱。元陽抗性種群無kdr突變,其接觸性應激行為也明顯減弱,說明行為改變與kdr突變無關。(3)元陽行為弱化種群與實驗室敏感種群的轉錄組測序與表達譜分析采用錐形器測定方法篩選應激行為弱化的元陽種群,通過轉錄組測序比較元陽種群和實驗室敏感種群的差異表達基因。分析結果發(fā)現(xiàn)有4101個基因顯著差異表達,其中,在元陽種群中上調表達的基因有1843個,下調表達的基因有2258個。GO注釋的差異基因有2494個,主要顯著富集在生物過程和分子功能兩部分,包括氧化還原過程、單個有機體代謝過程、有機循環(huán)化合物結合和催化活性等類別。差異上調表達基因的KEGG分析結果顯示共有10條通路是顯著富集的,分別為真核生物核糖體合成、DNA復制、錯配修復、RNA聚合酶、核苷酸切除修復、堿基切除修復、RNA轉運等;差異下調表達基因的KEGG分析發(fā)現(xiàn)碳代謝、淀粉和蔗糖代謝和丙酮酸代謝等通路是顯著富集的。推測野外蚊蟲接觸性應激行為的減弱可能與能量供應水平減弱有關。
【學位授予單位】：重慶師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R184.31
【圖文】：

圖 2.1 采樣地圖Figure 2.1 Sampling map陽縣是處于云南省南部的紅河州，在哀牢山和紅河的南邊，也因其處元江之南，故得此名。元陽縣是低緯度高海拔的地區(qū)，其氣候屬亞熱氣候類型，具有“一山分四季，隔里不同天”的氣候特點，年平均氣溫 2

圖 2.2 中華按蚊分子鑒定與 kdr 基因擴增結果1：安徽野外樣品；2：重慶野外樣品；3：云南野外樣品olecular identification and kdr gene amplification results of Anoample of Anhui; 2: Field sample of Chongqing; 3: Field sample

13圖 2.3 中華按蚊的 kdr 基因核苷酸序列色譜圖鈉離子通道基因 1014 位點上的密碼子用矩形表示；鑒定出了 8 種基因型，5 種雜合型 (K = G/T;Y = T / C;S = G / C)

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