【摘要】：【研究目的】探討草甘膦類除草劑農(nóng)達(roundup,活性成分為草甘膦)對雄性Balb/c小鼠生殖功能與免疫功能的影響。【研究方法】1.將60只成年SPF級雄性Balb/c小鼠隨機分為四個劑量組,分別為陰性對照(蒸餾水)組、20 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組、200 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組和2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組,每組15只實驗動物。選擇經(jīng)口灌胃的染毒的方式,染毒容量為20ml/kg(每千克小鼠體重灌胃重量為20毫克),每天1次,連續(xù)染毒30d。染毒結束后,對小鼠精子數(shù)量、精子活動度和血清中睪酮(T)水平進行測定。制取小鼠睪丸組織勻漿,測定乳酸脫氫酶(LDH)、琥珀酸脫氫酶(SDH)、γ-谷氨酰轉移酶(γ-GT)三種睪丸酶的活力以及氧化應激指標丙二醛(MDA)含量和總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活力。在光學顯微鏡下觀察小鼠睪丸組織結構的病理變化,采用缺口末端標記技術(TUNEL法)對實驗小的鼠睪丸組織細胞的凋亡情況進行檢測。2.將40只成年SPF級雄性Balb/c小鼠隨機分為4組,每組10只實驗動物。實驗設立陰性對照(蒸餾水)組和20農(nóng)達染毒劑量組、200 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組,采用經(jīng)口灌胃方式對動物進行染毒,染毒容量為20 ml/kg,每天1次,連續(xù)30d。實驗動物模型建立后,分別計算每個農(nóng)達染毒劑量組小鼠脾臟系數(shù)、胸腺系數(shù),采用流式細胞術(FCM)分析小鼠脾臟中CD3~+、CD4~+、CD8~+T細胞,CD45r~+B細胞,CD49b~+NK細胞比例和小鼠胸腺中CD4~+、CD8~+T細胞比例并分別計算小鼠脾臟和胸腺CD4~+T/CD8~+T比值;同時分別測定小鼠脾臟組織勻漿和胸腺組織勻漿中氧化應激指標MDA含量和T-SOD、GSH-Px活力。【研究結果】1.農(nóng)達染毒對雄性Balb/c小鼠生殖功能的影響與陰性對照組相比,200農(nóng)達染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組小鼠的體重和各農(nóng)達染毒組小鼠的睪丸重量有明顯降低(P0.01);200農(nóng)達染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組小鼠精子數(shù)量明顯減少、精子活動度顯著降低;各劑量農(nóng)達染毒組小鼠血清睪酮水平與陰性對照組相比均有明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。農(nóng)達染毒可引起實驗小鼠睪丸組織不同程度的病理損傷,主要表現(xiàn)為各級生精細胞排列紊亂及脫落,同時出現(xiàn)了部分細胞變性的、壞死甚至核固縮,在曲細精管的管腔中可以見到還未成熟的生精細胞的脫落,成熟精子數(shù)量明顯減少,隨染毒劑量增加,損害進一步加重。TUNEL法檢測表明200mg/kg農(nóng)達染毒劑量組、2 000mg/kg染毒組小鼠睪丸組織細胞凋亡率明顯高于陰性對照組(P0.01)。200 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組小鼠睪丸勻漿中LDH活性有下降趨勢,SDH活性有先升高后降低的趨勢,各染毒組小鼠睪丸組織勻漿中LDH、SDH和γ-GT活性與陰性對照組相比無顯著差異(P0.05)。2 000mg/kg農(nóng)達染毒劑量組小鼠睪丸組織勻漿中MDA含量有明顯升高(P0.01),各劑量染毒組小鼠睪丸組織勻漿中GSH-Px活性均降低,與陰性對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05,P0.01)。2.農(nóng)達染毒對雄性Balb/c小鼠免疫功能的影響農(nóng)達染毒30 d后,200 mg/kg農(nóng)達染毒組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒組小鼠脾臟重量有明顯減低(P0.01)。各劑量農(nóng)達染毒組小鼠脾臟CD4~+T細胞比例有明顯升高(P0.01),200農(nóng)達染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組小鼠脾臟CD3~+、CD8~+T細胞比例明顯高于陰性對照組;CD3~-CD45r~+B細胞比例則明顯低于陰性對照組(P0.01);CD3~-CD49b~+NK細胞比例無明顯變化。各染毒組小鼠脾臟CD4~+T/CD8~+T比值均降低,但只有200 mg/kg劑量組比值與陰性對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。200 mg/kg、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒組小鼠胸腺CD4~+、CD8~+T細胞比例明顯高于陰性對照組(P0.05,P0.01);各染毒組小鼠胸腺CD4~+T/CD8~+T比值均有顯著降低(P0.01)。各染毒組小鼠脾臟勻漿中MDA含量均顯著增加,GSH-Px活力均明顯降低(P0.05,P0.01)。200mg/kg農(nóng)達染毒劑量組、2 000 mg/kg農(nóng)達染毒劑量組小鼠胸腺勻漿中MDA含量明顯升高,T-SOD、GSH-Px活力有明顯降低(P0.05,P0.01)。【研究結論】1.在本實驗染毒時間和劑量范圍內(nèi),除草劑農(nóng)達對雄性Balb/c小鼠的生殖功能有一定的毒性作用,它可能透過血睪屏障對睪丸組織產(chǎn)生直接的損害作用,降低小鼠精子數(shù)量、精子活動度和血清睪酮水平。2.農(nóng)達可能破壞雄性Balb/c小鼠睪丸組織相關酶活性的平衡,破壞小鼠睪丸組織內(nèi)氧化平衡狀態(tài),誘導睪丸組織細胞的凋亡。3.農(nóng)達可能通過影響雄性Balb/c小鼠脾臟、胸腺淋巴細胞亞群和氧化應激狀態(tài),從而影響小鼠機體的免疫狀態(tài)。
【圖文】：

農(nóng)達分子結構式

圖 2 各劑量農(nóng)達染毒組小鼠體重的變化情況2 農(nóng)達染毒對小鼠睪丸、附睪重量及睪丸系數(shù)、附睪系數(shù)的影響方差分析結果顯示（見表 1-5），，與陰性對照組相比，各劑量染毒組小鼠睪丸重
【學位授予單位】：濟南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R114

【參考文獻】

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1 王勇;司麗芳;李相能;李占生;;銀杏葉提取物增強大鼠脾臟和胸腺的免疫功能[J];細胞與分子免疫學雜志;2015年06期

2 董靜梅;汪繼兵;秦黎黎;周云鶴;孫婧瑜;夏麗;周萍;;高原環(huán)境下運動氧化應激與免疫反應相關聯(lián)的生物標志研究進展[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學;2015年05期

3 劉琴;;中化國際:國內(nèi)農(nóng)達銷量創(chuàng)歷史新高覆蓋亞太重點農(nóng)藥市場[J];農(nóng)藥市場信息;2015年12期

4 宋晴雯;常秀麗;周志俊;;化學物睪丸毒性機制的研究現(xiàn)狀[J];癌變·畸變·突變;2015年02期

5 王奭;曹炬;張莉萍;;多種炎性疾病患者外周血CD4~+和CD8~+T淋巴細胞的檢測與臨床意義分析[J];檢驗醫(yī)學與臨床;2014年21期

6 趙文紅;俞慧;張建國;束莉;;草甘膦對小鼠睪丸支持細胞凋亡及雄激素結合蛋白、波形蛋白mRNA表達的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年11期

7 楊裕志;王倫保;;草甘膦中毒后疑似胃癌1例報告[J];中國實用外科雜志;2013年11期

8 李靜;李燕芳;潘晨;徐莉春;;氯氰菊酯對大鼠睪丸組織氧化應激的影響[J];環(huán)境與健康雜志;2012年08期

9 劉毓剛;劉霞;吳麗娟;;FSC/SSC和CD45/SSC分群法流式T淋巴細胞亞群分析的實驗研究[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2012年02期

10 趙偉;曹曦予;吳艷萍;張丹丹;張e

本文編號：2703387